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    植物總DNA提取方法和過程

    植物總DNA提取植物總 DNA 的提取有多種方法,轉基因食品檢測中不同用途的 DNA 提取應該采用各自適宜的方法進行。下面介紹用于新鮮或干燥的植物性食品檢測的常見 DNA 提取方法。1、可用于 PCR 的粗提液微量制備1)原理與特點利用攪拌破碎食品組織,堿液破壞細胞壁然后再用緩沖液進行提取。此法主要用于用 PCR大量快速檢測轉基因材料。2)試劑 0.5mol/L NaOH, 100mmol/L Tris(pH8.0)。3)方法(1)稱取5~10mg 檢測材料,置 Eppendorf 管中,加入5~100μL NaOH,用玻璃棒搗碎,靜置片刻。(2)取 5μL 上清液轉入另一個 Eppendorf 管中,加入 Tris 緩沖液至50~500μL,備用。2、SDS 法提取植物性食品中的 DNA1)所用試劑提取緩沖液:100mmol/L Tris·Cl( pH8.0);50mmol/L EDTA( pH8.0); 500mm......閱讀全文

    分子生物學常用實驗技術(page 2)

    一、RNA 制備   模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人

    DNA的不同提取方法及比較

    DNA的不同提取方法及比較傳統的DNA提取方法傳統的DNA 提取與純化,如 CTAB 法、SDS 法是在裂解細胞的基礎上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA 酶除去核酸中的RNA; 然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70

    ACS Nano:微針貼片技術用于農作物,加速植物病害檢測

      研究人員開發了一種新技術,使用微針貼片在一分鐘內從植物組織中收集DNA的方法,而傳統DNA提取技術需要至少數個小時。 DNA提取是鑒定植物病害的第一步,新方法有助于開發小型化以及可以用于現場即時檢測的植物病害診斷工具。  北卡羅萊納州立大學化學和生物分子工程系助理教授,同時也是文章的通訊作者魏青

    國外企業“妙招” 攻克長讀長測序技術中“DNA提取”的痛點?

      近年來,Pacific Biosciences、Oxford Nanopore Technologies、Bionano Genomics和10x Genomics等公司的長讀長測序和基因組圖譜技術越來越受歡迎。隨著相關技術的推廣應用,長讀長測序技術在快速、高效提取高質量高分子量DNA方面的痛點

    填補Qiagen空白的植物RNA提取試劑盒

    填補Qiagen空白、不用DNA酶消化的植物RNA提取試劑盒 一般公司多糖多酚植物RNA提取試劑盒失敗原因和解決方案 很多植物RNA的樣品由于含有大量的多糖、多酚、代謝產物、色素等成分,造成RNA提取過程中氧化、褐化、降解、由于植物品種的多樣性造成情況更加復雜。手工的CTAB類的

    植物組織提取高質量的DNA五大方法詳解(一)

         蛋白質純化是旨在從細胞,組織或整個生物體中分離出一種或幾種蛋白質。蛋白質純化對于表征目的蛋白質的功能,結構和相互作用至關重要。蛋白質分離與提取是生命科學研究基礎中的基礎。植物細胞由于存在細胞壁的結構,因此比動物細胞蛋白的提取相對復雜。  

    一種無酚/無氯仿組織研磨從熱帶木本植物中提...(二)

    三、結果1、無苯酚/氯仿的CTAB / PVP / SDS-based RNA提取在下面介紹的第一批實驗中,我們開發并測試了一種使用40-60 mg牛油果、夏威夷果和芒果成熟葉片的冷凍葉組織提取RNA的方法。在發表的文獻中,用于困難樹種開發的大多數RNA提取方法,通過使用CTAB / PVP

    核酸提取與純化介紹

      核酸提取是分子生物學的基本組成部分,因高質量的核酸是分子生物學上的應用至關重要。  我們將會總結一些現用核酸提取技術和針對樣品類型選擇正確提取方法的小建議;也會提及評估核酸濃度和質量,以及核酸提取過程中的常見問題。  a. 為什么需要核酸提取?  核酸提取為大量廣泛研究和應用提供了答案(例如:克

    動物、植物、微生物中提取高質量的基因組DNA

      概 述   基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則

    幾種DNA提取方法的優缺點比較

      幾種DNA提取方法的優缺點比較   文章來源:洛陽吉恩特生物科技有限公司   自然界中無論是植物、動物還是病毒,DNA作為大部分生物的遺傳物質,在遺傳中起著不可替代的作用,為了研究生物的基因,就需要將DNA從細胞中提取出來,這個過程有很多方法可以實現,目前比較常用的有苯酚氯仿抽提法、離心柱法

    動物、植物、微生物中提取高質量的基因組DNA

      基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀

    植物基因組DNA及總RNA提取技術-1

    幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段,核較大而胞質較少,核酸濃度高,且內含物少、次生代謝產物少,蛋白質及多糖類物質相對較少,在SDS或 CTAB物質存在時,經機械研磨,使細胞破裂并釋放出內含物,提取的DNA、RNA的產量高,純度好。 提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活DN

    分子生物學常用實驗技術(八)

    第五章重組質粒的連接、轉化及篩選第一節概述  質粒具有穩定可靠和操作簡便的優點。如果要克隆較小的DNA 片段(<10kb)且結構簡單,質粒要比其它任何載體都要好。在質粒載體上進行克隆,從原理上說是很簡單的,先用限制性內切酶切割質粒DNA 和目的DNA 片段, 然后體外使兩者相連接, 再用所得

    分子生物學篇之基因組DNA純化

    2007年剛過,各種年終匯總琳瑯滿目,生物通也將于未來一個多月里大擺生物技術饕餮盛宴,為讀者帶來前沿技術和信息的思維享受和滿足--每日密集精選各廠家及經銷商過去一年在中國大陸地區著力推廣的重點產品文章或者上市的新產品新技術文章,將2007年當中生物通倍受矚目的產品和技術一一呈遞,打造精彩紛呈的生物技

    幾種DNA提取方法的優缺點比較

      文章來源:洛陽吉恩特生物科技有限公司   自然界中無論是植物、動物還是病毒,DNA作為大部分生物的遺傳物質,在遺傳中起著不可替代的作用,為了研究生物的基因,就需要將DNA從細胞中提取出來,這個過程有很多方法可以實現,目前比較常用的有苯酚氯仿抽提法、離心柱法和磁珠法,吉恩特實驗室就這三種提取方法

    幾種DNA提取方法的優缺點比較

    自然界中無論是植物、動物還是病毒,DNA作為大部分生物的遺傳物質,在遺傳中起著不可替代的作用,為了研究生物的基因,就需要將DNA從細胞中提取出來,這個過程有很多方法可以實現,目前比較常用的有苯酚氯仿抽提法、離心柱法和磁珠法,吉恩特實驗室就這三種提取方法進行了梳理和比較,總結出各方法的優缺點供廣大科研

    核酸提取的必備軍-小磁珠

      分子診斷是以核酸作為檢測對象,主要應用于臨床各科的診斷中,如腫瘤、感染、遺傳等各方面,而核酸提取是分子診斷實驗的“第一步”。近年來,磁珠已成為核酸提取過程中最常用的工具之一。   磁珠的概念和分類   根據不同的表面處理與標記,可將磁珠分成各種不同的應用類型:   TiO2磷酸化多肽富集磁

    動物、植物、微生物中提取高質量的基因組DNA(一)

    基因組DNA的提取概 述基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DN

    DNA提取液的配制

    一、實驗目的 1 明確提取液的配制原理 2 通過對提取液的配制,掌握提取液中各 試劑 在提取中的作用。二、實驗原理 DNA 是遺傳物質, 植物DNA 的提取是植物基因工程的基礎。通常要求所提取的DNA 要有理想的純度,足夠完整,無斷裂降解,提取過程盡量少使用有毒化學品等。為

    基因組DNA的提取

    基因組DNA的提取概 述   基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取

    基因組DNA的提取

    第一節 概 述DNA的提取通常用于構建文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中,可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部,

    植物組織類樣本DNA提取完整解操作方法

    植物DNA的提取和純化是植物基因工程研究的基礎操作。實施分子標記、基因圖譜、基因指紋圖譜、基因文庫構建、遺傳多態性分析、DNA重組、RAPD(隨機引物多態性DNA)、RFLP(限制性酶多態性)、基因分離及遺傳轉化和鑒定等都以提取DNA為前提。目前,對從植物組織中提取DNA方法的要求是:簡便、有效、快

    如何提取土壤中的高通量核酸?

    土壤是指地球表面的一層疏松的物質,由各種顆粒狀礦物質、有機物質、水分、空氣、微生物等組成,能生長植物。土壤微生物的數量很大,1克土壤中就含有4000~7000種近10億個細菌。1畝地耕層土壤中,微生物的重量能達到300-3000公斤。而其中90%以上的微生物都是無法直接培養的。因此,提取土壤中的微生

    水稻幼苗或其它禾木科植物提取

    實驗概要本實驗以水稻幼苗(禾本科)、李(蘋果)葉子為材料,學習基因組DNA提取的一般方法。實驗原理基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的

    從動物組織提取基因組DNA

    實驗概要本實驗以哺乳動物新鮮組織為材料,學習基因組DNA提取的一般方法。實驗原理基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀

    高通量組織gDNA提取實踐手冊

    Part 1 —— 前 言 | 組織gDNA提取和純化是分子生物學的基本實驗技術,其原理和操作絕大數生物學相關的研究人員都有接觸。困擾實驗人員的是當樣本量過大時,以1.5ml離心管為基本體系的組織核苷酸提取模式,同時操作20個以上的樣品有非常繁瑣的實驗過程和樣品間有錯亂

    實時熒光定量 PCR技術用于檢測插入的外源基因拷貝數

    自 1994 年,第一例轉基因植物產品 Flavr Savr TM 西紅柿在美國上市,到 2003 年底,世界范圍內轉基因作物已遍布 18 個國家和地區,種植面積達 167.2 萬英畝 (6770 萬公頃 )( Ewen SWB,1999; 北國網 ) 。大量實踐使得植物轉基因技術已有了

    如何確定轉基因拷貝數

    鑒定轉基因植物的第一步就是要確定被轉基因已經穩定的整合到了染色體上。第二步任務就是評估有多少個轉基因拷貝,以及每個轉基因的表達水平如何。一般經過上游表達載體的設計構建以及下游轉化體系的建立、轉化品系的篩選鑒定等一系列步驟后,即獲得 T 0 代轉基因植物。在轉化過程中,外源 DNA 隨機插入植物

    一種簡單實用的提取植物DNA實驗

    實驗方法原理 的提取是植物分子生物學和基因工程研究的一種基本的技術,至今已有了數種方法。此方法最大的特點是:將SDS同時用作細胞膜的去污劑和蛋白質的變性劑,變性的蛋白質通過離心而不是酚抽提除去,使得整個操作過程變得簡單快捷,比較溫和,1小時左右就可以獲得純化的植物DNA。用這種方法得到的DNA能直接

    土壤的分子生物學特性

    在我們的實驗室里,最難搞的樣品類型之一就是土壤。在開發提取土壤中微生物DNA、RNA的試劑盒和構思提取方法的過程中,我們需要收集記錄大量各種類型土壤的有機物含量、質地、pH以及采集地。這些因素與土壤微生物含量息息相關,同樣地也影響著提取DNA、RNA的得率。下文,我將介紹一些影響土壤DNA、RNA提

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