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    細胞凋亡檢測方法

    細胞發生凋亡時,不同區域內(如細胞膜、細胞漿、線粒體、細胞核等)會發生不同的生理生化改變。因此,針對不同區域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。1)Annexin V 凋亡檢測原理:Annexin Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴性磷脂結合蛋白,正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V作為一種磷脂結合蛋白,與PS有高度親和力,它通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。該方法通常結合流式細胞術一起使用。2)線粒體膜電位分析(JC-1)JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位,線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。原理:在線粒體膜電位較高時,......閱讀全文

    流式檢測細胞凋亡還有哪些方法?

      前面講到利用流式細胞術進行細胞凋亡檢測的annexinV/PI雙染色法,今天主要簡要介紹SYTO/PI雙染色法、細胞DNA含量分析法、TUNEL法。  SYTO/PI雙染色法  SYTO系列染料是一種細胞膜通透性的核酸染料,可以自由進入活細胞與細胞內的DNA或者RNA結合,未結合時發射熒光信號的

    凋亡細胞核DNA片段檢測方法進展(一)

    摘  要:當今生物學領域的研究一個熱點之一是細胞凋亡。開展對細胞凋亡的研究,首先要解決是方法學問題。作者從凋亡細胞的特征性核DNA片段檢測著手,闡述了多種凋亡細胞核DNA片段檢測方法以及近年來的一些新進展。細胞凋亡(apoptosis)又稱細胞凋謝或稱程序性細胞死亡(Programmed

    常用細胞凋亡檢測方法(圖)-2

    細胞凋亡的圖片5細胞凋亡的圖片6細胞凋亡的研究方法一、定性和定量研究只定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察(普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)進行定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。二、區分凋亡和壞死可將二

    DNA Ladder的測定方法是怎么一回事?

      不同細胞不同狀態是有不同死法的,具體是細胞凋亡、壞死、還是程序性壞死,需要進一步排查分析來確定。而細胞凋亡是個復雜的過程,針對凋亡時期不同,檢測的方法有所不同。那如何去確定哪條途徑被觸發,在哪個步驟被阻斷,以及抑制劑是否能夠抑制呢?下面介紹幾種常用的測定方法。  一:細胞凋亡的形態學檢測  發生

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-2

    二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面(細胞膜)的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍,又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種,以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較

      ◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較  TUNEL法  細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'

    細胞凋亡檢測方法

      細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。一、細胞凋亡的形態學檢測  根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。  1 光學顯微鏡和倒

    細胞凋亡,細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法

      一、形態學觀察方法   1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。   2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側

    綜述:細胞凋亡(四)

    5 線粒體在細胞凋亡作用中的進一步證據    (1)若將純化的正常的線粒體與純化的細胞核在一起保溫,并不導致細胞核的變化。但若將誘導生成PT孔道的線粒體與純化的細胞核一同保溫,細胞核即開始凋亡變化。(2)細胞死亡調節蛋白不論是抑制死亡的bcl-2家族還是促進細胞死亡的Bax家族均以線粒體作

    細胞凋亡檢測技術與方法

    細胞凋亡(Apoptosis),又稱細胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。細胞凋亡概念提出至今還不到30年的時間,但由于它在保證多

    細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法

    一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨

    六種染色后光鏡觀察法檢測肝癌細胞凋亡

    作者:楊連君,司曉輝,王文亮,王文勇,趙一嶺,方正清[摘  要] 目的:探討簡便易行的在光鏡下通過形態學觀察檢測細胞凋亡的方法,并對其進行比較。方法:首先用6%的乙醇作用6 h誘導人肝細胞癌細胞系HCC9204細胞凋亡,然后進行未固定細胞的臺盼藍染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)雙染色,

    細胞凋亡(TUNEL,TUNEL染色)檢測技術

    細胞凋亡是指為維持內環境穩定,  生物體內細胞在特定的內源或外源信號誘導下,其死亡途徑被激活,并在有關基因的調控下發生的程序性死亡過程。細胞凋亡是程序性死亡過程的一種主要形式,它涉及染色質凝聚和外周化、細胞質減少、核片段化、細胞質致密化、與周圍細胞聯系中斷、內質網與細胞膜融合,最

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-4

    六、Caspase-3活性的檢測 Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3為關鍵的執行分子,它在凋亡信號傳導的許多途徑中發揮功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活,活化的Caspase-3由兩個

    細胞凋亡檢測技術與方法

    細胞凋亡(Apoptosis),又稱細胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。細胞凋亡概念提出至今還不到30年的時間,但由于它在保證多細胞

    細胞凋亡檢測技術與方法

    細胞凋亡(Apoptosis),又稱細胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。細胞凋亡概念提出至今還不到30年的時間,但由于它在保證多

    細胞凋亡實驗

    細胞凋亡(Apoptosis) 又稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指細胞基因調控的一種自主性的自殺現象。即是在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自主結束生命的死亡方式。凋亡一詞最早是由年澳大利亞組織病理學家John Kerr通過研究大鼠肝左葉細胞死亡時,

    常用的幾種細胞凋亡檢測方法詳細步驟介紹

      細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。   第一種 細胞凋亡的形態學檢測   根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。  

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較

    ◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法   細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3

    細胞凋亡檢測(Annexin-V-FITC 單染法)-2

    2 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。常用的DNA 特異性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三種染料與 DNA 的結合是非嵌入式的,主要結合在DNA 的A

    用流式細胞儀檢測細胞凋亡

      細胞凋亡的檢測方法眾多,流式細胞儀檢測凋亡,是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此,具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。在凋亡誘導劑的作用下,首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體,線粒體的功能發生衰

    用流式細胞儀檢測細胞凋亡

    細胞凋亡的檢測方法眾多,流式細胞儀檢測凋亡,是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此,具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。在凋亡誘導劑的作用下,首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體,線粒體的功能發生衰退;后是cas

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-3

    ◆ 細胞壞死與細胞凋亡細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。 一、細胞凋亡的形態學檢測   根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞

    流式細胞術在血液學中的應用(七)

    細胞凋亡研究細胞凋亡是細胞在基因控制下的有序死亡,在疾病發生、發展中有重要作用,因而研究細胞凋亡有重要意義。細胞凋亡檢測方法很多,應用流式細胞儀技術可根據細胞在凋亡過程中發生一系列形態、生化變化從多個角度對細胞凋亡進行定性和定量的測定。 細胞形態變化:通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化來觀

    細胞凋亡的幾種檢測方法

    一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整

    常用細胞凋亡檢測方法(圖)

    一、細胞凋亡的形態學檢測1、光學顯微鏡和倒置顯微鏡(1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。(2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋

    流式細胞儀檢測細胞凋亡

    細胞凋亡的檢測方法眾多,流式細胞儀檢測凋亡,是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此,具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。在凋亡誘導劑的作用下,首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體,線粒體的功能發生衰退;后是cas

    流式細胞儀在細胞凋亡檢測應用

    細胞凋亡的檢測方法眾多,流式細胞儀 檢測凋亡,是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此,具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。下面是一幅凋亡過程圖。在凋亡誘導劑的作用下,首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體

    細胞凋亡的形態學觀察

    細胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根據某些單個細胞死亡時細胞碎裂如花瓣或樹葉散落般的形態學特征。目前對細胞凋亡的認識正不斷得到深化,檢測凋亡細胞的方法也逐漸增多,但形態改變仍是確定細胞凋亡的最可靠的方法。一、光學顯微鏡觀察凋亡細胞的主要特征為核染色質致密深染,形成致密質塊,有時可碎裂。在HE

    凋亡細胞核DNA片段檢測方法進展

    細胞凋亡(apoptosis)又稱細胞凋謝或稱程序性細胞死亡(Programmed cell death,PCD),是有別于細胞壞死而受基因控制的一種主動性細胞自殺過程。對細胞凋亡的研究已成為當今生物學領域的熱點之一。開展對細胞凋亡的研究,首先要解決的是方法學問題。根據凋亡細胞的生化特征檢測組織或培

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