蛋白質紫外分光測定實驗
實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此蛋白質具有吸收紫外線的性質,吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量呈正比關系,可用作定量測定。由于核酸在280波長處也有光吸收,對蛋白質的測定有干擾作用,但核酸的最大吸收峰在260nm處,如同時測定260nm的光吸收,通過計算可能消除其對蛋白質測定的影響,因此溶液中存在核酸時必須同時測定280nm及260nm之光密度,方可通過計算測得溶液中的蛋白質濃度。利用紫外線吸收法測定蛋白質含量的優點是迅速、簡便、不消耗樣品,低濃度鹽類不干擾測定。因此,在蛋白質和酶的生化制備中(特別是在柱色譜分離中)廣泛應用。此法的缺點是(1)對于測定那些與標準蛋白質中酪氨酸和色氨酸含量差異較大的蛋白質,有一定的誤差,(2)若樣品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外線的物質,會出現較大的干擾。不同蛋白質和核酸的紫外吸收是不同的,即使經過校正,測定結果也......閱讀全文
蛋白質紫外分光測定實驗
由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此蛋白質具有吸收紫外線的性質,吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量呈正比關系,可用作定量測定。 由于核酸在280波長處也有光吸收,對蛋白質的測定有干擾作用,但核酸的最大吸收峰在
蛋白質紫外分光測定實驗
蛋白質紫外分光測定實驗 實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此蛋白質具有吸收紫外線的性質,吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量呈正比關系,可用作定量測定。
蛋白質紫外分光測定實驗
實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此蛋白質具有吸收紫外線的性質,吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量呈正比關系,可用作定量測定。 由于核酸在280波長處也有光吸收,對蛋白質的測定有干擾作用,但
蛋白質紫外分光測定實驗
蛋白質紫外分光測定實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此蛋白質具有吸收紫外線的性質,吸收高峰在280nm波長處
蛋白質紫外分光測定實驗
實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此蛋白質具有吸收紫外線的性質,吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量呈正比關系,可用作定量測定。由于核酸在280波長處也有光吸收,對蛋白質的測定有干擾作用,但核酸的最大吸收峰在260nm
蛋白質紫外分光測定實驗
實驗方法原理由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此蛋白質具有吸收紫外線的性質,吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量呈正比關系,可用作定量測定。由于核酸在280波長處也有光吸收,對蛋白質的測定有干擾作用,但核酸的最大吸收峰在260nm處
紫外分光光度法測定蛋白質含量實驗設計
一、實驗目的???1.學習紫外分光光度法測定蛋白質含量的原理。???2.掌握紫外分光光度法測定蛋白質含量的實驗技術。????3.掌握TU-1901紫外-可見分光光度計的使用方法并了解此儀器的主要構造。?二、實驗原理????1.紫外-可見分光光度法,是以溶液中物質的分子或離子對紫外和可見光譜區輻射能的
紫外分光光度法測定蛋白質
1 原理: pro及其降解產物的芳香環基 ,在紫外區內對某一波長具有一定的光選擇吸收,在280nm下,光吸收與pro濃度(3~8mg/ml)成直線關系,因此,通過測定pro溶液的吸光度,并參照事先用K氏定氮法分析的標準樣品,從標準曲線查出蛋白質的含量。 2 試劑: (1) 0.1mol/l
紫外分光光度法測定蛋白質含量
考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合,在0-1000ug/ml范圍內,于波長595nm處的吸光度與蛋白質含量成正比,可用于蛋白質含量的測定。考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合迅速,結合產物在室溫下10分鐘內較為穩定,是一種較好的蛋白質定量測定方法。 1. 實驗部分 1.1 儀器與試劑: Labte
紫外分光光度法測定蛋白質含量
一、實驗目的? ?1、?學習紫外分光光度法測定蛋白質含量的原理;? ?2、?掌握紫外分光光度法測定蛋白質含量的實驗技術;?? ?3、?掌握UV-1700PC紫外-可見分光光度計的使用方法并了解此儀器的主要構造。? ? 二、實驗原理? ?紫外-可見吸收光譜法又稱紫外-可見分光光度法,它是研究分子吸收1
紫外分光光度計——蛋白質含量測定
一、實驗目的 ?1.學習紫外分光光度法測定蛋白質含量的原理。 ?2.掌握紫外分光光度法測定蛋白質含量的實驗技術。 ?3.掌握TU-1901紫外可見分光光度計的使用方法并了解此儀器的主要構造。??二、實驗原理 ?1.紫外-可見分光光度法,是以溶液中物質的分子或離子對紫外和可見光譜區輻射能的選擇性吸收為
紫外分光光度法測定DNA蛋白質含量
一、實驗目的????學習紫外分光光度法測定蛋白質含量的原理;??掌握紫外分光光度法測定蛋白質含量的實驗技術;??掌握UV-1700紫外可見分光光度計的使用方法并了解此儀器的主要構造。??二、實驗原理????紫外可見吸收光譜法又稱紫外可見分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波長范圍內的吸
紫外分光光度法測定DNA蛋白質含量
一、實驗目的????學習紫外分光光度法測定蛋白質含量的原理;??掌握紫外分光光度法測定蛋白質含量的實驗技術;??掌握UV-1700紫外可見分光光度計的使用方法并了解此儀器的主要構造。??二、實驗原理????????紫外可見吸收光譜法又稱紫外可見分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波長范
用紫外分光度計測定溶液的濃度實驗
用紫外分光度計測定溶液的濃度一、實驗材料與儀器羅丹明B,蒸餾水,紫外分光度計,10ml比色皿(2個),250ml容量瓶,燒杯,移液管,比色管(若干)二、實驗步驟①? 用稱量紙稱取0.0025g的羅丹明B,放入燒杯中加入適量的蒸餾水溶解,并用玻璃棒攪拌均勻,然后轉入250ml容量瓶中,貼上標簽待用(此
蛋白質的測定方法之紫外分光光度法
1 原理:pro及其降解產物的芳香環基 ,在紫外區內對某一波長具有一定的光選擇吸收,在280nm下,光吸收與pro濃度(3~8mg/ml)成直線關系,因此,通過測定pro溶液的吸光度,并參照事先用K氏定氮法分析的標準樣品,從標準曲線查出蛋白質的含量。2?? 試劑:(1) 0.1mol/l檸檬酸水溶液
淺析紫外分光光度計測定蛋白質含量原理
紫外分光光度計測定蛋白質含量原理是為了學習紫外分光光度法測定蛋白質含量的原理。掌握紫外分光光度法測定蛋白質含量的實驗技術。掌握TU-1901紫外可見分光光度計的使用方法并了解此儀器的主要構造。??? 紫外可見分光光度計實驗原理是以溶液中物質的分子或離子對紫外和可見光譜區輻射能的選擇性吸收為基礎而建
核酸的定量測定實驗——紫外分光光度法
實驗方法原理核酸、核苷酸及衍生物都具有共軛雙鍵系統, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波長處。一般在260 nm 波長下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值為0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值約為0.020 , 故測定未知濃度R
蛋白質含量測定法紫外可見分光光度法
本法系依據蛋白質分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸,其在280nm波長處具最大吸光度,在一定范圍內其吸光度大小與蛋白質濃度呈正比。 本法操作簡便快速,適用于純化蛋白質的檢測,一般供試品濃度為0.2~2mg/ml。本法準確度較差,干擾物質多。測定法(2)適用于供試品溶液中存在核酸時
DNA的Tm值測定實驗_紫外分光光度法
當DNA 的稀鹽溶液加熱到80~100 ℃ 時, 雙螺旋結構即發生解體, 兩條鏈分開, 形成無規線團。一系列物化性質也發生改變: 260 nm區紫外吸收值增高(增色效應) , 粘度降低, 浮力密度降低等。本實驗旨在準確理解DNA 的Tm 值的定義及測定Tm 值的意義,掌握DNA 的Tm 值的測定方法
紫外吸收法測定蛋白質含量
(一)原 理蛋白質分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等殘基,它們的結構中具有共軛雙鍵,對紫外光有吸收作用,其最大值在280nm波長處。在此波長附近,蛋白質溶液的光吸收值與其含量(范圍是0.1~1.0mg/ml)成正比,因此,280nm的吸光度可用作蛋白質的定量測定。若將已知不同濃度的蛋白質標準溶液在
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點?受哪些因素的影響和限制? 答: 優點是:方法簡單、靈敏、快速、高選擇性,且穩定性好,不消耗樣品,低濃度的鹽類不干擾測定。 缺點是:儀器昂貴,而且不同的蛋白質的紫外吸收是不相同的,測定結果存在著一定的誤差,受光源、溶液的PH值、比色皿材質、緩沖介質溶
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點?受哪些因素的影響和限制? 答: 優點是:方法簡單、靈敏、快速、高選擇性,且穩定性好,不消耗樣品,低濃度的鹽類不干擾測定。 缺點是:儀器昂貴,而且不同的蛋白質的紫外吸收是不相同的,測定結果存在著一定的誤差,受光源、溶液的PH值、比色皿材質、緩沖介
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點?受哪些因素的影響和限制? 答: 優點是:方法簡單、靈敏、快速、高選擇性,且穩定性好,不消耗樣品,低濃度的鹽類不干擾測定。 缺點是:儀器昂貴,而且不同的蛋白質的紫外吸收是不相同的,測定結果存在著一定的誤差,受光源、溶液的PH值、比色皿材質、緩沖介
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點?受哪些因素的影響和限制? 答: 優點是:方法簡單、靈敏、快速、高選擇性,且穩定性好,不消耗樣品,低濃度的鹽類不干擾測定。 缺點是:儀器昂貴,而且不同的蛋白質的紫外吸收是不相同的,測定結果存在著一定的誤差,受光源、溶液的PH值、比色皿材質、緩沖介
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點?受哪些因素的影響和限制? 答: 優點是:方法簡單、靈敏、快速、高選擇性,且穩定性好,不消耗樣品,低濃度的鹽類不干擾測定。 缺點是:儀器昂貴,而且不同的蛋白質的紫外吸收是不相同的,測定結果存在著一定的誤差,受光源、溶液的PH值、比色皿材質、緩沖介
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點?受哪些因素的影響和限制?答:優點:方法操作簡便、迅速、不需要復雜和昂貴的設備,不消耗樣品,測定后仍能回收利用,低濃度的鹽和大多數緩沖溶液不干擾測定。缺點:準確度和靈敏度差一點。干擾物質多;對于測定那些與標準蛋白質中鉻氨酸和色氨酸含量差異較大的蛋白質,有一
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點?受哪些因素的影響和限制?答:優點:方法操作簡便、迅速、不需要復雜和昂貴的設備,不消耗樣品,測定后仍能回收利用,低濃度的鹽和大多數緩沖溶液不干擾測定。缺點:準確度和靈敏度差一點。干擾物質多;對于測定那些與標準蛋白質中鉻氨酸和色氨酸含量差異較大的蛋白質,有一
蛋白質紫外吸收與濃度測定方法
[原理]由于蛋白質中存在著含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,因此蛋白質溶液在280nm處具有紫外吸收高峰。在一定濃度范圍內,蛋白質溶液在此波長處的吸光度與其濃度呈正比關系,因此利用這一性質可進行蛋白質定量測定。該法迅速、簡便、不消耗樣品、低濃度鹽類不干擾測定,可測定0.1~1.0mg/mL的蛋白質溶液。
紫外分光光度法測定有機物實驗方法
紫外分光光度法測定有機物實驗方法紫外分光光度法測定未知物?1.儀器1.1紫外分光光度計(T6);配石英比色皿(25px):4個;1.2容量瓶(100mL、50mL):各10只;1.3吸量管(1mL、2mL、5mL、10mL):各1支;1.4移液管(20mL、25mL、50mL):各1支。 2.試
蛋白質的定量測定——紫外(UV)吸收測定法
實驗原理蛋白質分子中所含酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,使蛋白質在280nm波長處有最大吸收值。在一定濃度范圍內,蛋白質溶液的光吸收值(A280)與其含量成正比關系,可用作定量測定。紫外線吸收法測定蛋白質含量的優點是迅速,簡便,不消耗樣品,低濃度鹽類不干擾測定。因此,廣泛應用在柱層析分離中蛋白