盤點：分子診斷常用技術50年的沿革與進步
一、基于分子雜交的分子診斷技術 上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年，由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增，人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現，為基于分子雜交的體外診斷方法進行了最初的技術儲備。 (一)DNA印跡技術(Southernblot) Southern于1975年發明了DNA印跡技術，通過限制性內切酶將DNA片段化，再以凝膠電泳將長度不等的DNA片段進行分離，通過虹吸或電壓轉印至醋酸纖維膜上，再使膜上的DNA變性與核素標記的寡核苷酸探針進行分子雜交，經洗脫后以放射自顯影鑒別待測的DNA片段-探針間的同源序列。這一方法由于同時具備DNA片段酶切與分子探針雜交，保證了檢測的特異性。因此，一經推出后便成為探針雜交領域最為經典的分子檢測方法，廣為運用于各種基因突變，如缺失、插入、易位等，及與限制性酶切片......閱讀全文
熒光探針的分類檢測
常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質的定量分析外，在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術以及DNA測序上都有著廣泛的應用。 檢測熒光探針的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置（CCD）熒光成像（包括用于微區分析的激光共聚
檢測酶活性的熒光探針
檢測酶活性的熒光探針?共聚焦激光掃描顯微鏡除了具備熒光顯微鏡檢測熒光酶細胞化學的作用以外，在檢測活細胞酶活性動態變化方面有著無可比擬的優勢。通過對細胞施予不同的處理因素可檢測細胞內相應的酶被激活或滅活的動態變化過程。有的酶熒光探針是自身就可發出熒光、有的是與酶結合后發出熒光、有的則是被酶分解后發出熒
局部熒光探針可以檢測腸癌啦！
近日，國際化學與生物學雜志chemistry＆biology發表了來自斯坦福大學醫學院Matthew Bogyo研究小組的一項最新研究成果，他們發現一種熒光淬滅探針（aABP）能夠特異性靶向在腸道發育不良中高表達的半胱氨酸蛋白酶，對指示腸道腫瘤具有非常高的敏感性和特異性。 早期檢測結腸息肉能夠
鈣離子熒光探針：比值型熒光探針
前面我們介紹了熒光指示劑法可以將Ca2+檢測的實驗與其他技術結合使用，如可以與流式細胞儀、熒光分光光度計、或者熒光顯微鏡進行聯合檢測 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等，數量較少，可見光型數目較多，包括Fluo-3、鈣黃綠素、Rhod-2等。熒光指示劑根據測光原理和數據
功能納米熒光探針用于腫瘤細胞檢測
惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的重大疾病之一，目前已成為人類死亡的主要原因，并且其發病率呈逐年上升的趨勢。若能早期發現腫瘤并及時治療，可大大提高腫瘤的治愈率。因此，對于腫瘤的早期檢測和診治已成為各國科學家關注的熱點。為了實現腫瘤早期診治，目前研究大多集中于檢測活細胞內一種腫瘤標志物，這可能會帶來“假
LSCM常用的檢測內容及其熒光探針
胞內游離鈣 共聚焦激光掃描顯微鏡常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等，前兩者為單波長激光探針，利用其單波長激發特點可直接測量細胞內Ca2+動態變化，為鈣定性探針；后兩者為雙波長激發探針，利用其雙波長激發特點和比率技術，能定量細胞內i，為鈣定量探針。定量細胞內[Ca2+]i
ros熒光探針檢測結果怎么看
活性氧檢測試劑盒（Reactive oxygen species assay kit）是一種利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜，進入細胞內后，可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜，從而使探針很容易被裝載到細胞內。細
基因探針基因探針的基本介紹
基因探針基因探針（probe）就是一段與目的基因或DNA互補的特異核苷酸序列，它可以包括整個基因，也可以僅僅是/基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之轉錄而來的RNA。 1．探針的來源 DNA探針根據其來源有3種：一種來自基因組中有關的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe
細胞凋亡檢測實驗——熒光探針雙標記法
實驗方法原理本實驗用1μg/ml 三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡，同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）對細胞進行雙重染色，可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿（HT）是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病，
新型復合熒光探針可實現快速、靈敏檢測
過氧亞硝酸鹽（Peroxynitrite，ONOO-）是由超氧陰離子自由基和一氧化氮自由基形成的具有高活性的活性氮物種，是許多體內循環途徑的信號傳導分子。同時，該分子具有強氧化性，可引起自由基介導的硝化反應，從而會影響生物體內多種生物過程，對脂質、蛋白、DNA等造成不可逆轉的損傷。研究表明，過氧
熒光探針有毒嗎
有毒的。在紫外-可見-近紅外區有特征熒光，并且其熒光性質可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
DNA微陣列檢測基因表達水平及識別基因序列
Schena等1996年用擬南芥光調基因微陣列，以不同器官中的mRNA為探針，檢測其基因表達水平，結果表明葉mRNA的表達水平是根的500倍。Shelon等1996年將釀酒酵母基因組DNA克隆制成微陣列，用6條最大染色體和10條最小染色體DNA探針分別標記上紅，綠熒光標記進行雜交檢測，結果表明9
玉米內源基因核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法SN標準）...
玉米內源基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法SN標準）使用說明說明轉基因檢測系列可針對食品、飼料等樣品中轉基因成分的特異核酸片段進行擴增，通過實時擴增曲線判定結果。本產品用于玉米成分的檢測，檢出限為0.1%。◆?產品組成（ 48測試） 042012M
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別 熒光原位雜交技術問世于70年代后期，其曾多用于染色體異常的研究，近年來隨著FISH所應用的探針鐘類的不斷增多，特別是全Cosmid探針及染色體原位抑制雜交技術的出現，使FISH技術不僅在細胞遺傳學方面，而且還廣泛應用于腫瘤學研究，如基因診斷基因定位等 。原
新型探針！輕松檢測果蠅的基因編碼
在國家自然科學基金面上項目（項目編號31671118）等的資助下，北京大學李毓龍研究組在神經遞質熒光探針的開發方面取得重要進展，先后報道了可基因編碼的乙酰膽堿熒光探針和多巴胺熒光探針的研究成果。其中乙酰膽堿熒光探針以“A genetically encoded fluorescent acety
新型高性能基因編碼的環磷酸腺苷熒光探針
近日，中國科學院深圳先進技術研究院生物醫學與健康工程研究所生物醫學光學與分子影像研究中心研究員儲軍課題組在《自然-通訊》（Nature Communications）上，發表了題為A high-performance genetically encoded fluorescent indicat
比率熒光探針實現可視化檢測農藥殘留
近期，中國科學院合肥物質科學研究院固體物理研究所研究員蔣長龍團隊在氨基甲酸酯農藥和有機磷農藥殘留分析檢測方面取得新進展。研究設計制備了兩種高效的比率熒光納米探針，并結合智能手機的顏色識別器，實現對食品和環境水體中農藥的可視化定量檢測。相關研究成果發表在《化學工程雜志》（Chemical Engi
熒光定量PCR檢測試劑盒簡述熒光探針法的應用
熒光定量PCR檢測試劑盒簡述熒光探針法的應用熒光定量PCR檢測試劑盒的原理在于PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;P
搖核酸的熒光探針
DNA和RNA?搖核酸的熒光探針 用于共聚焦激光掃描顯微鏡的主要有Acridine Orange(吖啶橙，AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶，PI)。兩種染料既可標記DNA又可標記RNA，如為獲得單獨的DNA或RNA分布，染色前可用RNA酶或DNA酶處理細胞。PI不能進入完整的細胞膜
熒光探針的相關介紹
在紫外-可見-近紅外區有特征熒光，并且其熒光性質（激發和發射波長、強度、壽命、偏振等）可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。 與核酸(DNA或RNA)、蛋白質或其他大分子結構非共價相互作用而使一種或幾種熒光性質發生改變的小分子物質。可用于研究大分子物質的性
熒光探針的功能介紹
在紫外-可見-近紅外區有特征熒光，并且其?熒光性質（激發和發射波長、?強度、壽命、?偏振等）可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
熒光探針技術的概念
受到激發光激發后，從激發態單重態回到基態，在紫外-可見-近紅外區有特征發光，稱之為熒光。熒光性質（激發和發射波長、強度、壽命、偏振等）可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子，被稱為熒光探針。熒光探針分類很多，可以根據材料屬性分為有機和無機探針，可以根據探針尺寸分為
溶酶體熒光探針原理介紹
溶酶體熒光探針溶酶體為單層膜蛋白包圍的內含一系列酸性水解酶的小體。溶酶體中含有多種酶，如糖苷酶、酸性磷酸酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶等等，是物質代謝的場所。弱堿性胺選擇性聚集在胞內低pH值的小室中，可用于研究溶酶體的生物合成和發病機理。其中最常用的就是DAMP，它不發熒光，需要和抗DNP的抗體共同使用
轉基因植物檢測的探針制備過程
轉基因植物檢測的探針制備以含中間載體質粒的大腸桿菌材料為例進行介紹。(一)中間載體質粒 DNA 提取(略)(二)質粒 DNA 限制酶切及探針片段回收1、操作(1)限制性內切酶消化在0.5mL Eppendorf 管中,按如下順序及用量加入試劑,建立 20μL 酶切體系:無菌蒸餾水6μL,10倍緩沖液
18S－基因核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法）使用說明
物種鑒定系列 真核生物 18S?基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）請于-20℃條件下保存，有效期 12?個月 ◆?產品說明 物種鑒定系列可針對食品、飼料等樣品中動物源性成分的特異核酸片段進行擴增，通過實時擴增曲 線判定結果。本產品用于真核生物的檢測，檢出限為?0.1%。 ◆?產品組成（48?測
BAR基因核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法SN標準）使用說明
BAR基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法SN標準）◆ 產品說明轉基因檢測系列可針對食品、飼料等樣品中轉基因成分的特異核酸片段進行擴增，通過實時擴增曲線判定結果。本產品用于BAR基因成分的檢測，檢出限為0.1%。◆ 產品組成（ 48測試）041062M試劑含量A-BAR-P1000μL × 1支N
真核生物－18S－基因核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法）
物種鑒定系列 真核生物 18S 基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） 請于-20℃條件下保存，有效期 12 個月 ◆ 產品說明 物種鑒定系列可針對食品、飼料等樣品中動物源性成分的特異核酸片段進行擴增，通過實時擴增曲 線判定結果。本產品用于真核生
基因芯片－原理
基因芯片(gene chip)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，可以基因芯片的測序原理用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與
基因芯片的原理
基因芯片（gene chip）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，可以用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與基因芯片上對應位置
生物芯片的原理
基因芯片(gene chip)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的 核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，可以 用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八 核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與基因芯