生化細胞所揭示Kras突變體對肺癌發生發展及存活的作用
5月11日,Plos One在線發表了中科院上海生命科學研究院生化與細胞所季紅斌研究組、劉新垣研究組與美國哈佛大學Dr. Kwok-Kin Wong合作的最新研究成果Temporal Dissection of K-rasG12D Mutant In Vitro and In Vivo Using a Regulatable K-rasG12D Mouse Allele,揭示了K-ras突變體在肺癌發生、發展及存活中的重要作用。 肺癌是嚴重危害我國人民生命健康的重大疾病之一,揭示其中關鍵的致病基因在肺癌發生發展及存活中的作用將為臨床上肺癌的“個體化”分子靶向治療提供潛在的藥靶和新的策略;而可時空調控基因表達的小鼠模型能夠更好地促進肺癌發病分子機理的研究。目前國際上應用最廣泛的肺癌動物模型就是LSL-K-rasG12D小鼠模型,可以通過鼻腔滴入攜帶Cre表達基因的腺病毒或與肺上皮細胞特異性的Cre轉基因小鼠雜交來實現K-......閱讀全文
小鼠肺癌模型的腫瘤在間歇性缺氧實驗的應用
間歇性缺氧促進小鼠肺癌模型的腫瘤發展? ??阻塞性睡眠呼吸暫停(OS A)的特點是睡眠期間上氣道反復閉塞導致慢性間歇性缺氧(CIH),阻塞性睡眠呼吸暫停綜合癥是一種非常普遍的睡眠障礙,涵蓋至少3%至7%的成年人口。OSA與代謝綜合征、系統性高血壓、肺血管疾病、缺血性心臟病、充血性心力衰竭等疾病有關。
生化細胞所揭示Kras突變體對肺癌發生發展及存活的作用
5月11日,Plos One在線發表了中科院上海生命科學研究院生化與細胞所季紅斌研究組、劉新垣研究組與美國哈佛大學Dr. Kwok-Kin Wong合作的最新研究成果Temporal Dissection of K-rasG12D Mutant In Vitro and In Vivo Usin
個體化裸鼠荷人肺癌腫瘤模型的建立實驗——肺癌動物模型
個體化裸鼠荷人肺癌腫瘤模型的建立可以:(1)疾病定性篩選;(2)抗癌藥物的篩選;(3)為患者進行個體化治療提供藥物篩選的依據;(4)為研究經過各項治療后患者腫瘤細胞發生各種突變的情況和機制奠定基礎。實驗方法原理組織塊移植組將直徑2 mm的人肺癌新鮮標本癌組織塊移植于BALB/C裸鼠背部皮下組織內,每
小鼠腦出血模型的建立
實驗材料小鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉儀器、耗材鉆孔器注射器含抗凝血劑的試管鼠板縫合方針和線實驗步驟1.固定小鼠?a.用繩子將已麻醉的小鼠俯臥(背朝上)固定在鼠板上,繩子用活結,這樣不易打滑。固定時要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線上。?b.用棉花將小鼠的頭微微墊高,這樣方便切開皮膚。?2.鉆
PNAS:小鼠模型須謹慎使用
小鼠被廣泛用于模擬人類代謝、疾病和藥物應答,是醫學研究中的一個基本工具。然而斯坦福大學的研究團隊指出,人類和小鼠的基因表達存在著驚人的差異,不論是蛋白編碼基因還是非編碼基因。這項研究發表在十一月十七日的美國國家科學院院刊PNAS雜志上。 Michael Snyder及其同事在15種組織中比較了
常見小鼠腫瘤模型特點概述
嗨,小伙伴們晚上好啊!首先呢,小編想問大家一個問題,咱們天天掛在嘴邊的小鼠腫瘤模型到底是怎么構建的呢?每種模型的特點是什么?最優秀的模型又屬哪一個?.....其實吧,要說模型佼佼者,當然是越能體現人類疾病的發生和發展就越好,畢竟,“堅持以人為本”才是我們的最終目的!但話說回來,每種模型都有其優劣,沒
常見小鼠腫瘤模型特點概述
【干貨】小鼠腫瘤模型那些事兒 嗨,小伙伴們晚上好啊!首先呢,小編想問大家一個問題,咱們天天掛在嘴邊的小鼠腫瘤模型到底是怎么構建的呢?每種模型的特點是什么?最優秀的模型又屬哪一個?.....其實吧,要說模型佼佼者,當然是越能體現人類疾病的發生和發展就越好,畢竟,“堅持以人為本”才是我們的
小鼠腦出血模型的建立
實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 戊巴比妥鈉儀器、耗材 鉆孔器注射器含抗凝血劑的試管鼠板縫合方針和線實驗步驟 1.固定小鼠?a.用繩子將已麻醉的小鼠俯臥(背朝上)固定在鼠板上,繩子用活結,這樣不易打滑。固定時要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線上。?b.用棉花將小鼠的頭微微墊高,這樣方便切開皮膚。
研究腦部機制的新型小鼠模型
美國猶他州立大學領銜的研究團隊培養出一種新型遺傳工程小鼠,該小鼠攜帶一個蛋白標記,在一定程度上改變了不同鈣水平的熒光應答,這就為研究星形膠質細胞和小神經膠質細胞提供了新的途徑。該研究成果于2014年8月14日發表在《神經元》(Neuron)雜志上。 炎癥是多發性硬化、阿爾茨海默病等神經性疾病共
德國成功開發人工肺癌實驗模型
目前,肺癌的化療存在兩方面不確定因素,一方面現有藥物不是對于每個病人都同樣有效,另一方面制藥企業采用的藥物測試系統也并不是最理想的。動物模型是目前最好的藥物篩選手段,但75%在動物上有效的候選藥物在人體卻無效。德國弗勞恩霍夫界面和生物工程技術研究所成功開發了大小為1厘米x1厘米x0.5厘米,如
獼猴桃汁抑制小鼠肺癌發展
在所有癌癥中,肺癌是5年生存率最低的癌癥之一。臨床上確定的事實是,各種水果中的活性成分可最大限度地降低罹患癌癥等慢性疾病的風險。日本岡山大學研究人員使用小鼠模型證明,獼猴桃汁及其組分異槲皮素有助預防和抑制肺癌發展。研究結果近日發表在《基因與環境》上。 獼猴桃是多酚和維生素C最豐富的來源之一。此前
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
10)? 移卵操作完成后,撤回移卵管,去除器械,按原本位置將各器官重置于腹腔內。10)縫合切口,用小夾夾持皮膚。常用自動小夾代替縫線,這樣可以避免小鼠啃嘶縫線,切口裂開。11)若進行雙側手術,則于另一側子宮角重復上述操作。12)手術完成后,安置小鼠于清潔的籠中。麻醉狀態下,小型哺乳動物無法有效維持機
轉基因小鼠模型的建立(SOP)8
(1)? RNA的分離:根據實驗者的需要從轉基因小鼠組織或細胞中提取總RNA或mRNA。分離總RNA比較簡單,且適合做基因做基因轉錄分析。實驗操作參見第一章的第四節。(2)? Northern 印跡分析:該技術用于定性檢測轉基因動物組織或細胞中轉基因轉錄的相對水平。其實驗操作參見第一章的第九節。(3
轉基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之處](1)外源基因隨機整合;(2)個別原核不清晰,需進行特殊處理;(3)需大型精密儀器,費用昂貴;(4)操作周期相對較長。(二)實驗器材的準備1.輸精管切除術用器材:彎式有齒鑷、直式有齒鑷、顯微鑷、手術剪、自動小夾涂藥器、自動小夾、帶彎針4/0絲線及持針器、直徑為10cm塑料 Petri氏培
轉基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1)? 點燃酒精燈,調節火焰到最佳。捏持玻璃毛細吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋轉過火。2)? 當吸管開始變軟,快速撤離火焰,向外急劇扯拉使吸管變長,形成口徑大約200?l的吸管。注意制備過程中離開火焰的時間以及扯拉的力度,盡量保證制備吸管的一致性。3)? 為吸管評分,輕柔地折斷吸管,辨別
轉基因小鼠模型的建立(SOP)3
(2)受體母鼠的準備輸卵管轉移的受體鼠應該為4-6周齡大小,體重在20-25克左右,嚴禁用低體重以及超重母鼠,若體重較低,其體能不足以維持妊娠,可能導致受精卵的重新吸收;若體重較重,麻醉劑被吸收入脂肪組織,降低麻醉效果,可能使手術困難,而且脂肪組織的存在意味著靜脈的存在,所以手術時切掉脂肪組織可能導
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
4)? 如果未見DNA溶液流,則輕輕摩擦持樣器鈍緣,漸漸的打開注射器針頭。針頭重新進入油內確定DNA溶液流的存在。5)? 移動持卵管回到受精卵下部。通過微分驅動水壓控制系統使持卵管內產生溫和的負壓,并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必須確保受精卵基底部與凹玻片基底部輕輕接觸。注意不宜吸得過緊,否則會使
轉基因小鼠模型的建立(SOP)1
名稱:轉基因小鼠模型的建立(SOP)關鍵詞:轉基因小鼠目的:在動物體研究轉化基因原理:轉基因動物是指染色體基因組中整合有外源基因并能遺傳給后代的一類動物。整合到動物染色體基因組的外源基因稱為轉基因。轉基因技術則是指制備轉基因動物所需的一套技術,它涉及外源基因的構建、載體和受體的篩選、基因導人技術、供
轉基因小鼠模型的建立(SOP)4
(6)? 為保暖包裹小鼠于紗布中或將其放置于熱墊內使其蘇醒,處于麻醉狀態下的小鼠應該嚴格監護直到其完全蘇醒。手術后小鼠飼養2周后確定手術是否成功。(7) 實驗性飼養:將1-2只母鼠與輸精管切除小鼠合籠飼養,次晨進行陰道栓檢查。有陰道栓的母鼠,用磷酸緩沖液處理后24小時,其輸卵管潮紅。卵細胞應該處于單
用肝癌小鼠模型研究人類HCC,why?
近日,來自美國貝勒醫學院的研究人員在國際期刊nature communication發表一項最新研究成果,他們發現核外源性受體CAR與β catenin共同激活能夠誘導小鼠已分化肝臟細胞的增殖,導致細胞增殖失控,發生肝癌。這項研究成果證明了肝癌小鼠模型與人類HCC具有直接關系,因此利用肝癌小鼠模
轉基因小鼠模型的建立(SOP)5
4.顯微注射(1)導入DNA的制備:顯微注射首先涉及導入DNA的制備,顯微注射的轉入基因通常為去除載體序列的線狀DNA,轉基因所用載體是真核表達載體,即含有在哺乳動物細胞內表達的真核啟動子。所謂組織特異性的實現多是通過組織特異性啟動子來實現組織特異性表達的。制備轉基因小鼠,必須對待導入DNA進行分離
活體成像小鼠皮下瘤模型實驗步驟
Luciferin Preparation1.??? Prepare a stock solution of luciferin at 15mg/ml in DPBS. Filter sterilize through a 0.2 um filter.2.??? Prepare enough to
Micro-CT在肺癌小鼠研究上的應用
Micro CT在肺癌小鼠研究上的應用
復旦大學建成世界規模最大小鼠基因突變體庫
記者從日前在復旦大學舉行的“小鼠基因突變體與疾病模型的研究與應用”戰略研討會上獲悉,在“十一五”期間,復旦大學發育生物學研究所已建成世界上規模最大的小鼠基因突變體庫。 據介紹,該突變體庫包含5000余個基因的小鼠突變品系,覆蓋了近20%的小鼠基因組,其規模相當于過去20年來全球生物醫
最新RNAi技術可媲美轉基因小鼠模型
基因編輯技術一直都是生命科學的熱門研究領域,近來編輯領域出現了可與轉基因小鼠技術相媲美的新RNAi干擾技術,該技術由洛克菲勒大學的研究人員研制出,在全基因組水平上首次對小鼠進行RNAi篩查研究,并在數月內發現了導致表皮腫瘤生長的基因,研究成果發表在《自然》期刊上。 RNAi技術篩查致病基因
SARS小鼠模型的構建策略與應用進展
在全國疫情逐步清零時,北京的疫情卻出現了“反彈”,牽動著全國人民的心。截止6月18日24時,北京8天內已出現新增確診病例183例,還有一些主動篩查中發現的無癥狀攜帶病例。這無疑在告訴我們每一個人:疫情尚未結束,仍需加強防疫!?對于中國乃至整個世界來說,由新冠病毒(SARS-CoV-2) 引起的全
小鼠模型在轉化醫學研究中的應用
小鼠模型已經成為研究基因功能與致病機制、建立人相關疾病模型和評價研發藥物安全性與有效性等生物醫藥研究不可取代的模式動物。轉化醫學研究就是針對來自臨床患者實際問題,通過實驗室包括分子、細胞及模式動物的相關基礎及臨床前研究,最終實現解決臨床所面臨的已知與未知的難題。所以,轉化醫學研究解決問題的思路與策略
小鼠模型不能很好模擬人類炎癥疾病
數十年以來,在進行人體試驗之前,實驗小鼠模型一直被用于確認和測試候選藥物,但是一項研究發現這些模型不能準確地代表人類對炎癥疾病的響應。 Junhee Seok及其同事研究了創傷、燒傷和來自例如大腸桿菌等細菌的毒素是如何影響病人的遺傳應答的。這組作者將觀察到的模式與在小鼠模型中觀察到的模
昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立實驗
昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立可以:(1)建立一個能真實模擬臨床胃癌的理想動物模型;(2)深人研究胃癌的轉移機制和尋找新的治療方法;(3)為人胃癌轉移機理與抗轉移治療提供一個有價值的工具。皮下移植塊原位移植法實驗方法原理采用兩種不同的腫瘤細胞株分別在昆明小鼠胃部原位建立胃癌模型。造模后對原位移植瘤的
PNAS:小鼠模型需慎用,基因表達差異大
PNAS:小鼠模型需慎用,基因表達差異大 小鼠被廣泛用于模擬人類代謝、疾病和藥物應答,是醫學研究中的一個基本工具。然而斯坦福大學的研究團隊指出,人類和小鼠的基因表達存在著驚人的差異,不論是蛋白編碼基因還是非編碼基因。這項研究發表在十一月十七日的美國國家科學院院刊PNAS雜志上。 Mic