PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀器設備超凈工作臺、PCR儀、電泳儀、凝膠成像分析系統、臺式離心機、旋渦混懸器等。2、實驗試劑選用美國Stratagene公司生產的支原體檢測試劑盒（內有引物、陽性對照、內對照、StrataClean resin、緩沖液），dNTP，TapDNA聚合酶，緩沖液，瓊脂糖，礦物油。3、實驗操作PCR反應的前期操作應在無菌環境中進行。（1）樣品的收集：待測細胞用無雙抗培養基培養7d，用無菌容器取上清液500ul，4℃保存待測。（2）模板的制作：在無菌的條件下，取細胞培養上清100ul于一無菌的0.5ml塑料離心管內，蓋好蓋子，95℃水浴加熱5mi......閱讀全文
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀器設
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀
PCR法檢測支原體
實驗方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA鏈擴增延伸。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒dNTPTapDNA聚合酶瓊脂糖礦物油支原體檢測試劑盒儀器、耗材超凈工作臺PCR儀電泳儀凝膠成像分析系統臺式離心機旋渦混懸器實驗步驟1.
微生物學技術:PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀
培養法檢測支原體
培養法最為可靠且成本低廉，但培養周期較長。常用于細胞以及I臨床治療細胞的支原體檢查。1、所需儀器設備及培養基（1）儀器設備：培養箱，顯微鏡。（2）培養基①支原體肉湯培養基。②精氨酸肉湯培養基。③支原體瓊脂培養基。2、檢查方法（1）樣品的貯存：樣品如在24h以內進行支原體檢測，則可貯存在2—8℃；如果
細胞支原體污染的PCR檢測
支原體菌株來源：???????M.Arginini?ATCC23838?精氨酸支原體???????M.FermentaneATCC19989發酵支原體???????M.SalivariumATCC23064唾液支原體???????M.HominisATCC23114人型支原體???????M.Ora
細胞支原體污染的PCR檢測
支原體菌株來源：M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原體M.FermentaneATCC19989 發酵支原體M.SalivariumATCC23064唾液支原體M.HominisATCC23114人型支原體M.OraleATCC23714口腔支原體M.HyorhinisATCC290
支原體的檢測實驗_培養檢測法
實驗方法原理這是用支原體培養基方法進行檢測，培養法稍顯繁鎖，但比較精確。實驗材料肉湯血清試劑、試劑盒細胞懸液儀器、耗材培養基實驗步驟1. ?肉湯制備用支原體肉湯（Sigma 產）和北京生物制品所制兩種均可；用前加10%馬血清；2. ?培養每45 ml肉湯培養基加2.5×106?/ml細胞懸液5 ml
支原體的檢測實驗_電鏡檢測法
實驗方法原理在用一般方法難以確定時，可做電鏡檢測。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?細胞培養 48～72 小時。2. ?接近匯合前，用0.05%～0.25%胰蛋白酶消化細胞5～10 分鐘。3. ?用吸管輕輕吹打，制備成細胞懸液。
PCR－測定支原體
實驗材料 Taq DNA多聚酶引物陽性對照DNA脫氧核苷三磷酸混合物三磷酸瓊脂糖1.3%TAE膠試劑、試劑盒 磷酸緩沖鹽溶液液Tris醋酸EDTA6×加樣緩沖液引物儲備液儀器、耗材 DNA抽提和純化系統基質的DNA抽提試劑盒熱循環儀實驗步驟 一、DNA 標本的收集和制備1. 需要檢測支原體污染的細胞
PCR－測定支原體
實驗材料Taq DNA多聚酶引物陽性對照DNA脫氧核苷三磷酸混合物三磷酸瓊脂糖1.3%TAE膠試劑、試劑盒磷酸緩沖鹽溶液液Tris醋酸EDTA6×加樣緩沖液引物儲備液儀器、耗材DNA抽提和純化系統基質的DNA抽提試劑盒熱循環儀實驗步驟一、DNA 標本的收集和制備1. 需要檢測支原體污染的細胞系，在收
ELISA法檢測肺炎支原體
ELISA法檢測肺炎支原體 肺炎支原體可引起支原體肺炎，曾被稱為“非典型肺炎”。支原體肺炎通常起病緩慢，病情嚴重，體征輕微，肺炎常為間質性。此外，肺炎支原體與人腦組織有共同抗原，故亦可引起中樞神經系統癥狀。臨床上一般通過檢查肺炎支原體抗體IgG、IgM診斷支原體肺炎。 (一)肺炎支原體抗體I
多重PCR法檢測STEC
產志賀毒素大腸桿菌（STEC）具有很強的致病性，全球范圍內由其引發的食物中毒和其他公共衛生事件呈逐年升高之勢，嚴重威脅人類的健康。開發快速可靠的檢測手段對其引發的食源性疾病的監測、控制和預防意義重大。本文結合對STEC分子生物學特征的研究，著重介紹了多重PCR檢測技術在檢測食品中STEC方面的
PCR產物的檢測PCRELISA法
在一個引物的5’端標記上生物素以便使其能與包被板上的親合素結合而固定PCR產物，而在另一引物的5’端標記FITC，用HRP標記的抗FITC抗體與之結合顯色，即可進行常規ELISA檢測。如設立標準對照，此技術還可用于定量分析。 【試劑與配置】 包被液：4.3mmol/L Na2HPO4,
支原體的檢測實驗_相差顯微鏡檢測法
實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶載物片蓋片顯微鏡實驗步驟1. ?標本制備用尖鑷子從培養瓶中直接取出預先置入的支持物（長形蓋片；24 小時前置入），令細胞面向上，置放在載物片上，再覆以24 mmX 36 mm的較大蓋片；如不用支持物培養法，也可取少許培養液滴在載物片上，再覆以蓋片法觀察亦可。2. ?觀察相
生化檢測項目支原體檢查法介紹
支原體檢查法介紹： 支原體檢查法是檢查人體否受到支原體的感染，為臨床診斷與治療支原體感染患者提供依據的一種檢查方法。支原體只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮細胞表面的受體上，而不進入組織和血液。支原體檢查法正常值： 酶聯免疫法:為陰性。支原體檢查法臨床意義： 臨床意義 陽性，見于支原體感染，可
套式PCR檢測非淋球菌性尿道炎中生殖支原體和解脲支原體
[摘要] 目的:采用nPCR技術,對在本院確診的非淋球菌性尿道炎(NGU)患者的泌尿生殖道分泌物標本進行檢測,以探討套式PCR(nPCR)技術在生殖支原體(Mg)和解脲支原體(Uu)檢測中的作用和地位。方法:深圳市福田區NGU患者98例,宮頸或尿道口內拭子分泌物標本用nPCR進行DNA擴增,并與對照
痘苗DNA檢測實驗——PCR－法
除了 PCR 和 Southern 雜交可以檢測病毒 DNA 外，也可以利用 DNA 點跡雜交方法檢測在分離的噬斑中的重組病毒。本實驗主要介紹用這3種方法來檢測痘苗DNA。實驗材料貼壁生長良好的單層 BS-C-1 或 HuTK-143B 細胞重組病毒噬斑懸液試劑、試劑盒PBS胰酶／EDTA干冰／乙醇
支原體的檢測
實驗材料 細胞儀器、耗材 培養瓶載物片蓋片顯微鏡實驗步驟 1. ?標本制備用尖鑷子從培養瓶中直接取出預先置入的支持物（長形蓋片；24 小時前置入），令細胞面向上，置放在載物片上，再覆以24 mmX 36 mm的較大蓋片；如不用支持物培養法，也可取少許培養液滴在載物片上，再覆以蓋片法觀察亦可。2. ?
熒光檢測支原體
實驗方法原理在無抗生素情況下，至少將細胞培養一周，將培養上清轉移至處于對數生長早期的指示細胞中，孵育 3~5d ，將細胞固定和染色，尋找細胞核之外的熒光。實驗材料來自于7天單層培養的無抗生素的細胞培養上清液或經離心后的上清液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
熒光檢測支原體
實驗方法原理在無抗生素情況下，至少將細胞培養一周，將培養上清轉移至處于對數生長早期的指示細胞中，孵育 3~5d ，將細胞固定和染色，尋找細胞核之外的熒光。實驗材料來自于7天單層培養的無抗生素的細胞培養上清液或經離心后的上清液指示細胞試劑、試劑盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA
熒光PCR法檢測RNasin性能效果
實驗目的：對RNasin性能效果進行檢測及評估。 實驗材料及設備： 模板RNA：大鼠肌肉組織RNA 引物：Rat β-acting：Forward CCCATCTATGAGGGTTACGC Reverse ?TTTAATGTCACGCACGATTTC RNase：50mg/ml（simgen）
熒光PCR法檢測RNasin性能效果
實驗目的：對RNasin性能效果進行檢測及評估。實驗材料及設備：模板RNA：大鼠肌肉組織RNA引物：Rat β-acting：Forward CCCATCTATGAGGGTTACGCReverse TTTAATGTCACGCACGATTTC?RNase：50mg/ml（simgen）RNasin：4
免疫PCR法檢測有哪些特點
免疫PCR法檢測有哪些特點?:免疫PCR綜合了固相免疫反應和PCR兩者的特點。因而在保證免疫測定特異性的同時，又具有極高的檢測靈敏度。免疫PCR的基本原理與執業護士網常規標記免疫技術相似，只不過在免疫PCR中所用的抗原或抗體標記物為DNA，在固相免疫結合反應完成后，再采用PCR技術對標記DNA進行擴
支原體培養實驗——支原體固體培養基接種法
支原體（mycoplasma）：又稱霉形體，為目前發現的最小的最簡單的原核生物。支原體細胞中唯一可見的細胞器是核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）。實驗材料肺炎支原體試劑、試劑盒糖酵解培養基基礎培養基牛血清酵母浸液酚紅醋酸鉈青霉素儀器、耗材培養皿燒杯玻璃棒天平移液管離心機棉花拭子實
支原體的檢測實驗
相差顯微鏡檢測法 低漲處理地衣紅染色觀察法 熒光染色法 電鏡檢測法 培養檢測法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
支原體污染及檢測
（1）支原體污染在細胞培養中最常見、不易被查覺，但支原體污染可顯著影響細胞功能干擾實驗結果。支原體是介于細菌和病毒之間的目前所知能獨立生活的最小微生物，它無細胞壁，形態呈高度多形性，最小直徑0.2um，可通過濾器。?目前通過對國內100余株/系細胞的檢測，形勢不容樂觀。污染率達30%?~?60%?。
支原體常用檢測方法
支原體這種微小的微生物(直徑0.2-0.8 μm)，是細胞培養中令人頭疼的大問題。支原體污染可能來自培養基、血清或實驗操作者，會影響細胞生長率、細胞形態、基因表達、細胞代謝和細胞活力。支原體感染不易察覺，因此對培養細胞定期進行支原體檢測就非常重要。 污染實驗室培養細胞的支原體
側向層析檢測替代PCR的新型快速檢測法
用傳統的微生物分析法檢測沙門氏菌、克羅諾桿菌等，往往需耗時4天。本文介紹的借助于雜化傳感技術的新型檢測方式，可在幾分鐘內完成對rRNA（核糖體核糖核酸）的檢測，也可應用于易腐及敏感性食品的快速檢測。 側向層析檢測已在妊娠測試等諸多診斷中得到應用。該方法與奧地利SY-Lab 公司開
支原體培養實驗——支原體半固體培養基接種法
實驗方法原理一、標本采集?支原體常侵及人和動物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取樣后放入2~3 ml支原體液體培養基的小管中，或取其分泌液，若標本是組織塊，可在滅菌乳缽或玻璃勻漿后接種，取樣后應盡快接種培養。?二、分離培養?混種法：在制備半固體培養基時，培養基加熱溶化，溫度降至50℃時，添加動物血清