細菌的接合是指供體菌與受體菌的完整細胞經直接接觸時供菌的 DNA 向受體菌單向傳遞給而產生基因重組的現象。大腸桿菌的接合配對是由致育因子( F 因子)的存在所決定的。沒有 F 因子的細胞作為受體,稱為 F-,含有 F+ 因子的細胞作為供體。 如果 F 因子是染色體外的細胞質遺傳物質,這種細胞稱為 F+。如果 F 因子整合到染色體上,這種細胞稱為高頻重組(Hfr,high-frequency recombination) 細胞,整合在染色體上的 F 因子有時也會通過不規則雜交而脫離染色體重新成為游離狀態的 F 因子,但由于 F 因子在脫離染色體時往往會附帶著一段染色體片段,這個染色體片段和 F 因子構成一個整體,隨 F 因子一起復制,含有這種 F 因子的細胞叫作 F'。在 Hfr×F- 雜交中,F 因子上包括先導區在內的一部分 DNA 片段結合著染色體 DNA 向受體細胞轉移,F 因子的大部分 DNA ......閱讀全文
一、原理 大腸桿菌染色體呈環狀。高頻重組菌株(Hfr)的染色體上整合有F因子,當Hfr細菌與F-細菌細胞發生接合(即雜交)時Hfr細胞(供體菌)的染色體從Hfr細胞向F-細胞內轉移。由于染色體的轉移具有一定的方向性,并且可以隨時中斷,因此根據結合后F-細菌(以重組子形式選出)中
一、分類 細菌屬于原核細胞型微生物。 最精確的方法為遺傳學分類方法。 最常用的是經典傳統分類法:按照細菌的親緣關系,界門綱目科屬種型株分類。 科:由共同關系的屬組成,如腸桿菌科; 屬:是種的高一級分類單位,通常包含有共同特征或關系密切的種,用以描述微生物的主要特征,如埃希氏菌屬; 種:
一、原理大腸桿菌染色體呈環狀。高頻重組菌株(Hfr)的染色體上整合有F因子,當Hfr細菌與F-細菌細胞發生接合(即雜交)時Hfr細胞(供體菌)的染色體從Hfr細胞向F-細胞內轉移。由于染色體的轉移具有一定的方向性,并且可以隨時中斷,因此根據結合后F-細菌(以重組子形式選出)中Hfr細菌染色體基因出現
第一節 轉化基因片段在體外只是一段核酸分子,是化學物質,無法表現出遺傳物質的生命活性。只有當其存在于活細胞后,生命的特征才能充分展示出來。在分子克隆實踐中,在體外操作的核酸分子只有進入細胞以后才能達到克隆的目的。一、重組DNA分子轉入原核生物細胞1. 重組質粒DNA分子轉化大腸桿菌轉化(transf
實驗方法原理 轉化(transformation)是某一基因型的細胞從周圍介質中吸收來自另一基因型的細胞的DNA而使它的基因型和表型發生相應變化的現象。該現象首先發現于細菌。也是細菌
實驗概要大腸桿菌感受態細胞的CaCl2法制備及質粒轉化。實驗原理處于對數生長期的細菌經CaCl2 處理后接受外源DNA的能力顯著增加。細菌處于容易吸收外源DNA的狀態叫感受態。 在自然條件下,很多質粒都可通過細菌接合作用轉移到新的宿主內,但在人工構建的質粒載體中,一般缺乏此種轉移所必需的m
近日,中國科學院南海海洋研究所研究員王曉雪團隊在《美國科學院院刊》(PNAS)上,在線發表了題為《接合型質粒編碼的毒素/抗毒素系統PrpT/PrpA直接調控質粒拷貝數》的論文,系統闡述了質粒編碼的毒素/抗毒素系統調控質粒復制功能的發現和作用機制。 質粒是存在于細菌染色體之外,具有獨
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
實驗概要 獲得感受態細胞;制備含有目的片段的克隆。實驗原理 在自然條件下,很多質粒都可通過細菌接合作用轉移到新的宿主內,但在人工構建的質粒載體中,一般缺乏此種轉移所必需的mob基因,因此不能自行完成從一個細胞到另一個細胞的接合轉移。如需
第一節 概 述 在自然條件下,很多質粒都可通過細菌接合作用轉移到新的宿主內,但在人工構建的質粒載體中,一般缺乏此種轉移所必需的mob基因,因此不能自行完成從一個細胞到另一個細胞的接合轉移。如需將質粒載體轉移進受體細菌,需誘導受體細菌產生一種短暫的感受態以攝取外源DNA。轉化(Transfo
葡萄牙科學家近日研究發現,大腸桿菌(Escherichia coli)有益突變發生的頻率比之前預想的要高上1000倍之多。這將有助于解釋為什么細菌能快速對抗生素產生抵抗性。相關論文發表在8月10日的《科學》雜志上。 領導該項研究的是葡萄牙古爾班基安科學研究所(Gulbenkian Scie
為加強藥品生產監管,進一步指導和規范藥品生產企業科學系統地開展除菌過濾技術及應用、無菌工藝模擬試驗,國家藥品監督管理局組織制定了《除菌過濾技術及應用指南》,作為實施《藥品生產質量管理規范(2010年修訂)》的指導性文件,現予發布,自2018年10月1日起施行。 特此通告。 附件:除菌過濾技術
2017年12月22日,CDE發布《已上市化學仿制藥(注射劑)一致性評價技術要求(征求意見稿)》;2018年9月11日國家藥品監督管理局組織制定了《除菌過濾技術及應用指南》《無菌工藝模擬試驗指南(無菌原料藥)》《無菌工藝模擬試驗指南(無菌制劑)》;小編看注射劑一致性評價征求意見稿很快就要轉正了,
分析測試百科網訊 近日,國家藥品監督管理局發布關于《除菌過濾技術及應用指南》等3個指南的通告。 通知中說明為加強藥品生產監管,進一步指導和規范藥品生產企業科學系統地開展除菌過濾技術及應用、無菌工藝模擬試驗,國家藥品監督管理局組織制定了《除菌過濾技術及應用指南》《無菌工藝模擬試驗指南(無菌原料藥
除菌過濾技術及應用指南 1. 目的 為指導和規范除菌過濾技術在無菌藥品生產中的應用,保證無菌藥品的安全、有效和質量穩定,依據《藥品生產質量管理規范(2010年修訂)》及附錄,制定本指南。 本指南不具有法律約束性,僅作為藥品生產企業、工程設計、設備制造以及藥品監管單位的人員參考使用。本指南是
作為后基因組時代出現的新興研究領域之一, 蛋白質組學(proteomics)正受到越來越多的關注。 蛋白質組學的研究目標是對機體或細胞的所有蛋白質進行鑒定和結構功能分析。 蛋白質組學的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白質分離技術如二維凝膠電泳和高效液相層析, 經典的蛋白質鑒定方法如氨
作為后基因組時代出現的新興研究領域之一, 蛋白質組學(proteomics)正受到越來越多的關注。 蛋白質組學的研究目標是對機體或細胞的所有蛋白質進行鑒定和結構功能分析。 蛋白質組學的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白質分離技術如二維凝膠電泳和高效液相
大腸桿菌的電擊轉化實驗可以用于:更為簡便快捷地進行轉化。實驗方法原理轉化(transformation)是某一基因型的細胞從周圍介質中吸收來自另一基因型的細胞的DNA而使它的基因型和表型發生相應變化的現象。該現象首先發現于細菌。也是細菌間遺傳物質轉移的多種形式中最早發現的一種,它不同于通過噬菌體感染
1.1.4接合轉化接合(Conjugation)是指通過細菌細胞之間的直接接觸導致DNA從一個細胞轉移至另一個細胞的過程。這個過程是由結合型質粒完成的,它通常具有促進供體細胞與受體細胞有效接觸的接合功能以及誘導DNA分子傳遞的轉移功能,兩者均由接合型質粒上的有關基因編碼。在DNA重組中常用的絕大多數
遺傳重組是生命的重要現象之一,在生物進化過程中起著極其重要的作用。從低等的原核生物到高等的哺乳動物其重組方式是多種多樣的。真核生物中的遺傳重組,主要是通過染色體上的基因自由組合或交換實現的,是生物有性生殖過程的一部分,形成的二倍性合子的遺傳組分,一半來自父體,一半來自母體,基因的自由結合和交換是在兩
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
摘要 蛋白質組學是在后基因組時代出現的一個新興的研究領域, 它的主要任務是識別鑒定細胞、組織或機體的全部蛋白質, 并分析蛋白質的功能及其模式。 因此, 揭示蛋白質組中蛋白質間的相互作用關系也是蛋白質組學的重要內容之一。 酵母雙雜交技術是用來檢測蛋白質間是否相互作用的一
時間總是過得很快,2016年馬上就要過去了,迎接我們的將是嶄新的2017年,2016年,我國有很多優秀科研機構的科學家們都做出了意義重大、影響深遠的研究成果,發表在國際頂級期刊上。本文中小編盤點了2016年我國科學家發表的一些重磅級研究,以饕讀者。 --結構生物學 -- 1.清華大學 施一
從列文虎克第一次看到細菌以來,300多年來微生物學從孕育、誕生到發展,以至于今天成為生命科學中的一個不可忽略的重要分支。在這漫長的時間中,一批杰出的科學家在微生物學的各方面作出的貢獻,他們是人類認識、利用和駕御微生物偉大成就中的明星。 年代人或單位發現1684安東尼.封.列文虎克 &n
基本原理 酵母菌是多形的、不運動的單細胞微生物,細胞核與細胞質已有明顯的分化,菌體比細菌大。繁殖方式也較復雜,無性繁殖主要是出芽生殖,僅裂殖酵母屬是以分裂方式繁殖;有性繁殖是通過接合產生子囊孢子。本實驗通過用美藍染色制成水浸片,和水-碘水浸片來觀察生活的酵母形態和出芽生殖方式。美藍是一種無毒性染料
一、目的要求 1.觀察酵母菌的細胞形態及出芽生殖方式。2.觀察酵母菌的菌落特征。3. 學習掌握區分酵母菌死、活細胞的染色方法。 二、基本原理 酵母菌是多形的、不運動的單細胞微生物,細胞核與細胞質已有明顯的分化,菌體比細菌大。繁殖方式也較復雜,無性繁殖主要是出芽生殖,僅裂殖酵母屬是以分裂方式繁殖
生物學家們總是沉迷于對基因組修修補補,而其中一種近期紅得發紫的技術就是 CRISPR。自2012年CRISPR/Cas 首次作為一種基因組編輯工具登臺以來,關于這種技術的論文數量就大幅增加,最好的證明之一就是2015年兩位科學家由于在CRISPR基因組編輯技術方面的重要貢獻而獲得“科學突破獎”,
一、目的要求: 了解原生質體融合技術的原理. 學習并掌握以細菌為材料的原生質體融合技術. 二、基本原理: 原核微生物基因重組主要可通過轉化、轉導、接合等途徑,但有些微生物不適于采用這些途徑,從而使育種
一、目的要求: 了解原生質體融合技術的原理. 學習并掌握以細菌為材料的原生質體融合技術. 二、基本原理: 原核微生物基因重組主要可通過轉化、轉導、接合等途徑,但有些微生物不適于采用這些途徑,從而使育種工作受到一定