放射免疫分析直接標記法與間接標記法的說法正確的是
正確答案:A解析：采用放射性碘制備標志物的基本原理是以放射性碘原子通過取代反應置換被標志物分子中酪氨酸或酪胺殘基以及組胺殘基上的氫原子。因此，凡蛋白質、肽類等化合物在結構上含有上述基團，均可用[SB125.gif]I直接標記。而對那些不含上述基團的甾體激素或藥物分子則必須在分子結構上連接相應基團才能用于放射性碘標記(間接標記法)......閱讀全文
放射免疫分析直接標記法與間接標記法的說法正確的是
正確答案:A解析：采用放射性碘制備標志物的基本原理是以放射性碘原子通過取代反應置換被標志物分子中酪氨酸或酪胺殘基以及組胺殘基上的氫原子。因此，凡蛋白質、肽類等化合物在結構上含有上述基團，均可用[SB125.gif]I直接標記。而對那些不含上述基團的甾體激素或藥物分子則必須在分子結構上連接相應基團才能
改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基，再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯，在標記前先用2，4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后，再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。 (1) 取HRP 5mg溶
免疫電鏡膠體金標記法（簡稱金標法）
1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)（1）超薄切片厚50～70nm左右，載于200～300網孔的鎳網上；（2）滴1%的H2O2液1滴于蠟板上，將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h；（3）雙蒸水洗3次，每次10分鐘。第1、2次洗法如（2），浮于液面上，第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗，水流
什么是酶標記法？
酶與抗體交聯，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為：將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘 ，
什么是熒光標記法
熒光物標記法，神經纖維的末梢可以吸收很多熒光化合物或熒光染料,經軸突逆向運輸到細胞體內,從而建立逆行熒光標記法。例如:Kuypers等(1977)用這種方法在熒光顯微鏡下根據所用熒光物標記物特有的波長顯示吸收熒光物的神經細胞。目前用于神經元標定的熒光物質有十多種。可以根據實驗的要求進行單熒光物、雙標
免疫酶標技術——間接法
實驗方法原理將酶標記在第二抗體上，再與已形成的抗原抗體復合物中的第一抗體反應。目前廣泛應用的PAP法、ABC法是在間接法的原理和技術的基礎上發展起來的。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定；2. ?PBS洗滌2×3 分鐘；3. ?1 %H2O2（或1 %
脈沖標記法的定義
脈沖標記法是指一次性加入示蹤物，標記只持續數小時，之后在一定時間內測量示蹤物在土壤-植物系統中的分配比例。
免疫酶標方法(直接法、間接法、PAP法和雙PAP法)
一、直接法1．標本固定。2．PBS洗滌2×3分鐘。3．1% H2O2（或1% H2O2 甲醇）抑制內源性過氧化物，室溫10～20分鐘。4．正常血清（1:10）孵育，室溫20分鐘。5．滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6．PBS洗滌3×3分鐘。7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘，鏡下控制染色結
連續標記法的技術特點
連續標記法是指在植物生長某個生育期，甚至整個生育期內，對植物進行不間斷標記的一種方法。連續標記法有助于定量全部生育期或某一生育期全部投入，但由于成本高以及技術困難，運用受到限制。
微衛星標記法的特點
與其它標記技術相比，具有以下特點：首先，在每個微衛星DNA?兩端的序列多是相對保守的單拷貝序列，尤其在親緣關系相近的物種間是保守的，而且在一些緊密相關的物種中其重復單位和重復次數具有一定的相似性。其次，這些小的、串聯排列的重復序列經常是通過核苷酸鏈的滑動錯配或者其它未知的過程來改變它們的長度,從而導
自旋標記法的方法介紹
自旋標記 （spin label）， 很多物質的分子不表現電子自旋共振（ESR），但對這些分子，人工地使之與自由基（free radical）結合從而得以用ESR法來研究，獲得獨特的ESR信息，這就是自旋標記法。
實驗動物常用的標記法
常用的標記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號牌等方法。二）烙印法用刺數鉗在動物耳上刺上號碼，然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號上加以涂抹，烙印前最好對烙印部位預先用酒精消毒。（三）針刺法用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水，在耳部、前后肢以及尾部等處刺入皮下，在受刺部位留有一黑色標記。該法適用于大小鼠、豚鼠
免疫酶標技術——直接法
實驗方法原理先將酶與抗體結合形成酶標抗體，然后和相應的抗原反應，使抗原抗體復合物上帶有酶分子，再與酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃聯苯胺）發生顯色反應，在顯微鏡下觀察，根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定；2. ?PBS
常用酶標記法介紹
酶與抗體交聯，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為：將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘 ， 取出
免疫標記法及其分類
免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮，檢測產物發出的熒光，熒光強度與Mb濃度呈正比，可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示（△Mb）表示。該法重復性好，線性范圍寬，具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例，首先將特異性抗體與
BrdU標記法檢驗細胞增殖
1、細胞以1.5×105 /ml細胞數接種于直徑35ml培養皿中（內放置一蓋玻片），培養1天，用含0.4％FCS培養液同步化3天，使絕大多數細胞處于G0 期。 2、終止細胞培養前，加入BrdU（終濃度為30μg/L），37℃，孵育40min。 3、棄培養液，玻片用PBS洗滌3次。 4、甲
雙鏈DNA探針標記法
分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連
PCR擴增標記法探針標記
PCR擴增標記法探針標記???? PCR擴增標記法的原理與普通的核酸PCR相同。即Taq?DNA多聚酶以DNA為模板，在特異引物引導下，在PCR儀中合成cDNA探針。由于在反應體系中加入一定量的標記dNTP，因此擴增的同時又是一個標記過程。cDNA探針PCR擴增法標記原理
化學發光標記法的概念
化學發光標記法是在待檢測的分子(蛋白質、核酸等)上連接可激活發光的化合物的方法。也可以連接上半抗原(如地高辛精、生物素等),再用酶標記的抗半抗原抗體或抗生物素蛋白與之結合,結合于半抗原上的酶標記抗體或抗生物素蛋白能催化化學發光底物發光。如抗體分子以吖啶酯標記,加觸發劑激活后發光,用于檢測固相化的抗原
雙鏈DNA探針標記法的介紹
分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到
BrdU標記法檢測細胞增殖的原理
細胞增殖能力是測定物質毒性、評估藥物安全、評價細胞活力的重要指標之一，被廣泛應用于分子生物學、腫瘤生物學、免疫學和大規模藥物篩選等研究領域。目前檢測細胞增殖能力的方法主要分為兩類：一類是直接測定進行分裂的細胞數來評價細胞增殖能力，如Ki67、BrdU以及EdU細胞增殖檢測等；一類是通過測定活性細胞數
自旋標記法的原理及方法特點
因自由基有不成對電子自旋，所以稱自旋標記（H．M．McConnell）。開始是用氯丙嗪陽離子自由基研究其與DNA的相互作用，后來則用穩定的硝酰（基）自由基類。有N-羥四甲基六氫吡啶（四氫吡咯）衍生物以及N-羥二甲基1，3-氧氮雜環戊烷衍生物等。有合成在標記物的局部含有反應性的官能團，使之與活體高分子
三大免疫標記法的優缺點
“撇脂定價法”又稱高價法【優點】1.利用高價產生的厚利，使企業能夠在新產品上市之初，即能迅速收回投資，減少了投資風險。2.在全新產品或換代新產品上市之初，顧客對其尚無理性的認識，此時的購買動機多屬于求新求奇。利用這一心理，企業通過制定較高的價格，以提高產品身份，創造高價、優質、名牌的印象。3.先制定
分子雜交技術的核酸探針標記法
核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。 分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA
什么是“直接”和“間接”清洗？
什么是“直接”和“間接”清洗？直接清洗通常是指工件在裝滿清洗液的清洗槽內清洗，工件通常裝在帶孔的托盤或工裝籃內。直接清洗的局限性是需要選擇那些不會損傷超聲波清洗槽的清洗液。間接清洗則是將待清洗的工件放在燒杯或不帶孔的托盤內，燒杯或托盤內裝有溶液，而不是直接裝在清洗槽內。當選擇間接清洗時，確認槽內的水
什么是酶標板？
酶標板(ELISA PLATE):在酶聯免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中, 參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例；緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。此外,作為載體的固相聚苯
什么是加標回收
加標回收即在測定樣品時，于同一樣品加入一定量的標準物質進行測定，將測定結果扣除樣品的測定值，計算回收率。加標回收分析在一定程度上能反映測試結果的準確度。在實際應用實應注意加標物質的形態，加標量和樣品基體等。每批相同基體類型的測試樣品應該隨機抽取10%~20%的樣品進行加標回收分析。回收率計算公式：U
什么是酶標法？
酶聯免疫吸附試驗方法簡稱酶標法，是標記技術中的一種，是從熒光抗體技術，同位素免疫技術發展而來的一種敏感，特異，快速并且能自動化的現代技術。 酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體，此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應，并牢固地結合形成仍保持活
流式細胞儀的簡要介紹與注意事項
一、流式細胞儀的檢測范圍1．流式細胞儀可以檢測細胞結構，包括：細胞大小、細胞粒度、細胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細胞周期、RNA含量、蛋白質含量。2．流式細胞儀可以檢測細胞功能，包括：細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原、細胞活性、細胞內細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體。二、流式細胞儀的
放射免疫分析(RIA)正確的是
RIA原理為標記抗原和待測抗原對限量的抗體競爭性結合，反應體系中，標記抗原和已知抗體的量都是固定的