免疫標記法及其分類
免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮，檢測產物發出的熒光，熒光強度與Mb濃度呈正比，可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示（△Mb）表示。該法重復性好，線性范圍寬，具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例，首先將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體。除去未結合抗體，然后加受檢標本，使其中的蛋白抗原與固相抗體形成抗原抗體復合物。洗滌除去未結合物，接著加入熒光標記的抗體，使之與抗原特異性結合，形成抗體—抗原—抗體復合物。*后根據熒光強度，即可對蛋白抗原進行定量。傳統的熒光免疫法受本底熒光的干擾較大，時間分辨熒光免疫測定法是以具有特長壽命的稀土金屬如銪，作為標記物，加入正常液后激發測定，能有效去除短壽命本底熒光的干擾。2.放射免疫法放射免疫法是以過量的未標記抗原與放射性物質標記的抗原，競爭性地與抗體結合，形成有放射性的抗原—抗體復合物與無放射性的抗原—抗體復......閱讀全文
免疫標記法及其分類
免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮，檢測產物發出的熒光，熒光強度與Mb濃度呈正比，可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示（△Mb）表示。該法重復性好，線性范圍寬，具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例，首先將特異性抗體與
免疫熒光技術的實驗方法及其分類（免疫標記法和熒...2
一、免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮，檢測產物發出的熒光，熒光強度與Mb濃度呈正比，可在8min內得出結果。結果以 Mb每小時釋放的速率表示(△Mb)表示。該法重復性好，線性范圍寬，具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例，首先將特異性
免疫電鏡膠體金標記法（簡稱金標法）
1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)（1）超薄切片厚50～70nm左右，載于200～300網孔的鎳網上；（2）滴1%的H2O2液1滴于蠟板上，將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h；（3）雙蒸水洗3次，每次10分鐘。第1、2次洗法如（2），浮于液面上，第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗，水流
改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基，再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯，在標記前先用2，4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后，再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。 (1) 取HRP 5mg溶
免疫電鏡膠體金標記法
第四節 免疫電鏡膠體金標記法 金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，
Western－Blot－(免疫印記法)常識問答
1. 什么是western blot? 答：WB又稱免疫印記法.是將生物大分子物質通過不同途徑轉移到固相載體的過程。 2. western blot 有什么優點？ 答：靈敏，可達ng級，用Ecl顯色法理論上可達pg 級。方便，特異性高。 3. western blot 的
Western－Blot－(免疫印記法)常識問答
1. 什么是western blot? 答：WB又稱免疫印記法.是將生物大分子物質通過不同途徑轉移到固相載體的過程。 2. western blot 有什么優點？ 答：靈敏，可達ng級，用Ecl顯色法理論上可達pg 級。方便，特異性高。 3. western blot 的
免疫電鏡膠體金標記法2
（4）膠體金與蛋白A的結合和純化，依上法測得所需的比例超過10%，即每30ml膠體中加入2mg蛋白A，5min后，加入0.3ml PEG作為穩定劑，然后以15000r/min離心45min（不同方法制備的金離心速度不同），略帶紅色的松散的復合物沉淀即為PAg復合物。小心棄去上清液，加入PBS沖洗
免疫電鏡膠體金標記法1
金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫電鏡膠體金標
三大免疫標記法的優缺點
“撇脂定價法”又稱高價法【優點】1.利用高價產生的厚利，使企業能夠在新產品上市之初，即能迅速收回投資，減少了投資風險。2.在全新產品或換代新產品上市之初，顧客對其尚無理性的認識，此時的購買動機多屬于求新求奇。利用這一心理，企業通過制定較高的價格，以提高產品身份，創造高價、優質、名牌的印象。3.先制定
免疫熒光技術的實驗方法及其分類
一、免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮，檢測產物發出的熒光，熒光強度與Mb濃度呈正比，可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示(△Mb)表示。該法重復性好，線性范圍寬，具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例，首先將特異性抗
免疫熒光技術的實驗方法及其分類
一、免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮，檢測產物發出的熒光，熒光強度與Mb濃度呈正比，可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示(△Mb)表示。該法重復性好，線性范圍寬，具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例，首先將特異性抗
免疫酶標技術
1） 直接法1．標本固定。2．PBS洗滌2×3分鐘。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制內源性過氧化物，室溫10～20分鐘。4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。5．滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6．PBS洗滌3×3分鐘。7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘，鏡下控制染色
免疫酶標技術
中文名稱免疫酶標技術英文名稱immunoenzymatic technique定 義以酶標記抗體（或抗原），通過相應底物被酶解后的顯色反應，對細胞和組織標本中的抗原-抗體復合體進行定位、定性分析和鑒定的方法。也可根據酶催化底物顯色的深淺程度，定量測定體液標本中待測抗原或抗體的含量。應用學科細胞生物
免疫酶標技術
免疫酶標技術1）??直接法1．標本固定。2．PBS洗滌2×3分鐘。3．1％?H2O2（或1％?H2O2?甲醇）抑制內源性過氧化物，室溫10～20分鐘。4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。5．滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6．PBS洗滌3×3分鐘。7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘
免疫酶標技術
實驗方法原理 先將酶與抗體結合形成酶標抗體，然后和相應的抗原反應，使抗原抗體復合物上帶有酶分子，再與酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃聯苯胺）發生顯色反應，在顯微鏡下觀察，根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBSH2O2血清儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. ?標本固定；2.
Western－Blot－(免疫印記法)常識問答（一）
1. 什么是western blot?答：WB又稱免疫印記法.是將生物大分子物質通過不同途徑轉移到固相載體的過程。2. western blot 有什么優點？答：靈敏，可達ng級，用Ecl顯色法理論上可達pg 級。方便，特異性高。3. western blot 的具體步驟是什么？答：一. 制樣（以提
Western－Blot－(免疫印記法)常識問答（二）
4. western blot 所需buffer 的配方是什么？答：主要的buffer有：1） 2×Separation buffer (PH: 8.8)0.75M TRIS.HCl 90.825g0.2% SDS 10ml 20% SDSTotal: 1000ml2) 30% gel Soluti
免疫電鏡膠體金標記法操作大全
金標法是Faulk和Taylor(1971)提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原?反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫電鏡膠體金
放射免疫分析直接標記法與間接標記法的說法正確的是
正確答案:A解析：采用放射性碘制備標志物的基本原理是以放射性碘原子通過取代反應置換被標志物分子中酪氨酸或酪胺殘基以及組胺殘基上的氫原子。因此，凡蛋白質、肽類等化合物在結構上含有上述基團，均可用[SB125.gif]I直接標記。而對那些不含上述基團的甾體激素或藥物分子則必須在分子結構上連接相應基團才能
酶標板的分類
這這要根據您的酶標儀進行選擇。 要根據您的酶標儀進行選擇。 另外，又分可拆和不可拆的，對于不可拆的，就是一整塊板上的板條都是連在一起的，那么可拆的就是板子上面的板條是分開的，分出來的板條又有12孔和8孔之分。一般現在用的較多的是可拆的酶標板，如果你之前買了一些這樣的板子，那么現在完全可以只買
細胞免疫化學：免疫酶標技術
1） 直接法1．標本固定。2．PBS洗滌2×3分鐘。3．1％?H2O2（或1％?H2O2?甲醇）抑制內源性過氧化物，室溫10～20分鐘。4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。5．滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6．PBS洗滌3×3分鐘。7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘，鏡下控制染色
HPLC分類及其原理
HPLC分類有很多種，可以根據不同的依據進行分類。1. 根據流動相和固定相的極性不同，HPLC可以分為正相色譜和反相色譜。正相高效液相色譜： 色譜柱中的固定相是由硅膠、氧化鋁等極性化合物組成。當色譜運行時，由于樣品中的極性化合物對固定相有較強的親和力，使它們在色譜柱中的保留時間比非極性化合物長，因此
酶聯免疫吸附酶標記法的方法特點介紹
酶與抗體交聯，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為：將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘 ， 取出
免疫酶標技術——直接法
實驗方法原理先將酶與抗體結合形成酶標抗體，然后和相應的抗原反應，使抗原抗體復合物上帶有酶分子，再與酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃聯苯胺）發生顯色反應，在顯微鏡下觀察，根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定；2. ?PBS
免疫酶標技術——間接法
實驗方法原理將酶標記在第二抗體上，再與已形成的抗原抗體復合物中的第一抗體反應。目前廣泛應用的PAP法、ABC法是在間接法的原理和技術的基礎上發展起來的。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定；2. ?PBS洗滌2×3 分鐘；3. ?1 %H2O2（或1 %
金標免疫層析法簡介
金標免疫層析法(goldimmunochromatographicas say，GICA)是20世紀90年代初發展起來的快速免疫分析技術，是一種建立在免疫層析技術、單克隆抗體技術和金納米晶標記技術基礎上的一種固相檢測技術。 金納米晶標記技術是以金納米晶作為示蹤標記物或顯色劑，應用于抗原抗體反應
關于酶標板的分類介紹
類型主要根據酶標儀進行選擇。又分可拆和不可拆的，對于不可拆的，就是一整塊板上的板條都是連在一起的，那么可拆的就是板子上面的板條是分開的，分出來的板條又有12孔和8孔之分。一般用的較多的是可拆的酶標板，如果你之前買了一些這樣的板子，那么完全可以只買些酶標板條就可以了。不同的廠家做出來的酶標板雖然整
酶標分析儀的分類
按照功能不同酶標分析儀可以分為光吸收酶標儀，熒光酶標儀，化學發光酶標儀和多功能的酶標儀 [3] 。 1.光吸收酶標儀 光吸收酶標儀是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測。特定波長的光通過微孔板中的樣品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關系，由此可以用來定性和定量的檢測。
電子天平及其分類
人們把用電磁力平衡被稱物體重力的天平稱之為電子天平。其特點是稱量準確可靠、顯示快速清晰并且具有自動檢測系統、簡便的自動校準裝置以及超載保護等裝置。 按電子天平的精度可分為以下幾類： 1、超微量電子天平超微量天平的最大稱量是2至5g，其標尺分度值小于（最大）稱量的10-6（次方），如Mettl