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PCR實驗室產品選擇指南 熒光 基團是吸收一定波長的光子后發射特定波長的光波，可以作為抗體等分子的標記物，實時熒光定量PCR中的Taqman探針常用熒光基團FAM標記熒光基團和TAMRA標記。 熒光基團 吸收特定波長的光子后熒光染料(通常稱為“熒光基團”或簡稱為“熒光素”)的化學鍵即被活化，其化學鍵活化的結果是發射波長更長的光子(能量更低)同時染料分子轉變為基態。經常使用小的、化學穩定性好的熒光基團作為抗體和其他生物分子的標簽或標記物，這樣的熒光基團一般應具有合適的、高效的(強烈的)激發和發射波長范圍。可以修飾熒光基團分子使其能夠共價地連接到蛋白、核酸和其他生物分子上。熒光標記的(熒光的)探針廣泛地應用于通過熒光顯微鏡 、流式細胞技術或其他熒光讀取設備檢測蛋白。 熒光素異硫氰酸酯(fit C)的結構 這種廣泛使用的熒光素衍生物染料含有三個環狀結構，此結構賦予該......閱讀全文
實時定量PCR (qPCR)的優勢?實時檢測PCR反應過程?精確計算出每個循環的PCR產物量?擴增和檢測同時進行?消除后續PCR的干擾在實時定量PCR反應中，雜交探針與插入染料如SYBR Green相比是更好的選擇。熒光標記探針可以提高實時定量PCR結果的效率、靈敏度和特異性。而且定量PC
SYBR Green I：一種DNA結合染料，能非特異性地與雙鏈DNA結合，結合后發出熒光，價格便宜，但因無特異性，易受到非特異性擴增和引物二聚體地的影響，是定量結果不可靠。可用融解曲線分析區分特異性和非特異性擴增，引物的設計和反應條件的優化對消除非特異性熒光有很大幫助。 2.Taqman探針：
1.SYBR Green I：一種DNA結合染料，能非特異性地與雙鏈DNA結合，結合后發出熒光，價格便宜，但因無特異性，易受到非特異性擴增和引物二聚體地的影響，是定量結果不可靠。可用融解曲線分析區分特異性和非特異性擴增，引物的設計和反應條件的優化對消除非特異性熒光有很大幫助。2.Taqm
1．熒光染料熒光基團通常各自擁有單一的光吸收峰。在光的刺激下，熒光基團吸收光的能量后通常以三種方式釋放出能量：1) 光能 許多熒光基團吸收光能后仍舊以光能形式釋放能量，并且發射光的峰值大于吸收峰。比如熒光染料Fam的光吸收峰為490nm，而發射峰為530nm。 2) 熱能 某些熒光基團吸收
熒光定量PCR檢測技術從誕生到現在已經有 8 年了，但是其應用在近四年才迅猛增長。在 Medline 數據庫中，用“ Taqman” 或 ”real time PCR” 作為關鍵詞檢索，在1996 年僅有 19 篇，在 1997 年僅有 28 篇，在 98 、 99 、2000 年分別達到了
多聚集鏈反應（polymerase chain reaction,PCR）技術發明至今已近20年了，在這期間技術得到了不斷的發展，近年來出現的實時熒光定量PCR（real-time quantitative PCR）技術實現了PCR從定性到定量的飛躍，它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、
一．實時定量PCR基本原理1.PCR反應動力學右圖為PCR反應曲線（橫坐標為循環數，縱坐標表征產物量），不同的曲線代表初始模板量不同的 PCR反應。PCR反應的動力學公式為：Cn=C0(1+E)n其中C0和Cn分別為初始模板和n循環的拷貝數，n為循環數，E為擴增效率（0≤E≤1），理想狀態下（即每個
實驗室很多同學都要做Real time PCR實驗，實驗室的師兄師姐都會有很多寶貴意見，不過也有實驗室前沒有做過的，查找了下資料和大家分享下關于實時熒光 Taqman 探針設計、實時熒光PCR探針的選擇、引物的設計及評價。熒光探針法是用序列特異的熒光標記探針來檢測產物，探針法的出現使得定量
實時熒光PCR檢測技術眾所周知，PCR（聚合酶鏈反應）技術自從1985年問世以來，經過十幾年的發展，已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段，是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法，核酸診斷是分子水平上的診斷技術，可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷，比如，核酸診斷能
眾所周知，PCR（聚合酶鏈反應）技術自從1985年問世以來，經過十幾年的發展，已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段，是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法，核酸診斷是分子水平上的診斷技術，可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷，比如，核酸診斷能直接揭示病原體的存在，
Real Time PCR實時熒光定量PCR 其定量的基本原理是在 PCR 反應體系中加入非特異性的熒光染料（如： SYBR GREEN I ）或特異性的熒光探針（如： Taqman 探針），實時檢測熒光量的變化，獲得不同樣品達到一定的熒光信號（閾值）時所
一、基于分子雜交的分子診斷技術 上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年，由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增，人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現，為基于分子雜交的體外診斷方法進行了
(張蓓，沈立松 上海第二醫科大學附屬新華醫院上海兒童醫學中心實驗診斷中心)摘要:多聚酶鏈反應飛速的發展使其成為了分子生物學實驗室重要的工具，實時熒光定量PCR(real-timequantitative PCR)技術以其敏感性高、重復性好、速度快和污染少使PCR技術又
定量PCR：以參照物為標準，對PCR終產物進行分析或對PCR過程進行監測，從而達到評估樣本中靶基因的拷貝數，稱為定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 常見熒光定量PCR方法比較 SYBR Green I 檢測模式 SYBR Green I 是一種能與雙鏈 D
免疫熒光三標？——藍色熒光的AMCA與Dylight 405標記二抗做免疫熒光實驗中，經常要進行免疫熒光的雙標記實驗，也就是在同一個樣本上同時進行兩種蛋白的免疫熒光檢測。具體的實驗時，可以選擇不同來源的一抗，然后再選擇分別針對一抗的二抗，同時二抗上標記有不同的熒光團。一般的雙標記實驗里，都會選擇一個
基于分子構象的分子診斷技術 (一)變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)與單鏈構象多態性(single strand conformation polymorphism,SSCP) 1970~1980年間,Fischer等
艾滋病(AIDS)又稱獲得性免疫缺陷綜合征，是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一種免疫缺陷性疾病。HIV感染的診斷是艾滋病預防控制 工作的重要組成部分，建立敏感實用的檢測方法對于監測、診斷或血液篩查，控制艾滋病的流行顯得尤為重要。以下本文就HIV的檢測技術現狀及進展做一綜述。1
四、定量PCR(quantitative PCR，qPCR) 相比于其他分子診斷檢測技術，qPCR具有2項優勢，即核酸擴增和檢測在同一個封閉體系中通過熒光信號進行，杜絕了PCR后開蓋處理所帶來擴增產物的污染；同時通過動態監測熒光信號，可對低拷貝模板進行定量。正是由于上述技術優勢，qPCR已經成
活體動物體內光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA，而熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP, Cyt及dyes等）進
4、豆蔻酰化和棕櫚酰化用脂肪酸酰化N末端可以讓多肽或蛋白質與細胞膜結合。N末端上豆蔻酰化的序列可以使Src家族的蛋白激酶和逆轉錄酶Gaq蛋白靶向結合細胞膜。利用標準的偶聯反應即可將豆蔻酸連接到樹脂-多肽的N末端，生成的脂肽可在標準條件下解離并通過RP-HPLC純化。5、糖基化糖肽類如萬古霉素和替考拉
聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法，而且也是一個能對核酸分子進行精確定量的有力工具[1]。隨著分子生物學技術研究的不斷進展，定量PCR技術取得了突飛猛進的發展，不僅建立了一系
多肽是一種由兩個或多個氨基酸通過肽鍵（酰胺鍵）連接而形成的化合物。多肽在調節機體各系統、器官、組織和細胞的功能活動以及在生命活動中發揮重要作用，并且常被應用于功能分析、抗體研究、藥物研發等領域。而通過對多肽進行修飾進而改變多肽的理化性質也是多肽研究中一種常用的手段。多肽修飾種類繁多，從修飾位點不同則
隨著人類基因組計劃（human genome project ）在2003年順利完成，基因組測序技術取得了長足的進步，這直接導致了每兆基因組成本的大幅下降以及檢測的基因組數量越來越多。人們對基因組的復雜性深感震驚，這也引導著測序技術的進一步發展。最近的一些突破性技術使得測序技術在更短的時間內可以
隨著人類基因組計劃（human genome project ）在2003年順利完成，基因組測序技術取得了長足的進步，這直接導致了每兆基因組成本的大幅下降以及檢測的基因組數量越來越多。人們對基因組的復雜性深感震驚，這也引導著測序技術的進一步發展。最近的一些突破性技術使得測序技術在更短的時間內可以
陳文學 鄒學森 陳岳青 黃秀珍 鐘禮瀑 （江西省腫瘤醫院 腫瘤研究所， 江西 南昌 330029） [摘要] 熒光定量PCR技術具有簡便、靈敏、準確等優點，目前已經在乙肝和性病的診斷和治療中得到了廣泛的應用，但在腫瘤方面的應用還處在研究和開發階段。本文綜述近年國內外相關熒光定量P
除了為克隆基因、預測編碼蛋白而需要研究基因的構成外，當前在基因組學上的努力也包括對基因組構成的研究，以分析具有結構和調控因子插入的基因。近源物種分析成為比較基因組學的主要內容，被認為是研究進化、基因功能和人類疾病的重要方法。 利用該方法分析微生物，特別是細菌的基因組，早在 1996 年就已開始
當下我國正處于新型冠狀病毒2019-nCoV疫情發展階段，該病毒感染主要會造成的新型的急性肺炎癥狀（WHO已將其名為NCOVID19），疫情已在全國范圍內肆虐超過20天，對我國民生健康和經濟造成極大影響。目前網上涌現多篇關于新型冠狀病毒2019-nCoV實驗室檢測技術的文章，文章質量水平千差萬別
當下我國正處于新型冠狀病毒2019-nCoV疫情發展階段，該病毒感染主要會造成的新型的急性肺炎癥狀（WHO已將其名為NCOVID19），疫情已在全國范圍內肆虐超過20天，對我國民生健康和經濟造成極大影響。目前網上涌現多篇關于新型冠狀病毒2019-nCoV實驗室檢測技術的文章，文章質量水平千差萬別
一、血液學檢查 病毒感染相關的血液學檢查主要包括血常規、血生化以及其他針對性的檢測項目，相關指標為臨床常用的病毒感染診斷指標，為疾病的輔助診斷提供依據。 1、血常規 血常規中的許多項具體指標都是一些常用的敏感指標，對機體內許多病理改變都有敏感反映，其中又以白細胞計數、紅細胞計數、血紅蛋白和
當我們做免疫熒光的實驗時，市面上會有很多的染料供我們選擇，讓人眼花繚亂，那到底應該如何選擇呢？讓我們看看以下介紹一、熒光標記是什么？熒光標記就是用熒光基團特異性來標記細胞或者組織樣品中所感興趣的區域。一般常用的熒光標記方法有表達熒光蛋白、細胞器及DNA特異性染料、抗體偶聯免疫熒光染料和雙光子熒光染料