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細胞調亡的流式細胞儀檢測技術一、固定細胞的染色方法1）PI單染色法方法一1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。2．3ml PBS洗一次。3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。5．400目的篩網過濾1次，500～1000r/min離心5min，棄去PBS。6．用1ml PI染液，4℃避光30min。7．流式細胞儀檢測：PI用氬離子激發熒光，激發光波波長為488nm，發射光波波長大于630nm，產生紅色熒光，可分析前散射光對側散射光的散點圖及PI熒光的直方圖。 方法二1．收集細胞（1×106個），500～1000r/min離心5min，棄去培養液。2．1ml PBS/FCS洗一次。3．500～1000r/min離心5min去PBS/FCS，加入500μl PBS/FCS和500μl的多聚甲醛固定液，輕輕混勻......閱讀全文
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：細胞凋亡后呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后（細胞凋亡,細胞凋亡通路，細胞凋亡檢測）核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察：細胞凋亡后呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后（細胞凋亡,細胞凋亡通路，細胞凋亡檢測）核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙（AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色：如果細胞膜不完整
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核 呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色：如果細胞膜 不
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙（AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法［1］。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法［1］。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核 呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色：如果
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙（AO）染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染色：如果
流式細胞儀定量分析，細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性也增加，但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡，應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點：1）
流式細胞儀定量分析，細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性也增加，但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡，應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點：1）
（一） 測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜 的通透性也增加，但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。（二） 用價值流式細胞儀檢測有下列特點：（1）檢測的細胞數量大，因此其反映群體細胞的
一、檢測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點1、檢測的細胞數量大，因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相關
4、DNA 5’末端32P標記（1）將脫磷酸樣品DNA置冰浴上，再加雙蒸水10μl，10×緩沖液2μl，T4多核苷酸激酶10U，32P-ATP 740kBq（20μCi），雙蒸水加至20μl。（2）混合后，37℃水浴60min。（3）加入1μl的0.5mol/L EDTA，90℃滅活5min。5、觀
一、檢測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點：1、檢測的細胞數量大，因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相
（一） 測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。（二） 用價值流式細胞儀檢測
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是；細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用
前言:細胞凋亡是細胞程序性死亡中最具特征性的一種。它在生物發展，體內平衡，甚至在不同的疾病，例如：癌癥，的發病機制都扮演著重要的角色。在過去的幾十年里，科學家們對細胞凋亡進行了廣泛的研究。細胞凋亡的過程中，細胞會有不同的形態變化。同時，細胞膜(plasma membrane)，線粒體(mitocho
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下，
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法（TUNEL法） 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是；細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法（TUNEL法）細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是；細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用
小鼠肺大動脈平滑肌細胞提取物詳細說明：1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終
1 流式細胞儀的概念及其發展歷史1．1 流式細胞儀的基本概念 流式細胞儀（flow cytonletry，FCM）是對高速直線流動的細胞或生物微粒進行快速定量測定和分析的儀器，主要包括樣品的液流技術、細胞的計數和分選技術，計算機對數據的采集和分析技術等。流式細胞儀以流式細胞術為理論基礎，是流體力學、
摘要：隨著科技水平的不斷深入，科研設備的不斷更新，國家對科研投入的不斷增多，植物檢測技術也得到了進一步的發展。流式細胞儀植物檢測技術是近幾年在我國剛剛興起的一項新技術，對許多植物科技工作者來說還比較陌生。本文用比較通俗的語言介紹了進行流式細胞儀分析所必須的基本概念、發展歷史、工作原理、知名品牌、常見
摘要：隨著科技水平的不斷深入，科研設備的不斷更新，國家對科研投入的不斷增多，植物檢測技術也得到了進一步的發展。流式細胞儀植物檢測技術是近幾年在我國剛剛興起的一項新技術，對許多植物科技工作者來說還比較陌生。本文用比較通俗的語言介紹了進行流式細胞儀分析所必須的基本概念、發展歷史、工作原理、知名品牌、常見
（一）細胞膜蛋白分子的檢測原理：細胞膜表面的抗原或受體可特異地與相應的抗體或配體結合，將針對細胞表面抗原的抗體或配體用不同的熒光素標記，根據不同熒光物質的最大激發和發射波長的不同，即可準確定量每種熒光物質的強度，從而推出相應細胞表面抗原表達量1 直接法：細胞＋熒光素標記的抗CD分子的抗體→4oC反應
細胞凋亡（apoptosis）是一種由基因控制的細胞自主性死亡方式。其發生誘因及形態學特征均有別于壞死，與人類免疫系統的發生發展、神經組織發育、器官的形成、腫瘤的發生發展等諸多生物學現象之間有著密切聯系，并且是免疫應答過程中免疫細胞的殺傷機制之一。細胞凋亡的檢測技術已成為免疫學檢測的一個重要內容。凋
隨著發光(luminescence)技術在多種生物實驗中的廣泛應用，生物發光(bioluminescence)技術越來越成為首選的生物檢測手段。在這篇文章中，我們將詳細討論生物發光技術在生物檢測中的應用，以及它與其它發光檢測手段相比所顯示出的優點。 1 生物發光的特點 根據產生光子的
隨著發光(luminescence)技術在多種生物實驗中的廣泛應用，生物發光(bioluminescence)技術越來越成為首選的生物檢測手段。在這篇文章中，我們將詳細討論生物發光技術在生物檢測中的應用，以及它與其它發光檢測手段相比所顯示出的優點。 1 生物發光的特點 根據產生光子的