用CRISPR突破ChIPseq的局限
生物體內的所有細胞都攜帶著相同的遺傳物質——DNA。不同細胞在轉錄因子的控制下表達不同的基因,從而實現特異性的功能。比如說,神經細胞表達的基因有助于向其他神經細胞傳遞信息,而免疫細胞表達的基因有助于它們合成抗體。 將染色質免疫共沉淀技術與下一代高通量測序技術相結合的染色質免疫共沉淀測序(ChIP-seq),被廣泛用于鑒定基因組中的轉錄因子結合事件。這一技術在功能基因組學和基因表達調控領域起到了關鍵性的作用,但它還存在一定的局限。舉例來說,ChIP-seq級別的抗體并不好找,大多數商業化抗體不能生成有用的數據集。 為了克服這一障礙,HudsonAlpha生物技術研究院和Alabama大學的研究人員開發了一種新技術。他們通過對內源轉錄因子進行表位標記(epitope tagging)來實現ChIP-seq,這一成果發表在九月九日的Genome Research雜志上,文章的通訊作者是Eric M. Mendenhall和Ri......閱讀全文
基因敲除技術的研究進程
基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的,是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。所謂胚胎干細胞(EmbryonicStem cell,ES)是從著床前胚胎(孕3—5天)分離出的內細胞團(Inner cellmass,ICM)細胞,它具有向各種組織細胞分化的多分化
基因打靶技術的研究
基因打靶技術是從20世紀80年代發展起來的,是建立在對同源重組不斷了解的基礎之上。首先是以酵母這種較為簡單的真核模式生物為基礎,來對相關技術進行研究。隨著外源DNA導入酵母細胞方法的建立、標記基因有效選擇的利用、同源重組轉化子篩選系統的建立、載體同源序列DNA(靶標)雙鏈斷裂提高同源重組效率的利用,
基因敲除技術的研究歷史
基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的,是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。所謂胚胎干細胞(EmbryonicStem cell,ES)是從著床前胚胎(孕3—5天)分離出的內細胞團(Inner cellmass,ICM)細胞,它具有向各種組織細胞分化的多分化
基因敲除技術的研究歷史
基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的,是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。所謂胚胎干細胞(EmbryonicStem cell,ES)是從著床前胚胎(孕3—5天)分離出的內細胞團(Inner cellmass,ICM)細胞,它具有向各種組織細胞分化的多分化
新研究:精準基因編輯技術
中國科學院遺傳與發育生物學研究所高彩霞研究組開創性地運用AI輔助結構預測,建立起基于三級結構的蛋白聚類方法,并擴展為全新的脫氨酶挖掘體系,開發了一系列具有中國自主知識產權的新型堿基編輯工具。該工作為蛋白功能分析、新功能元件挖掘提供了全新策略。新研發的堿基編輯系統具有我國自主知識產權的精準基因編輯
基因敲除技術的研究歷史
基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的,是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。所謂胚胎干細胞(EmbryonicStem cell,ES)是從著床前胚胎(孕3—5天)分離出的內細胞團(Inner cellmass,ICM)細胞,它具有向各種組織細胞分化的多分化
細胞遷移的研究技術
為了研究某一蛋白質在細胞遷移中所扮演的角色,一般來說科學家可以將某蛋白的編碼基因進行突變,甚至應用新近的RNAi現象,或者加入該蛋白質的阻斷劑(inhibitor)來抑制某一個蛋白質的表現,并分析此抑制對于細胞遷移的影響,反而得知被抑制的蛋白質與細胞遷移的作用。新科技對細胞遷移研究起到了極大的推動作
細胞遷移的研究技術
為了研究某一蛋白質在細胞遷移中所扮演的角色,一般來說科學家可以將某蛋白的編碼基因進行突變,甚至應用新近的RNAi現象,或者加入該蛋白質的阻斷劑(inhibitor)來抑制某一個蛋白質的表現,并分析此抑制對于細胞遷移的影響,反而得知被抑制的蛋白質與細胞遷移的作用。 新科技對細胞遷移研究起到了極大
轉基因技術基因工程疫苗的研究
使用DNA重組生物技術,把天然的或人工合成的遺傳物質定向插入細菌、酵母菌或哺乳動物細胞中,使之充分表達,經純化后而制得的疫苗。應用基因工程技術能制出不含感染性物質的亞單位疫苗、穩定的減毒疫苗及能預防多種疾病的多價疫苗。 目前已經商業化使用的部分基因工程疫苗: 乙肝疫苗、丙肝疫苗、百日咳基因工
GeneCopoeia基因克隆技術相關研究
與PCR、qPCR等技術一樣,作為分子實驗室必備手段,分子克隆技術被廣泛用于多樣的基因功能研究。所謂分子克隆指的是在體外將核酸分子插入病毒、質粒或其他載體分子,構成遺傳物質的新組合,使之進入宿主細胞內并獲得持續穩定增殖能力和表達。?基因克隆技術的發展經歷3個階段,第一階段為經典的T4 DNA連接酶介
基因敲除技術最新研究進展
基因敲除技術最新研究進展—|基因敲除技術|轉基因研究|基因克隆|基因靶向操作|基因敲除技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發展起來的一種分子生物學技術。1987年Thompsson建立了完整的ES細胞基因敲除的小鼠模型 。近年來新興起了ZFNs、TALENS、Cas9等多
基因敲除技術最新研究進展
基因敲除技術最新研究進展—|基因敲除技術|轉基因研究|基因克隆|基因靶向操作| 基因敲除 技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發展起來的一種分子生物學技術。1987年Thompsson建立了完整的ES細胞基因敲除的小鼠模型 。近年來新興起了ZFNs、TALENS、Cas9
干細胞研究泰斗發國內期刊論文-解析基因調控新技術
據最新公布的SCI影響因子,中科院主辦的《Cell Research》雜志從去年的8.19躍升至10.526,實現了10的突破。這份期刊主要收納細胞生物學等領域前沿科學研究成果,近期干細胞研究領域的權威人物Rudolf Jaenisch教授帶領研究組,在這一期刊上發表了關于一種新基因調控
研究發現Klotho基因影響細胞衰老
眾所周知,生活中經歷的壓力事件會讓大腦提前衰老。近日,一項研究發現,基因突變與多種類型的精神壓力相互作用。這些精神壓力包括與細胞老化相關的創傷后應激障礙(PTSD)、疼痛和睡眠障礙。 Klotho基因(以負責紡織生命之線的希臘女神Clotho命名)被認為與長壽和各種與年齡相關的疾病有關。這是第
基因編輯技術將癌細胞變身為健康細胞
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/507993.shtm ? 轉化的腫瘤細胞失去了所有癌癥特征,類似于正常肌肉細胞。圖片來源:冷泉港實驗室 科技日報記者?劉霞 美國冷泉港實驗室科學家在一項新研究中,使用CRISPR基因
全新基因編輯技術引發研究領域巨變
美國舊金山格萊斯頓研究所遺傳學家Bruce Conklin一直試圖找到DNA變異如何影響不同的人類疾病,但使用的工具有些笨重。當他研究來自病人的細胞時,很難知道哪個序列對疾病來說很重要,哪些只是背景噪音。同時,將突變植入細胞是一項昂貴且費力的工作。 2012年,他通過閱讀了解到一項最新發表的
基因敲除新技術助力疾病研究
是什么基因導致了乳腺癌形成?是什么腦細胞突變導致了阿爾茨海默氏癥發病?為了尋找新的治療方法,科學家們必須要了解細胞水平上的疾病觸發機制。在轉基因小鼠上開展實驗成為了基礎醫學研究一個不可或缺的部分。現在,科學家們開發了一種新方法,可以幫助實驗室用較少的實驗動物開展他們的研究。 科學家們利用轉基因
基因芯片技術的應用實驗研究
包括基因表達檢測、尋找新基因、雜交測序、基因突變和多態性分析以及基因文庫作圖以及等方面。1、基因表達檢測。人類基因組編碼大約10萬個不同的基因,僅掌握基因序列信息資料,要理解其基因功能是遠遠不夠的,因此,具有監測大量mRNA(信使RNA,可簡單理解為基因表達的中介物)的實驗工具很重要。有關對芯片技術
基因編輯技術的研究進展介紹
基因編輯技術是一種定向改變細胞或個體生物遺傳信息的實驗方法。這項技術的應用可以進行基因靶向敲除、置換、突變和將外源基因引入生物體基因組等人工修飾和轉化,修飾后的遺傳信息可以通過生殖系統傳遞給后代生物體,使遺傳后代個體表達修飾性狀。通過對轉基因生物的研究,可以幫助人類探索生命本質,揭開疾病發生的奧秘,
轉基因植物技術的研究目的
轉基因植物是基因組中含有外源基因的植物。通過原生質體融合、細胞重組、遺傳物質轉移、染色體工程技術獲得,改變植物的某些遺傳特性,培育優質新品種,或生產外源基因的表達產物,如胰島素等。 在過去的二十年里,隨著分子生物學各領域的不斷發展,植物基因的分離、基因工程載體的構建、細胞的基因轉化、轉化細胞的
基因工程重組抗體技術的研究
在抗體研究的漫長過程中,相繼發展了三代不同水平的抗體制備技術?其中以抗原免疫高等脊椎動物制備的多克隆抗體,稱為第一代抗體;通過雜交瘤技術生產的只針對某一種特定抗原決定簇的單克隆抗體,稱為第二代抗體;應用重組DNA技術或是基因突變的方法改造某種抗體基因的編碼序列,使之產生出自然界中原本存在的抗體蛋白質
基因編輯技術有望治療鐮狀細胞病
一個美國研究小組使用CRISPR-Cas9基因編輯技術,成功修復了鐮狀細胞病患者造血干細胞中的致病突變基因,向治療該病邁出關鍵一步,同時也為治療β-地中海貧血癥、重癥聯合免疫缺陷甚至艾滋病等多種疾病指明了新方向。相關研究結果發表在10月12日的《科學·轉化醫學》雜志在線版上。 鐮狀細胞病是一種
新型基因技術有望治療鐮狀細胞貧血
澳大利亞研究人員最近報告,他們通過一種新型基因技術,重新激活人體紅細胞中一個“沉睡”的基因,成功提高了紅細胞的血紅蛋白產量。在此基礎上有望開發出治療鐮狀細胞貧血等血液疾病的新方法。 澳大利亞新南威爾士大學發布的新聞公報說,在人類胚胎發育階段,有特定基因負責編碼合成胎兒血紅蛋白,幫助胎兒從母體
基因改造技術可激活細胞電活性
據美國物理學家組織網近日報道,最近,杜克大學工程師對正常情況下不活躍的細胞進行了基因改造,引入了能形成離子通道的基因,讓它們能產生電流并導電。該結果對深入研究生物電行為、開發神經系統和心臟病新療法具有重要意義,還可用于設計新型傳感器來探測疾病和環境毒素等。實驗結果發表在《自然通訊》
Science:新型單細胞基因表達檢測技術
發表在最新一期《科學》(Science)雜志上的一篇研究論文,證實了一種新型的大規模平行測序技術可借助于新一代測序(NGS)在單細胞水平上檢測基因表達。 論文作者、來自Cellular Research, Inc公司的Christina Fan博士、Glenn Fu博士以及Stephen Fo
外源基因在真核細胞表達技術
生化方法l??????磷酸鈣介導的質粒DNA轉染真核細胞1.??????轉染前24 h,通過胰酶消化收集細胞,用適當的完全培養基以1×105至4×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60 mm組織培養皿或12孔板上。于含5%~7% CO2的37℃溫箱孵育20~24 h。轉染前1 h換液。2.?????
外源基因在真核細胞表達技術
生化方法*?磷酸鈣介導的質粒DNA轉染真核細胞轉染前24 h,通過胰酶消化收集細胞,用適當的完全培養基以1×105至4×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60 mm組織培養皿或12孔板上。于含5%~7% CO2的37℃溫箱孵育20~24 h。轉染前1 h換液。2.按照下屬方法制備磷酸鈣-DNA沉淀:
外源基因在原核細胞表達技術
原核細胞l??????用IPTG誘導啟動子在大腸桿菌中表達克隆化基因?含重組表達載體的大腸桿菌菌株的構建1.??????PCR修飾或限制性內切酶消化分離DNA片段,片段5’端和3’端帶有與IPTG誘導表達載體對應的限制酶位點。2.??????含靶cDNA/基因的DNA片段與表達載體連接。3.????
新型基因技術有望治療鐮狀細胞貧血
澳大利亞研究人員最近報告,他們通過一種新型基因技術,重新激活人體紅細胞中一個“沉睡”的基因,成功提高了紅細胞的血紅蛋白產量。在此基礎上有望開發出治療鐮狀細胞貧血等血液疾病的新方法。 鐮狀細胞貧血是一種較常見的遺傳性血液疾病,患者的紅細胞中含有異常血紅蛋白,細胞由正常情況下的圓形變為鐮刀形,引
外源基因在原核細胞表達技術
原核細胞*用IPTG誘導啟動子在大腸桿菌中表達克隆化基因?含重組表達載體的大腸桿菌菌株的構建1.PCR修飾或限制性內切酶消化分離DNA片段,片段5’端和3’端帶有與IPTG誘導表達載體對應的限制酶位點。2.含靶cDNA/基因的DNA片段與表達載體連接。3.重組質粒轉化有lacIq?等位基因的大腸桿菌