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    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗可用于:(1)體外診斷;(2)體內治療等。實驗方法原理SELEX 技術是一種利用隨機寡核苷酸(DNA 或 RNA)文庫篩選靶分子的特異性配基的組合化學技術。最常用的是隨機 RNA 文庫,因為 RNA 分子中除 G-C、A-U 堿基對以外,還有 G-U 等變偶堿基對的存在,可以形成發夾、假結、凸環、G-四聚體等多種空間結 構,它們與靶分子通過氫鍵、范德華力等相互作用,或嵌合,或包被,形成穩定的復合物。 即使很小的一段 RNA 分子也能形成相當穩定的剛性結構。一個包含 25 個隨機序列的隨機 RNA 文庫理論上可以產牛 425~1015 個具有不同空間結構的 RNA 分子,擁有巨大的篩選潛力。實驗材料X 線膠片可拆卸酶聯板蛋白 A sepharose 凝膠micropure-EZ 脫酶管和 microcon-脫鹽管pGKM-T 載體RiboMAXTM 大體積轉錄試劑盒AMV 反轉錄酶T4 ......閱讀全文

    隨機RNA文庫的SELEX篩選實驗

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    天然RNA文庫篩選與蛋白特異性結合的RNA序列實驗

    細胞中,蛋白質與 RNA 結合參與多種生理調控和發育過程。在 mRNA 的加帽,多聚腺苷酸化,剪切,核外運,翻譯起始及降解等過程中都存在著蛋白質與 RNA 的直接相互作用。在發育的各個階段,RNA 結合蛋白可以通過與 mRNA 的相互作用調控基因的表達。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛

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    cDNA文庫組標準流程一:Total RNA的提取

    1.試劑配制準備工作:1、研缽、5ml/10ml/ 25ml移液管、100ml/250ml量筒、250ml/100ml容量瓶、藥匙、 試劑瓶等玻璃制品均用錫紙包裹口部,置于烤箱內,180℃,烤6小時。2、50ml/1.5ml離心管、槍頭等塑料制品用0.1‰DEPC水浸泡過夜后,121℃ 20mins

    液相法篩選cDNA表達文庫中RNA結合蛋白實驗

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    實驗方法原理 將 cDNA 文庫表達的蛋白固定于硝酸纖維素膜或尼龍膜上,然后用標記的 RNA 對其進行篩選的方法是篩選 RNA 結合蛋白研究中最常用的技術。實驗材料 TY試劑、試劑盒 儲存液溶菌酶干粉細菌裂解緩沖液甘油水溶液實驗步驟 一、材料與設備1. 2X TY:16 g 蛋白胨,10 g 酵母提

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