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    順磁性鏈霉抗生物素蛋白珠子的純化實驗

    試劑、試劑盒 ATEN 緩沖液 聚乙烯乙二醇 T5E5 緩沖液 Dpn I 蛋白酶 K RNA 酶 A 5'端為生物素-TEG 且 3'端為核糖胞嘧啶的引物 蛋白酶 K 處理過的 PCR 產物 儀器、耗材 磁鐵 鏈霉抗生物素蛋白珠子 實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑1X ATEN 緩沖液(見第 1 步)10X ATEN 緩沖液(見方案 1 的配方......閱讀全文

    交聯染色質免疫共沉淀(X-ChIP)實驗設計

    ChIP是一種強大的確定蛋白或者組蛋白修飾在基因組上定位的實驗方法。染色質被分離出來后采用抗體與抗原的結合來判定目的蛋白是否結合在特定的DNA序列上或者判定目的蛋白結合位點在全基因組范圍的分布(微陣列或DNA序列)。這種方法具有空間性與時效性。該實驗設計為如何在細胞中進行ChIP實驗提供了詳細的步驟

    順磁性鏈霉抗生物素蛋白珠子的純化實驗

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    順磁性鏈霉抗生物素蛋白珠子的純化實驗

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    核糖克隆實驗

    試劑、試劑盒 ATEN 緩沖液DNA 緩沖液(TEN)KLA 緩沖液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K儲存緩沖液 RNA 酶 A設計好的載體已經進行 5'端生物素-TEG 修飾并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修飾過的引物卡那霉素(Sigma)四

    核糖克隆實驗

    這個方案只是用 RNA 酶處理 PCR 產物的一種方法。有很多可選擇和有效的途徑來純化 PCR 產物以除去引物,接著用酶處理 PCR 產物,然后再除去酶。值得注意的是用 PCR儀設置溫浴程序是很方便的。可以在加熱步驟完成后選擇加上“冷卻”步驟,即在冷模塊中放置 5 min 甚至過夜。本實驗來源于 P

    核糖克隆實驗

    試劑、試劑盒ATEN 緩沖液DNA 緩沖液(TEN)KLA 緩沖液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K儲存緩沖液RNA 酶 A設計好的載體已經進行 5'端生物素-TEG 修飾并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修飾過的引物卡那霉素(Sigma)四環素Ticarci

    高通量測序技術的原理及各平臺優勢和實踐應用的分析

      隨著人類基因組計劃(human genome project )在2003年順利完成,基因組測序技術取得了長足的進步,這直接導致了每兆基因組成本的大幅下降以及檢測的基因組數量越來越多。人們對基因組的復雜性深感震驚,這也引導著測序技術的進一步發展。最近的一些突破性技術使得測序技術在更短的時間內可以

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      隨著人類基因組計劃(human genome project )在2003年順利完成,基因組測序技術取得了長足的進步,這直接導致了每兆基因組成本的大幅下降以及檢測的基因組數量越來越多。人們對基因組的復雜性深感震驚,這也引導著測序技術的進一步發展。最近的一些突破性技術使得測序技術在更短的時間內可以

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗

                實驗方法原理 SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、

    核糖克隆實驗

    —、材料1. 緩沖液、溶液和試劑.10XATEN 緩沖液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化鈉0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜堿(SigmaB-2629)藍色葡聚糖(bluedextran)(SigmaD

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗

    實驗方法原理 SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、A-U 堿基對以外,還有 G-U 等變偶堿基對的存在,可以形成發夾、假結、凸環、G-四聚體等多種空間結 構,它

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗可用于:(1)體外診斷;(2)體內治療等。實驗方法原理SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、A-U 堿基對以外,還有 G-U 等變偶堿基對的

    用PCR進行基因分型

    與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)時覺得見效很快,不再需要等幾天才能看到結果,不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步,RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化,甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白

    用PCR進行基因分型-1

    與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)時覺得見效很快,不再需要等幾天才能看到結果,不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步,RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化,甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白

    Western Blot詳解

      Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。   本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術:   一、原理   二、分類

    Western Blot實驗技術詳解和常見問題解答

    Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被

    Western Blot詳解-常見的問題指南(四)

    9. 條件的摸索DDD. 用的是Santa Cruz的抗體,也實驗過一抗和二抗肯定能結合,二抗加DAB肯定能顯色。電泳的膠用考馬斯亮藍染色沒問題,但是不知道與Marker對應的條帶是否是我要的(我目的蛋白的分子量分別是55KD、29KD)。半干法2小時轉膜后,麗春紅染色發現大分子量蛋白轉過去的較少。

    FDA關于粗品肝素鈉來源檢測的方法

      開發一種多重實時熒光定量PCR檢測法檢測 原料中反芻動物DNA監測肝素鈉粗品質量   作者   Sharla M. Peters1, Yolanda L. Jones1, Frank Perrella2, Tai Ha3, and Haile F. Yancy1   1U. S. Fo

    數字PCR的前世今生:特點、優勢和局限性

    數字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR,數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的絕對定量。數字PCR是近年來迅速發展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環閾值(Ct),不受擴增效率的影響,具有很好的準確度

    生物素-鏈霉親和素結合系統及衍生品的實際應用(二)

           注意:        Ext. Coeff. = 在其最大吸收波長處的摩爾消光系數(單位= cm -1 M -1)。       FQY = 在水性緩沖液(

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    實驗材料RTA 基因試劑、試劑盒結合(或漂洗)緩沖液生物素瓊脂糖洗脫緩沖液儀器、耗材RNeasy?mini 試劑盒實驗步驟這里介紹的方法概括了表達載體的構建以及篩選功能蛋白的 RIDS 循環系統的構建。3.1 RIDS 表達載體的構建首先,需要準備含編碼 T7 啟動子、蛋白質文庫、連接子、RTA 和

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    實驗材料 RTA 基因試劑、試劑盒 結合(或漂洗)緩沖液生物素瓊脂糖洗脫緩沖液儀器、耗材 RNeasy?mini 試劑盒實驗步驟 這里介紹的方法概括了表達載體的構建以及篩選功能蛋白的 RIDS 循環系統的構建。3.1 RIDS 表達載體的構建首先,需要準備含編碼 T7 啟動子、蛋白質文庫、連接子

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