【臨床意義】 紅細胞系統細胞核發深綠色熒光。原始紅細胞有時可看到粉紅色核仁。粒細胞系統細胞核發黃綠色熒光。原始粒細胞有時也可看到粉紅色的核仁。但嗜酸性粒細胞的細胞核發深綠色熒光,比紅細胞系統還要深一些。 淋巴細胞核的熒光稍帶灰綠色。 各系統細胞的胞漿內因含有核糖核酸(RNA),所以均發紅色熒光,依據細胞漿內所發熒光的明暗程度可分為六級: 鮮明光(++++)、明光(+++)、稍明光(++)、暗光(+)、隱約可見光(±)、無光(-)。 根據國內報導: 急性粒細胞白血病的原始粒細胞以(+)為主,(++)少見。 急性淋巴細胞白血病中,原始淋巴細胞以(++)、(+++)為主,(+)少見。 急性早幼粒細胞白血病中,原始及早幼粒細胞以(+)為主,(++)少見。 紅白血病中原始粒細胞以(+)為主,有核紅細胞以(+++)為主,(++++)也可見。 急性單核細胞白血病中原始單核細胞以(+)為主,(++)少見。 溶血性貧血中有核......閱讀全文
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電
一、材料和方法 1.臨床標本:50份宮頸分泌物,取自西京醫院門診婦產科就診的非特異性陰道炎(NSV)患者,常規消毒用無菌棉簽自宮頸口取分泌物于無菌生理鹽水管中。 2.革蘭染色法:取無菌生理鹽水中的宮頸或陰道分泌物直接涂片,常規革蘭染色,找到線索細胞者為陽性。 3.吖啶橙染色熒光法[1]:取無
熒光法較一般光學方法具有靈敏度高、特異性強、方法簡便等優點,因此近年來熒光組織化學特別是免疫熒光技術有了很大的發展。利用熒光技術可研究細胞內化學成分的分布與定位,研究細胞與組織中物質的吸收與轉運,進行病理鑒別以及細胞免疫等方面的研究。 當用一種波長的光(如紫外光)照射某種物質時,這種物質會
葉綠體 足植物細胞所特有的能量轉換細胞器,光合作川就是在葉綠體中進行的。由于具有這一重要功能,所以它一直是細胞生物學、遺傳學和分子生物學的重要研究對象。葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器,利用低速離心即可分離集中進行各種研究。 實驗目的 一、通過植物細胞葉綠體 的
葉綠體足植物細胞所特有的能量轉換細胞器,光合作川就是在葉綠體中進行的。由于具有這一重要功能,所以它一直是細胞生物學、遺傳學和分子生物學的重要研究對象。葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器,利用低速離心即可分離集中進行各種研究。實驗目的一、通過植物細胞葉綠體的分離。了解細胞器分離的一般原理和方法。二.觀
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電信號,經數字轉換器進行數
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電信號,經數字轉換器進行數
實驗方法原理組織勻漿后懸浮在等滲介質中進行差速離心,是分離細胞器的常用方法。一個顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀、密度、離心力及介質黏度等。同一離心場中,同一時間內,密度和大小不同的顆粒沉降速率不同。依次增加離心力和離心時間,就能使非均一的懸浮液中的顆粒按其大小、密度先后分批沉降在離心
實驗方法原理 組織勻漿后懸浮在等滲介質中進行差速離心,是分離細胞器的常用方法。一個顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀、密度、離心力及介質黏度等。同一離心場中,同一時間內,密度和大小不同的顆粒沉降速率不同。依次增加離心力和離心時間,就能使非均一的懸浮液中的顆粒按其大小、密度先后分批沉降在離
積液是臨床常見癥狀之一。正確鑒別積液的性質對疾病的診治預后有重要意義。隨著實驗室診斷技術的提高,近年來胸腔積液的檢測在細胞形態學、細胞染色體及免疫細胞化學等方面都有著較大的進展,為臨床提供了更可靠的依據。本文對此作一簡要綜述。 一、沉渣涂片瑞吉氏染色 瑞吉氏染色能清楚地顯示細胞漿成份和細胞核染色
1.蛋白酶K:能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白。再尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸鈉. 溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中
1.蛋白酶K:能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白。再尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸鈉. 溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中
AO / EB原理與流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透過胞膜完整的細胞,嵌入細胞核DNA,使之發出明亮的綠色熒光。溴乙錠(E僅能透過胞膜受損的細胞,嵌入核DNA,發橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現為染色增強,熒光更為明亮,均勻一致的圓狀或固縮狀、團塊狀結構。非凋亡細胞核呈現熒光深淺
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一種常用熒光染料,吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力,但有一定的特異性,即結合后發不同顏色的熒光,DNA呈亮綠色,而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷,既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一種常用熒光染料,吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力,但有一定的特異性,即結合后發不同顏色的熒光,DNA呈亮綠色,而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷,既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
使用活體熒光染料的顯微鏡定量凋亡指數和細胞活力(臺盼藍染色) 吖啶橙染色 吖啶橙或溴化乙錠染色 實驗方
作者:楊連君,司曉輝,王文亮,王文勇,趙一嶺,方正清[摘 要] 目的:探討簡便易行的在光鏡下通過形態學觀察檢測細胞凋亡的方法,并對其進行比較。方法:首先用6%的乙醇作用6 h誘導人肝細胞癌細胞系HCC9204細胞凋亡,然后進行未固定細胞的臺盼藍染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)雙染色,
積液是臨床常見癥狀之一。正確鑒別積液的性質對疾病的診治預后有重要意義。隨著實驗室診斷技術的提高,近年來胸腔積液的檢測在細胞形態學、細胞染色體及免疫細胞化學等方面都有著較大的進展,為臨床提供了更可靠的依據。本文對此作一簡要綜述。 一、沉渣涂片瑞吉氏染色 瑞吉氏染色能清楚地顯示細胞漿成份和細胞核染色質
過氧化物酶標記測定法原理:脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端,與dATP形成異多聚體,并可與連接了報告酶(過氧化物酶或堿性磷酸酶)的抗地高辛抗體結合。在適合底物存在下,過氧化物酶可產生很強的顏色
實驗方法原理吖啶橙(Acridine Oringe:AO)是一種常用熒光染料,用于直接染色觀察活細胞或固定染色觀察細胞均可。吖啶橙對DNA和RNA都能染色,快速、簡便和有一定的特異性。吖啶橙對活細胞毒性小,配成2×10-4~1×10-4 可用于直接染色觀察法更好。實驗材料細胞試劑、試劑盒酒
(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混
2018年6月5日,中國食品藥品檢定研究院發布了《CAR-T細胞治療產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》(以下簡稱《考慮要點》)。相信這一文件對所有CAR-T細胞治療的從業者都具有重要的指導意義。 《考慮要點》對CAR-T細胞研發和制備的以下幾個方面進行了深入的探討: &
1)原位缺口翻譯檢測裂解的DNA片段:1、取106經促調亡物質處理的細胞,用1% BSA-PBS洗滌細胞后加入0.1ml FITC標記的抗CD4或抗CD8單克隆抗體,4℃ 20分鐘。用1% BSA-PBS洗滌細胞。置冰上。2、加入0.1ml 1%多聚甲醛,置冰上5分鐘,加入60%(v/v)甲醇溶液,
0引言自19世紀后期,沙門氏菌首次被鑒定為人類的一種病原以來,檢測方法學都是建立在采取感染病人的糞便或血液作為臨床病料的基礎上。此后的60年間,用于從食品中分離沙門氏菌的方法實質上與那些用于臨床病料的方法是相同的。但由于沙門氏菌在污染食品中含量較低以及食品對檢測的干擾給沙門氏菌的檢測帶來了一定的困難
1.顯微鏡檢查:革蘭氏染色后的顯微鏡檢出是腦脊液微生物學檢查中的第一步,這在化膿性腦膜炎時其陽性率約為60-90%.如果腦脊液中細菌數量小于1000個/μl時可出現假陰性,但可以通離心沉淀涂片來提高陽性率。有人提出用吖啶橙熒光染料染色代替革蘭氏染色,可提高細菌出率。結核桿菌用ZiehlNeeiso
1.顯微鏡檢查:革蘭氏染色后的顯微鏡檢出是腦脊液微生物學檢查中的第一步,這在化膿性腦膜炎時其陽性率約為60-90%.如果腦脊液中細菌數量小于1000個/μl時可出現假陰性,但可以通離心沉淀涂片來提高陽性率。有人提出用吖啶橙熒光染料染色代替革蘭氏染色,可提高細菌出率。結核桿菌用ZiehlNeeiso
幽門螺旋桿菌經口到達胃粘膜后定居感染,經數周或數月引發慢性、淺表性胃炎,數年或數十年后發展成為十二指腸潰瘍、胃潰瘍、淋巴增生性胃淋巴瘤、慢性萎縮性胃炎等,而后者是導致胃癌最危險的因素。臨床上檢測幽門螺旋桿菌感染有多種方法,不同的方法各有利弊,下面作一下介紹,供大家參考:Hp
溶酶體熒光探針溶酶體為單層膜蛋白包圍的內含一系列酸性水解酶的小體。溶酶體中含有多種酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶等等,是物質代謝的場所。弱堿性胺選擇性聚集在胞內低pH值的小室中,可用于研究溶酶體的生物合成和發病機理。其中最常用的就是DAMP,它不發熒光,需要和抗DNP的抗體共同使用
用熒光激活的細胞分類儀檢測調亡細胞1)原位缺口翻譯檢測裂解的DNA片段1.取106經促調亡物質處理的細胞,用1% BSA-PBS洗滌細胞后加入0.1ml FITC標記的抗CD4或抗CD8單克隆抗體,4℃ 20分鐘。用1% BSA-PBS洗滌細胞。置冰上。2.加入0.1m
1.熒光顯微鏡(fluorescencemicroscope)是用來觀察標本中的自發熒光物質或以熒光素染色或標記的細胞和結構。熒光顯微鏡是以高壓汞燈產生的短波紫外線為光源,并配有激發、阻斷、吸熱和吸收紫外線等濾片系統,標本中的熒光物質在紫外線激發下產生各種顏色的熒光,借以研究該熒光物質在細胞和