活體動物體內光學成像（一）
活體動物體內光學成像主要采用生物發光與熒光兩種技術。生物發光是用熒光素酶基因標記細胞或DNA，而熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP, Cy5及Cy7等）進行標記。該技術最初是由美國斯坦福大學的科學家采用了世界上最優秀的高性能CCD研發與生產制造商Roper scientific公司最新研發的背部薄化、背照射冷CCD，配合密閉性非常好的暗箱，使得直接監控活體生物體內的細胞活動和基因行為成為現實。科學家借此可以觀測活體動物體內腫瘤的生長及轉移、感染性疾病發展過程、特定基因的表達等生物學過程。所以說該技術是伴隨著背部薄化、背照射冷CCD的產生而產生，并隨著該CCD技術的發展而發展。由于具有更高量子效率CCD的問世，使活體動物體內光學成像技術具有越來越高的靈敏度，對腫瘤微小轉移灶的檢測靈敏度極高；另外，該技術不涉及放射性物質和方法, 非常安全。 因其操作極其簡單、所得結果直觀、靈敏度高等特點, 在剛剛發展起來的幾......閱讀全文
活體動物體內光學成像（八）
關于技術應用42. 可以用熒光素酶基因標記干細胞嗎？如何標記？ 可以，標記干細胞有幾種方法。一種是標記組成性表達的基因，做成轉基因小鼠，干細胞就被標記了，從此小鼠的骨髓取出造血干細胞，移植到另外一只小鼠的骨髓內，可以用該技術示蹤造血干細胞在體內的增殖和分化及遷徙到全身的過程。另外一種方法是用慢病
活體動物體內光學成像（三）
（2） 免疫學與干細胞研究將熒光素酶標記的造血干細胞移植入脾及骨髓，可用于實時觀測活體動物體內干細胞造血過程的早期事件及動力學變化。有研究表明，應用帶有生物發光標記基因的小鼠淋巴細胞，檢測放射及化學藥物治療的效果，尋找在腫瘤骨髓轉移及抗腫瘤免疫治療中復雜的細胞機制。應用可見光活體成像原理標記細胞，建
活體動物體內光學成像（二）
3. 實驗過程 通過分子生物學克隆技術, 應用單克隆細胞技術的篩選，將熒光素酶的基因穩定整合到預期觀察的細胞的染色體內，培養出能穩定表達熒光素酶蛋白的細胞株。典型的成像過程是：小鼠經過麻醉系統被麻醉后放入成像暗箱平臺，軟件控制平臺的升降到一個合適的視野，自動開啟照明燈拍攝第一次背景圖。下一步，自動關
活體動物體內光學成像（一）
活體動物體內光學成像主要采用生物發光與熒光兩種技術。生物發光是用熒光素酶基因標記細胞或DNA，而熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP, Cy5及Cy7等）進行標記。該技術最初是由美國斯坦福大學的科學家采用了世界上最優秀的高性能CCD研發與生產制造商Roper scientific公司最
活體動物體內光學成像（十）
3. 關于CCD的“背部薄化、背照射”與“冷”的確切含義是什么？之所以叫冷CCD，是由于CCD的芯片溫度下降到零下70℃或110℃，可以降低噪音，提高檢測的靈敏度。Cryogenic 的制冷技術可以使CCD的溫度達到-70℃到 -110℃，那樣的溫度可以使背照射冷CCD的暗電流減少到可忽略不
活體動物體內光學成像（九）
關于活體成像系統常見問題解答1. 關于小動物活體成像技術的起源與發展活體動物體內光學成像主要采用生物發光與熒光兩種技術。生物發光是用熒光素酶基因標記細胞或DNA，而熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP, Cy5及Cy7等）進行標記。該技術最初是由美國斯坦福大學的科學家采用了世界上最優秀
活體動物體內光學成像（六）
17. 標記好的細胞的熒光素酶是隨機還是插入固定的位點？ 插入的位點是隨機的，但每一個構建好的細胞株我們都做過詳細的分析，與其母細胞株進行詳細的比較，證明熒光素酶的插入對細胞的各種特性(包括生長周期, 成瘤性等)沒有造成影響。18. 能標記病毒嗎？能標記病毒的某一個基因嗎？ 可以標記病毒，由于病毒在
活體動物體內光學成像（五）
3. 底物熒光素(Luciferin)是如何進入小鼠體內的？需要多少？ 熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進入小鼠體內的，約一分鐘就可以擴散到小鼠全身。 大部分發表的文章中，熒光素的濃度是150mg/kg (見下圖)。20克的小鼠需要3毫克的熒光素，價錢約兩到三美元。常用方法是腹腔注射，擴散較慢
活體動物體內光學成像（四）
3. 標記細菌（1） 細菌侵染研究可以用標記好的革蘭氏陽性和陰性細菌侵染活體動物, 觀測其在動物體內的繁殖部位、數量變化及對外界因素的反應。（2） 抗生素藥物利用標記好的細菌在動物體內對藥物的反應，醫藥公司和研究機構可用這種成像技術進行藥物篩選和臨床前動物實驗研究。4. 基因表達和蛋白質相互作用（1
活體動物體內光學成像（七）
關于生物發光與熒光及其它技術的比較 34. 熒光檢測與生物發光檢測的優勢與劣勢比較如何？ ?熒光發光需要激發光，但生物體內很多物質在受到激發光激發后，也會發出熒光，產生的非特異性熒光會影響到檢測靈敏度。特別是當發光細胞深藏于組織內部，則需要較高能量的激發光源，也就會產生很強的背景噪音。作為體內報告源
活體動物體內成像技術文獻
1. 細胞凋亡與白血病Activation of Apoptosis in Vivo by a Hydrocarbon-Stapled BH3 HelixSCIENCE 2004，305:1466-1470?通過對BCL-2蛋白家族BID的BH3結構域進行化學修飾，使其容易穿過細胞膜，在活體內研究其
活體動物體內成像技術文獻3
1.??Systemic tumor targeting and killing by Sindbis viral vectors NATURE BIOTECHNOLOGY 22 (1): 70-77, January 2004 本文依據Sindbis病毒對癌細胞表面超量表達的LAMR的識別的機
活體動物體內成像技術文獻2
12． 藥物對蛋白質相互作用的影響Kinetics of regulated protein-protein interactions revealed with firefly luciferase complementation imaging in cells and living anima
動物活體光學成像的應用進展
隨著對亞細胞結構和功能、分子生理和病理、細胞間和細胞內信號通路研究的深入，人類對疾病和對生命本質的認識不斷被追朔到蛋白質、基因水平。在上個世紀發展起來的CT、MRI、PFT、超聲等宏觀影像技術已經遠不能滿足對活體環境內細微生命過程的探詢。組織切片和免疫染色能夠部分解釋一些生物現象，但是需要研究對象與
活體光學成像技術之光學活體成像前動物脫毛的必要性
在上幾期的文章中，我們分別介紹了熒光成像與生物發光成像的比較、熒光蛋白、熒光染料的挑選方法。當大家選擇了合適的標記方法并建立成像模型（藥物注射、腫瘤注射等）后，需要對實驗動物進行活體成像觀察。在成像前，對實驗動物進行完全脫毛是非常重要的步驟，直接關系能否獲得高質量的成像數據。今天將為大家詳細介紹成像
[體內]活體染色的定義
中文名稱[體內]活體染色英文名稱vital staining;intravital staining定 義活體組織或細胞經染色后仍可保持生理活性的染色技術。使用毒性小的染料對活體細胞或組織的染色。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
什么是[體內]活體染色？
中文名稱[體內]活體染色英文名稱vital staining;intravital staining定 義活體組織或細胞經染色后仍可保持生理活性的染色技術。使用毒性小的染料對活體細胞或組織的染色。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
小動物活體成像
小動物活體成像 ? 主要采用生物發光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術。生物發光是用熒光素酶（Luciferase）基因標記細胞或DNA，而熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP, Cyt及dyes等）進行標記。利用一套非常靈敏的光學檢測儀器，
小動物活體成像
小動物活體成像主要采用生物發光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術。生物發光是用熒光素酶（Luciferase）基因標記細胞或DNA，而熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP, Cyt及dyes等）進行標記。利用一套非常靈敏的光學檢測儀器，讓研究人員能夠直
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用二
（二）活體生物發光成像技術應用領域活體生物發光成像技術是一項在某些領域有不可替代優勢的技術，比如腫瘤轉移研究、藥物開發、基因治療、干細胞示蹤等方面。1．腫瘤學活體生物發光成像技術能夠讓研究人員能夠直接快速的測量各種癌癥模型中腫瘤的生長、轉移以及對藥物的反應。其特點是極高的靈敏度使微小的腫瘤病灶（少到
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用七
（二） 實驗操作流程1.??細胞標記或動物標記等進行生物發光實驗，首先根據實驗內容的不同，用熒光素酶基因標記腫瘤細胞、干細胞、病毒、藥物載體或動物，或者用Lux操縱子標記細菌。用熒光素酶基因標記可通過質粒、慢病毒或逆轉錄病毒等方法進行。如果進行熒光實驗，就用GFP、EGFP或RFP標記腫瘤細胞、干細
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用三
4．干細胞及免疫學用熒光素酶標記干細胞有以下幾種方法：一種是標記組成性表達的基因，做成轉基因動物，干細胞就被標記了，若干細胞移植到另外動物體內，可以用活體生物發光成像技術示蹤干細胞在體內的增殖、分化及遷徙的過程；另外一種方法是用慢病毒直接標記干細胞后，移植到體內觀測其增殖、分化及遷徙過程，研究其修復
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用一
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用簡介?文章目錄：一、活體生物發光成像技術二、活體動物熒光成像技術三、生物發光成像與熒光成像的比較四、活體動物可見光成像儀器原理與操作流程活體動物體內成像技術是指應用影像學方法，對活體狀態下的生物過程進行組織、細胞和分子水平的定性和定量研究的技術。活體動
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用六
?（二）熒光成像技術優點在活體動物可見光成像技術中，相對于生物發光成像技術，熒光成像技術的優勢主要表現在：1. 熒光染料、蛋白標記能力強熒光標記物種類繁多，包括熒光蛋白、熒光分子、量子點等，可以與基因、多肽、抗體等生物分子標記，作為分子探針使用范圍廣。同時，不同的熒光蛋白或染料還可對樣本進行多重標記
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用五
3． 藥學研究熒光成像在藥物制劑學研究，尤其是藥物靶向性研究，藥物載體研究中有巨大優勢。有關專家正在設計用合適的熒光染料標記小分子藥物，觀察藥物在動物體內的特異性分布和代謝情況，尤其是中藥研究方面。?應用透射儀從樣本底部激發光源，可以提高活體熒光成像的靈敏度和檢測的深度。圖11-6是應用NIR熒光染
活體動物體內成像系統使用方法(以－IVIS－100系統為例)
體內可見光成像相對于其它的成像方法，成像過程簡單，快速。 1，配制底物熒光素溶液和注射實驗動物： 1）材料：D-熒光素（sciencelight luc001） DPBS, W/O Mg2+, Ca2+ 0.2um 針頭濾器 注射器 2）新鮮配制15mg/ml熒光素DPBS溶液，過0
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用四
二、活體動物熒光成像技術?（一）技術原理1．標記原理活體熒光成像技術主要有三種標記方法。（1）熒光蛋白標記：熒光蛋白適用于標記細胞、病毒、基因等，通常使用的是GFP、EGFP、RFP（DsRed）等；（2）熒光染料標記：熒光染料標記和體外標記方法相同，常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7，可以
皮膚+芯片，首次實現活體內細胞重組
最新一期《自然·納米技術》報道了再生醫學的重大突破，美國俄亥俄州立大學研究人員開發出一種組織納米轉染（TNT）新技術，首次實現活體內細胞重組，有望在身體內生成任何用于治療目的的細胞類型，幫助修復受損組織或恢復老化的器官、血管及神經細胞等組織。 俄亥俄州立大學再生醫學和細胞療法中心主任錢丹·塞
領略生命奧秘－活體內的空前旅行
新方式觀看我們自己 美國國國家地理頻道使用的技術還給實現革命性醫療保健提供一條全新的清晰道路。帕爾物稱此技術進步為“自動熒光腹腔鏡”，醫生可以用它查看體內的生病組織，否則，醫生用肉眼是看不到的。 青少年大腿肌肉與骨骼(圖9) “它不用可見光，而是采用熒光來顯現疾病熒光圖，”帕爾特說，
要不要動物活體實驗
我在帶學生做動物實驗.每個綱都有一種代表動物.雖然是老師,但我的心中很沉重.由于人類自身的需要,有時候不得不利用動物做活體實驗或活體解剖.從某個角度來說,這是殘忍的,但是為了人類自身,不得不做.一番悲天憫人后,不得不承認,人類的醫學、藥物學和生物學等諸多學科的發展離不開活體實驗.這個殘酷的現實似