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  • 植物DNA提取實驗——機械法

    植物DNA提取實驗用于:(1)獲得較純的真核細胞基因組DNA;(2)后續PCR分析,RFLP分析,基因文庫的構建,基因探測等的研究。實驗方法原理這是一種快速簡便提取植物總DNA的方法。先將新鮮的葉片在液氮中研磨,以機械力破碎細胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化銨分離緩沖液,使細胞膜破裂。同時將核酸與植物多糖等雜質分開(十六烷三甲基溴化銨,簡稱CTAB,是一種陽離子去污劑),再經氯仿-異戊醇抽提去除蛋白,即可得到適合于酶切的DNA。實驗材料幼嫩的植物材料試劑、試劑盒液氮CTAB抽提緩沖液NaACTris-HCl EDTA氯仿異戊醇TE buffer儀器、耗材瓷研缽離心管離心機實驗步驟一、實驗試劑及材料 1. 材料:幼嫩的植物材料0.5g左右。 2. 試劑:液氮,CTAB抽提緩沖液:2%CTAB(cetyl trimethyl ammonium bromide, 十六烷基三甲基溴化銨......閱讀全文

    植物DNA提取實驗

    機械法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這是一種快速簡便提取植物總DNA的方法。先將新鮮的葉片在液氮中研磨,以機械力破碎細胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化銨分離緩沖液,使細胞膜破

    植物DNA提取原理

    通常采用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞,由于植物細胞勻漿含有多種酶類(尤其是氧化酶類)對DNA的抽提產生不利的影響,在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨,材料易于破碎,并減少研磨過程中各種酶類的作用。十二烷基肌酸鈉(sarkosyl)、十六烷基三

    植物DNA提取實驗

    實驗方法原理?真核細胞基因組在提取過程中一般有以下幾步,首先是機械法破細胞抽提;然后去除蛋白質,糖類等細胞內雜質污染;最后純化出DNA。實驗材料?幼嫩的植物材料試劑、試劑盒?液氮CTAB抽提緩沖液NaACTris-HCl EDTA氯仿異戊醇TE buffer儀器、耗材?瓷研缽離心管離心機實驗步驟 一

    植物DNA提取中怎樣檢測提取到DNA質量

    第一種方法是測量260/280的比例,判斷是否有蛋白質的污染。在260nm和280nm處測定DNA溶液的光吸收,A260與A280之比應在1.75-1.80之間。低于此值表明制備物中殘留蛋白質成分較高或含有酚,高于此值表明有RNA的殘留。第二種方法是凝膠電泳分析,看有無斷裂降解。影響DNA提取質量的

    植物DNA提取實驗——機械法

    植物DNA提取實驗用于:(1)獲得較純的真核細胞基因組DNA;(2)后續PCR分析,RFLP分析,基因文庫的構建,基因探測等的研究。實驗方法原理這是一種快速簡便提取植物總DNA的方法。先將新鮮的葉片在液氮中研磨,以機械力破碎細胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化銨分離緩沖液,使細胞膜破裂。同時將核酸與植物

    植物細胞線粒體DNA的提取

    實驗方法原理分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。在

    CTAB法提取植物總DNA

    實驗概要CTAB法是一種快速簡便的提取植物總DNA的方法,通過實驗掌握CTAB法從植物葉片提取DNA的原理和方法。?實驗原理CTAB ?(hexadecyltrimethylammonium ?bromide,十六烷基三甲基溴化銨),是一種陽離子去污劑,具有從低離子強度溶液中沉淀核酸與酸性多聚糖的特

    植物細胞線粒體DNA的提取

    實驗方法原理?分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。

    植物總DNA提取方法和過程

    植物總DNA提取植物總 DNA 的提取有多種方法,轉基因食品檢測中不同用途的 DNA 提取應該采用各自適宜的方法進行。下面介紹用于新鮮或干燥的植物性食品檢測的常見 DNA 提取方法。1、可用于 PCR 的粗提液微量制備1)原理與特點利用攪拌破碎食品組織,堿液破壞細胞壁然后再用緩沖液進行提取。此法主要

    植物組織中DNA的提取與測定

    一、原理 脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是一切生物細胞的重要組成成分,主要存在于細胞核中,鹽溶法是提取DNA的常規技術之一。從細胞中分離得到的DNA是與蛋白質結合的DNA,其中還含有大量RNA,即核糖核蛋白。如何有效地將這兩種核蛋白分開是技術的關鍵。D

    SDS法提取植物基因組DNA

    本方法由Dellaporta,Wood和Hicks(1983)的方法修改而成。其基本原理是研磨的組織細胞用熱的SDS裂解后,加入高濃度的KAc,0℃放置以除去蛋白和多糖類雜質,最后用乙醇或異丙醇沉淀。一 材料、試劑和儀器1 材料 新鮮的組織材料或-80℃凍存的材料2 試劑(1)提取緩沖液Tris-H

    粗提取植物DNA的實驗步驟和原理

    提取植物DNA常用的方法是CTAB法。原理:CTAB是一種陽離子去污劑,具有從低離子強度溶液中沉淀核酸與酸性多聚糖的特性。在高離子強度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB與蛋白質和多聚糖形成復合物,只是不能沉淀核酸。通過有機溶劑抽提,去除蛋白,多糖,酚類等雜質后加入乙醇沉淀即可使核酸分

    利用CTAB法提取植物基因組DNA

    一、實驗原理 CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)是一種去污劑,可溶解細胞膜并能與核酸形成復合物,該復合物在高離子強度(0.7mol/L)的溶液里是可溶的,通過離心可將復合物同蛋白質、多糖類物質分開。在酚仿變性的條件下,去除殘留的CTAB和蛋白質等雜質,然后利用異戊醇或無水乙醇將DNA分

    植物和動物DNA提取方法有何不同

    后面的步驟都一樣,就是前處理所用的方法和試劑不太一樣,植物需用機械或酶去壁,動物需用胰蛋白酶去膜。當然這里的動物DNA提取指的是動物組織DNA的提取,如果用動物血就要簡單的多了。所謂前處理,指的就是裂解的過程,讓細胞破碎,使DNA跑出來,然后對DNA進行收集。

    一種簡單實用的提取植物DNA實驗

    實驗方法原理的提取是植物分子生物學和基因工程研究的一種基本的技術,至今已有了數種方法。此方法最大的特點是:將SDS同時用作細胞膜的去污劑和蛋白質的變性劑,變性的蛋白質通過離心而不是酚抽提除去,使得整個操作過程變得簡單快捷,比較溫和,1小時左右就可以獲得純化的植物DNA。用這種方法得到的DNA能直接被

    植物DNA的提取與定量分析實驗

    實驗方法原理幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段,細胞核較大而細胞質較少,核酸濃度高,且內含物少,次生代謝產物少,蛋白質及多糖類物質相對較少,在SDS或CTAB物質存在時,經機械研磨,使細胞破裂釋放出內含物,提取的DNA、RNA的產量高,純度好。提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活D

    植物葉片樣品(水稻、黃瓜、苜蓿等)研磨提取-DNA

    實驗樣品:新鮮植物葉片(水稻、黃瓜、苜蓿等)實驗儀器:鼎昊源TL2010S中通量組織研磨儀TL2010S 中通量組織研磨儀,可編程,操作簡單,適用各種樣品,避免交叉污染,提高實驗數據重復性。 配合獨有的冷凍操作配件,方便組織核酸提取。 同樣的研磨效果省時、省力將您從繁雜手工研磨中解脫出來,100 多

    一種簡單實用的提取植物DNA實驗

    實驗方法原理的提取是植物分子生物學和基因工程研究的一種基本的技術,至今已有了數種方法。此方法最大的特點是:將SDS同時用作細胞膜的去污劑和蛋白質的變性劑,變性的蛋白質通過離心而不是酚抽提除去,使得整個操作過程變得簡單快捷,比較溫和,1小時左右就可以獲得純化的植物DNA。用這種方法得到的DNA能直接被

    一種簡單實用的提取植物DNA實驗

    實驗方法原理 的提取是植物分子生物學和基因工程研究的一種基本的技術,至今已有了數種方法。此方法最大的特點是:將SDS同時用作細胞膜的去污劑和蛋白質的變性劑,變性的蛋白質通過離心而不是酚抽提除去,使得整個操作過程變得簡單快捷,比較溫和,1小時左右就可以獲得純化的植物DNA。用這種方法得到的DNA能直接

    使用離心機提取植物基因組DNA

    植物基因組DNA提取使用什么樣的離心機做?具體步驟怎么樣?植物組織提取基因組DNA 一、材料 幼嫩葉子。 二、設備 移液器,冷凍高速離心機,臺式高速離心機,水浴鍋,陶瓷研缽,50ml離心管(有蓋)及5ml和1.5ml離心管,彎成鉤狀的小玻棒。(這時選擇設備的時候注意選擇那種通用性強的,可以一機配多種

    植物DNA的提取與定量分析實驗

    實驗方法原理幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段,細胞核較大而細胞質較少,核酸濃度高,且內含物少,次生代謝產物少,蛋白質及多糖類物質相對較少,在SDS或CTAB物質存在時,經機械研磨,使細胞破裂釋放出內含物,提取的DNA、RNA的產量高,純度好。提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活D

    植物DNA的提取與定量分析實驗

    實驗方法原理?幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段,細胞核較大而細胞質較少,核酸濃度高,且內含物少,次生代謝產物少,蛋白質及多糖類物質相對較少,在SDS或CTAB物質存在時,經機械研磨,使細胞破裂釋放出內含物,提取的DNA、RNA的產量高,純度好。提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活

    植物DNA的提取及凝膠電泳分析

    實驗概要利用基因組DNA較長的特性,可以將其余細胞器或質粒等小分子DNA分離。當加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團漂浮其中,可用玻璃棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部,從而達到分離提取的目的。分離基因組DNA應盡量在溫和的條件下操作。瓊脂糖或聚

    植物基因組DNA及總RNA提取技術2

    (二)植物總RNA提取?(1)65°C水浴中預熱15 mL CTAB提取液。?(2)液氮中研磨2~3 g新鮮或-70°C冷凍的材料。?(3)轉移樣品至有CTAB提取液的離心管中,立即激烈渦旋30s,短時放回 65°C水浴中(4~5 min)。?(4)加入等體積的氯仿/異戊醇并渦旋混合,10000 r

    如何使用離心機提取植物基因組DNA

    ?? 如何使用離心機提取植物基因組DNA植物基因組DNA提取使用什么樣的離心機做?具體步驟怎么樣?植物組織提取基因組DNA?一、材料www.runwelltac.com?幼嫩葉子。?二、設備?移液器,冷凍高速離心機,臺式高速離心機,水浴鍋,陶瓷研缽,50ml離心管(有蓋)及5ml和1.5ml離心管,

    如何使用離心機提取植物基因組DNA

    就那植物來說吧!原理是一致的.方法不同. 1植物組織提取基因組DNA 一、材料 幼嫩葉子. 二、設備 移液器,冷凍高速離心機,臺式高速離心機,水浴鍋,陶瓷研缽,50ml離心管(有蓋)及5ml和1.5ml離心管,彎成鉤狀的小玻棒. 三、試劑 1、提取緩沖液Ⅰ:100mmol/L Tris·Cl,pH8

    植物總DNA提取過程中應該注意哪些問題

    取樣的材料最要是新鮮的,而且取嫩葉,如果取老葉的話,含有較多的多糖和酚類物質等雜質,這樣加大了純化的難度。磨樣時最好是加液氮,磨樣速度要快。一般用酚和氯仿抽提兩次,吸取上清時,一定要小心,不要把白色物質吸入。抽提時不要有太力振動,操作也要仔細,盡量避免DNA斷裂。

    使用Minilys均質器從植物葉子中提取DNA

    簡介Minilys與Precellys 24均是集研磨、裂解、均質為一體的多功能均質器。專門用來提取各種各樣生物樣本的DNA、RNA或蛋白質。其工作原理是通過三維高速振動和輔助研磨珠(玻璃珠、陶瓷珠、鋼珠等)的敲打,達到對樣品進行研磨、裂解、均質的目的。Minilys小巧、簡潔,屬于個人型均質器,而

    植物基因組DNA及總RNA提取技術1

    幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段,核較大而胞質較少,核酸濃度高,且內含物少、次生代謝產物少,蛋白質及多糖類物質相對較少,在SDS或 CTAB物質存在時,經機械研磨,使細胞破裂并釋放出內含物,提取的DNA、RNA的產量高,純度好。?提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活DNase。R

    植物組織類樣本DNA提取完整解操作方法

    植物DNA的提取和純化是植物基因工程研究的基礎操作。實施分子標記、基因圖譜、基因指紋圖譜、基因文庫構建、遺傳多態性分析、DNA重組、RAPD(隨機引物多態性DNA)、RFLP(限制性酶多態性)、基因分離及遺傳轉化和鑒定等都以提取DNA為前提。目前,對從植物組織中提取DNA方法的要求是:簡便、有效、快

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