液相法篩選cDNA表達文庫中RNA結合蛋白實驗
實驗方法原理 將 cDNA 文庫表達的蛋白固定于硝酸纖維素膜或尼龍膜上，然后用標記的 RNA 對其進行篩選的方法是篩選 RNA 結合蛋白研究中最常用的技術。實驗材料 TY試劑、試劑盒 儲存液溶菌酶干粉細菌裂解緩沖液甘油水溶液實驗步驟 一、材料與設備1. 2X TY：16 g 蛋白胨，10 g 酵母提取物，5 g NaCl，水定容至 1 L，高壓滅菌。2. 儲存液：1 mol/L IPTG；1 mol/L DTT；100 mmol/L PMSF( 用無水異丙醇配制）；均分裝后 -20℃ 保存。3. 溶菌酶干粉，-20℃ 保存。4. 細菌裂解緩沖液：150 mmol/L NaCl，50 mmol/L Tris-HCl（pH 8.0），1 mmol/L EDTA，1% NP-40（或 Igepal-630），4℃ 保存。用前取 10 ml 置于冰浴，加 10 μl 1 mol/L DTT、100 μl 100 mmol/L......閱讀全文
液相法篩選cDNA表達文庫中RNA結合蛋白實驗
將 cDNA 文庫表達的蛋白固定于硝酸纖維素膜或尼龍膜上，然后用標記的 RNA 對其進行篩選的方法是篩選 RNA 結合蛋白研究中最常用的技術。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理將 cDNA 文庫表達的蛋白固定于硝酸纖維素膜或尼龍膜上，然后用標記的 RNA 對其進行篩選的方法
液相法篩選cDNA表達文庫中RNA結合蛋白實驗
實驗方法原理 將 cDNA 文庫表達的蛋白固定于硝酸纖維素膜或尼龍膜上，然后用標記的 RNA 對其進行篩選的方法是篩選 RNA 結合蛋白研究中最常用的技術。實驗材料 TY試劑、試劑盒 儲存液溶菌酶干粉細菌裂解緩沖液甘油水溶液實驗步驟 一、材料與設備1. 2X TY：16 g 蛋白胨，10 g 酵母提
液相法篩選cDNA表達文庫中RNA結合蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將 cDNA 文庫表達的蛋白固定于硝酸纖維素膜或尼龍膜上，然后用標記的 RNA 對其進行篩選的方法是篩選 RNA 結合蛋白研究中最常用的技術。 實驗材料
環狀RNA結合功能蛋白
環狀RNA作為研究持續火熱的明星分子，不同于對其豐富的表達譜研究，環狀RNA功能機制研究還僅僅處在起步階段。環狀RNA研究多為miRNA海綿機制，部分circRNA可競爭性結合miRNA，解除miRNA對靶基因的抑制作用，上調靶基因的表達。其實，環狀RNA可以通過結合不同種類的功能蛋白，分別在轉錄前
噬菌體展示技術研究RNA結合蛋白實驗
噬菌體展示技術研究RNA結合蛋白實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 噬菌體展示技術是將外源基因與噬菌體的表面蛋白基因融合，在融合了外源基因的噬菌體顆粒的表面就會表達相應的外源
噬菌體展示技術研究RNA結合蛋白實驗
實驗方法原理噬菌體展示技術是將外源基因與噬菌體的表面蛋白基因融合，在融合了外源基因的噬菌體顆粒的表面就會表達相應的外源蛋白，即外源基因編碼的蛋白被展示在噬菌體顆粒的表面。實驗材料載體tRNA抗體寡核苷酸試劑、試劑盒抗生素儲存液BCIP葡萄糖儲存液X-Gal磁珠洗液蛋白酶抑制劑RNase 抑制劑TEN
誘騙RNA結合蛋白不與癌細胞中的天然RNA分子結合
科學家也開始變得“狡猾”，開始用欺騙來對抗癌癥。希伯萊大學的研究人員發明了一種誘餌，可以阻止癌癥用于轉移的RNA結合蛋白。 近年來，RNA結合蛋白在腫瘤生長中起著重要作用已經成為不爭的事實。這些蛋白在所有細胞中都很活躍，尤其是在癌細胞中，它們與RNA分子結合，加速癌細胞的生長。不幸的是，目前還
天然RNA文庫篩選與蛋白特異性結合的RNA序列實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞中，蛋白質與 RNA 結合參與多種生理調控和發育過程。在 mRNA 的加帽，多聚腺苷酸化，剪切，核外運，翻譯起始及降解等過程中都存在著蛋白質與 RNA 的直接相互作用。在發育的各個階段，RNA 結合蛋白可以通過與 m
天然RNA文庫篩選與蛋白特異性結合的RNA序列實驗
實驗方法原理 細胞中，蛋白質與 RNA 結合參與多種生理調控和發育過程。在 mRNA 的加帽，多聚腺苷酸化，剪切，核外運，翻譯起始及降解等過程中都存在著蛋白質與 RNA 的直接相互作用。在發育的各個階段，RNA 結合蛋白可以通過與 mRNA 的相互作用調控基因的表達。實驗材料 mRNA寡核苷酸試劑、
天然RNA文庫篩選與蛋白特異性結合的RNA序列實驗
細胞中，蛋白質與 RNA 結合參與多種生理調控和發育過程。在 mRNA 的加帽，多聚腺苷酸化，剪切，核外運，翻譯起始及降解等過程中都存在著蛋白質與 RNA 的直接相互作用。在發育的各個階段，RNA 結合蛋白可以通過與 mRNA 的相互作用調控基因的表達。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛
抑制細菌轉錄終止檢測技術篩選RNA結合蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。 實驗材料 N-表達質粒 E.coi
抑制細菌轉錄終止檢測技術篩選RNA結合蛋白實驗
一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。實驗材料N-表達質粒E.coil N567 感受態細菌試劑、試劑盒儲
抑制細菌轉錄終止檢測技術篩選RNA結合蛋白實驗
實驗方法原理 一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。實驗材料 N-表達質粒E.coil N567 感受態細菌試劑、試劑盒 儲存液緩沖液儀器、耗材 蛋白胨培養基蛋白胨平板N-表達質粒組合文庫培養板實驗步驟 ―、材料與設備1. 通過比較 β-半乳糖苷酶表達
噬菌體展示技術研究RNA結合蛋白實驗（三）
4. 免疫印跡檢測外源蛋白的展示情況pDTSPLAY-B 空載體生成的噬菌體表面不含外源基因，僅有帶有 6 個組氨酸標簽和 Myc 標簽的錨定蛋白（基因 Ⅲ 編碼），此蛋白 SDS-PAGE 中的條帶在 65 kDa 的位置（實際 Mr 為 45 kDa）。pDISPLAY-B 載體中插入外
噬菌體展示技術研究RNA結合蛋白實驗（一）
實驗方法原理 噬菌體展示技術是將外源基因與噬菌體的表面蛋白基因融合，在融合了外源基因的噬菌體顆粒的表面就會表達相應的外源蛋白，即外源基因編碼的蛋白被展示在噬菌體顆粒的表面。實驗材料 載體tRNA抗體寡核苷酸試劑、試劑盒 抗生素儲存液BCIP葡萄糖儲存液X-Gal磁珠洗液蛋白酶抑制劑RNase 抑制劑
推動癌癥發展的RNA結合蛋白
最近，一項關于白血病細胞基因表達的研究，發現了一種RNA結合蛋白，在推動癌癥的發展過程中起著重要的作用。該蛋白通常活躍在胎兒組織，在成年人體內是關閉的，但它在一些癌細胞中被再度活化。這種表達模式使它成為抗癌藥物的一個有吸引力的靶標，因為阻斷它的活動，不太可能造成嚴重的副作用。 這項新的研究，發
利用大腸桿菌系統檢測RNA與RNA結合蛋白的相互作用實驗
實驗方法原理大腸桿菌中異源性的 RNA-BP 與靶 RNA 的結合會抑制靶基因的翻譯。此方法已成功地應用于包括 HIV Rcv 蛋白和核仁素（nucleolin）在內的多種 RNA-BP 的研究中。實驗材料質粒菌株試劑、試劑盒X-Gal 儲液IPTG 儲存液lacZ 緩沖液ONPG 溶液碳酸鈉溶液β
利用大腸桿菌系統檢測RNA與RNA結合蛋白的相互作用實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大腸桿菌中異源性的 RNA-BP 與靶 RNA 的結合會抑制靶基因的翻譯。此方法已成功地應用于包括 HIV Rcv 蛋白和核仁素（nucleolin）在內的多種 RNA-BP 的研究中。
利用大腸桿菌系統檢測RNA與RNA結合蛋白的相互作用實驗
實驗方法原理 大腸桿菌中異源性的 RNA-BP 與靶 RNA 的結合會抑制靶基因的翻譯。此方法已成功地應用于包括 HIV Rcv 蛋白和核仁素（nucleolin）在內的多種 RNA-BP 的研究中。實驗材料 質粒菌株試劑、試劑盒 X-Gal 儲液IPTG 儲存液lacZ 緩沖液ONPG 溶液碳酸鈉
RIP技術（RNA結合蛋白免疫沉淀）
RIP技術（RNA Binding Protein Immunoprecipitation，RNA結合蛋白免疫沉淀），是研究細胞內RNA與蛋白結合情況的技術，是了解轉錄后調控網絡動態過程的有力工具，能幫助我們發現miRNA的調節靶點。RIP這種新興的技術運用針對目標蛋白的抗體把相應的RNA-蛋白復合
DNA結合蛋白測定實驗
本實驗主要用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白。實驗方法原理本分析方法是一種簡單、快速和極為靈敏的用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白的方法。在電泳時，與末端標記的DNA片段特異結合的蛋白質阻滯了片段的遷移，因而產生對應于蛋白-DNA復合物的清晰電泳條帶。實驗材料質粒DNA試劑、
DNA結合蛋白測定實驗
實驗材料 質粒DNA試劑、試劑盒 dNTPDNA聚合酶Klenow酶TETAE溴化乙錠TEMED過硫酸銨BSA儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?用一種或多種限制性內切酶在100 μl 體積中消化10 μg 質粒人，產生25~100 bp ?的含有結合位點的DNA片段，并至少有一端是5’突出的
DNA結合蛋白測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本分析方法是一種簡單、快速和極為靈敏的用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白的方法。在電泳時，與末端標記的DNA片段特異結合的蛋白質阻滯了片段的遷移，因而產生對應于蛋白-DNA復合物的清晰電泳條帶。
溶血空斑實驗——小室液相法
溶血空斑試驗，又稱空斑形成細胞（Plague Forming Cell, PFC）試驗，是一種體外檢測抗體形成細胞的方法。（來源：免疫學實習指導--北京大學醫學部基礎醫學院免疫學系）實驗方法原理溶血空斑試驗，又稱空斑形成細胞（Plague Forming Cell, PFC）試驗，是一種體外檢測抗體
硝酸纖維素濾膜結合實驗確定RNA蛋白質解離常數實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用硝酸纖維素濾膜結合可以測定蛋白與 DNA、RNA 間的結合，該方法的基礎在于大多數蛋白可以與硝酸纖維素濾膜結合，如果蛋白質和核酸結合，那么該復合物也可以與硝酸纖維素濾膜結合，但是這種結合必須能夠 承受過濾壓力，并且蛋
硝酸纖維素濾膜結合實驗確定RNA蛋白質解離常數實驗
實驗方法原理 利用硝酸纖維素濾膜結合可以測定蛋白與 DNA、RNA 間的結合，該方法的基礎在于大多數蛋白可以與硝酸纖維素濾膜結合，如果蛋白質和核酸結合，那么該復合物也可以與硝酸纖維素濾膜結合，但是這種結合必須能夠 承受過濾壓力，并且蛋白質在結合到硝酸纖維素濾膜上時還能夠保持與核酸的結合，
硝酸纖維素濾膜結合實驗確定RNA蛋白質解離常數實驗
利用硝酸纖維素濾膜結合可以測定蛋白與 DNA、RNA 間的結合，該方法的基礎在于大多數蛋白可以與硝酸纖維素濾膜結合，如果蛋白質和核酸結合，那么該復合物也可以與硝酸纖維素濾膜結合，但是這種結合必須能夠承受過濾壓力，并且蛋白質在結合到硝酸纖維素濾膜上時還能夠保持與核酸的結合。在本實驗來源「RNA 實驗指
氣相法液相法固相法優缺點
氣相法液相法固相法優點：分離效率高，分析速度快，樣品用量少和檢測靈敏度高。選擇性好，可分離、分析恒沸混合物，沸點相近的物質，某些同位素，順式與反式異構體鄰、間、對位異構體，旋光異構體等。氣相法液相法固相法缺點：分析成本高，液相色譜儀價格及日常維護費用貴，分析時間一般比氣相長。檢測器氣相色譜法中可以使
健康所在RNA結合蛋白調節信使RNA翻譯研究中取得新進展
近日，國際學術期刊Molecular and Cellular Biology在線發表了中科院上海生命科學研究院/上海交通大學醫學院健康所核酸與分子醫學研究組的最新研究進展：AU-Rich Element-Dependent Translation Repression Requires the
總RNA提取實驗——CsCl法
實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞?1. ?室溫下用PBS冼滌細胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. ?在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液，并使之遍布整個平皿。3. ?用橡皮細胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的