總RNA提取實驗——CsCl法
實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞 1. 室溫下用PBS冼滌細胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. 在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液，并使之遍布整個平皿。3. 用橡皮細胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的細胞裂解液。4. 用裝有20-G針頭的皮下注射器往返抽吸裂解物，并合并在一起。 二、用于懸浮培養細胞 1. 用JS-4，2轉子離心回收≤108細胞，重懸于相當于1/2原有體積的PBS，并再次離心回收細胞。 2. 往離心管中加入3.5 ml 異硫氰酸胍溶液。 3. 用裝有20-G針頭的6注射器將粘稠的細胞裂解液注返抽吸4次，并將其移至一個干凈的試管中。 4. 在經硅化并高壓過的13 mmx......閱讀全文
總RNA提取實驗——CsCl法
實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞?1. ?室溫下用PBS冼滌細胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. ?在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液，并使之遍布整個平皿。3. ?用橡皮細胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的
CsCl法從組織中提取RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 液氮 組織胍溶液 十二烷基肌氨酸鈉 CsCl 組織重懸液 ? 乙酸鈉 酚
CsCl法從組織中提取RNA
試劑、試劑盒 液氮 組織胍溶液 十二烷基肌氨酸鈉 CsCl 組織重懸液 乙酸鈉酚 氯仿 異戊醇 異戊醇 無水乙醇儀器、耗材 組織搗碎機 離心機實驗步驟 一 材料與設備1）液氮2）組織胍溶液：590.8 g 異硫氰酸胍溶于 400ulDEPC 處理的水中，加入 25 mmol/LTris-Cl(p
CsCl法從培養細胞中提取RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖溶液 硫氰酸胍溶液 CsCl TES 緩沖液 乙酸鈉緩沖液 無水乙醇 經
CsCl法從培養細胞中提取RNA
試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖溶液 硫氰酸胍溶液CsClTES 緩沖液 乙酸鈉緩沖液無水乙醇 經 DEFC 處理的水。儀器、耗材 離心機 注射器及20W針頭實驗步驟 一 材料與設備1) 磷酸鹽緩沖溶液 (PBS)2) 硫氰酸胍溶液：4mol/L 硫氰酸胍，0.lmmol/LTris-HClpH7.5，1%
2.1.6 CsCl法從組織中提取RNA
由于一些組織（如胰臟和睥臟）含有高濃度的內源性 RNA 酶，因此純化源于組織的 RNA 須更加小心。試劑、試劑盒液氮組織胍溶液十二烷基肌氨酸鈉CsCl組織重懸液乙酸鈉酚氯仿異戊醇異戊醇無水乙醇儀器、耗材組織搗碎機離心機實驗步驟一 材料與設備1）液氮2）組織胍溶液：590.8 g 異硫氰酸胍溶于 40
2.1.5 CsCl法從培養細胞中提取RNA
通過硫氰酸胍提取和氯化銫離心法制備 RNA，適于分離細胞質和細胞核難分開的細胞以及富含 RNase 的細胞中的 RNA。試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖溶液硫氰酸胍溶液CsClTES 緩沖液乙酸鈉緩沖液無水乙醇經 DEFC 處理的水。儀器、耗材離心機注射器及20W針頭實驗步驟一 材料與設備1) 磷酸鹽緩沖溶液
大量提取質粒DNA（CsCl 密度梯度離心法）
大量提取質粒DNA（CsCl 密度梯度離心法） 2010-7-7大量提取質粒DNA（CsCl 密度梯度離心法）李淵越1. 預約搖床、超速離心機。2. 配 TB 培養基（1L 錐形瓶中裝250 ml 培養液），并滅菌。質粒做好轉化，并涂板。3. 第一天早上，往 TB 中加入適量的Amp 或Kana。挑
中量提取質粒DNA（CsCl 密度梯度離心法）
中量提取質粒DNA（CsCl 密度梯度離心法） 2010‐07‐07李淵越1. 將菌液倒入裝有 50mL TB 的錐形瓶中，或從培養好的平板上挑取單克隆，錐形瓶置于37℃搖床350rpm 培養16-20h,至OD600 到10-12。（OD600 到40 為用TBS 培養基在我們的培養條件下所能達到
通過CsCl 等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
CsCl 等密度梯度離心用于制備最高純度的感染性 λ 噬菌體顆粒，它沒有任何細菌核酸的污染。從這種噬菌體顆粒中提取的 DNA 可用作 DNA 測序的模板、亞克隆至質粒載體和產生用于原位雜交的探針。這種方法第二個優點是，由它所獲得的噬菌體原種是高度濃縮的（大于 1011?cfu/ml)，在 4℃ 保存