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    酵母剪接體分析實驗

    前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。試劑、試劑盒Tris HCI 溶液EDTATE乙酸鈉SDSRNA 的勻漿緩沖液RNA 的溶解緩沖液Tris 堿Tris EDTA 平衡苯酚乙醇硅烷化溶液TPM8 緩沖液mRNAHEPES-KOHR 緩沖液上樣緩沖液去離子甲酰胺Northern 印跡雜交液儀器、耗材液氮離心機勻漿器旋轉真空濃縮儀試管離心管玻璃板聚四氟乙烯墊片梳子黃色膠帶電泳槽電源平頭毛細管吸頭濾紙實驗步驟一、材料與設備1. 從鼠組織中制備競爭性......閱讀全文

    施一公團隊破解結構生物學最大難題之一

    施一公  北京時間8月21日凌晨,著名的《科學》雜志在線發表了清華大學生命科學學院施一公教授研究組的兩篇具有里程碑意義的論文,宣布得到了高分辨率的剪接體三維結構和剪接體對前體信使RNA執行剪接的基本工作機理,從而將分子生物學的“中心法則”在分子機理的研究上大幅度向前推進。  “這項研究成果的意義很可

    年終盤點:2016年國內不容錯過的重磅生物研究

      時間總是過得很快,2016年馬上就要過去了,迎接我們的將是嶄新的2017年,2016年,我國有很多優秀科研機構的科學家們都做出了意義重大、影響深遠的研究成果,發表在國際頂級期刊上。本文中小編盤點了2016年我國科學家發表的一些重磅級研究,以饕讀者。   --結構生物學 --  1.清華大學 施一

    開年新篇!施一公團隊Science再發剪接體新成果

      2016年1月8日,清華大學生命學院施一公教授研究組在《科學》(Science)就剪接體的結構與機理研究再發長文(Research Article),題為《U4/U6.U5 三小核核糖核蛋白復合物3.8埃的結構:對剪接體組裝及催化的理解》(The 3.8 A Structure of the U

    中國學者發表6篇Nature,在生命科學領域取得重大進展

      iNature  2019年9月4日,中國學者在Nature連續發表了6項成果,涉及生命科學,天文學,地球科學等不同的領域,iNature系統介紹這些成果:  【1】混合譜系白血病(MLL)家族的甲基轉移酶  -包括MLL1,MLL2,MLL3,MLL4,SET1A和SET1B-在賴氨

    2015年度“中國高校十大科技進展”項目評選揭曉

      2015年12月15日,由教育部科學技術委員會組織評選的2015年度“中國高等學校十大科技進展”經過形式審查、學部初評、項目終審評選專項工作和項目公示等流程后在京揭曉。  “中國高等學校十大科技進展”的評選自1998年開展以來,至今已18屆,這項評選活動對提升高等學校科技的整體水平、增強高校的科

    酵母剪接體分析實驗

                實驗方法原理 前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和

    酵母前體mRNA剪接提取物實驗

                實驗方法原理 剪接反應的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組分,最常使用的是 HeLa 細胞的提取物。前體 mRNA 底物通常采用噬菌體

    酵母前體mRNA剪接提取物實驗

    真核生物前體 mRNA ( pre-mRNA ) 的剪接分為兩步,即先從前體切去內含子,然后將兩個外顯子連接在一起形成成熟的  mRNA。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理剪接反應的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組

    2016年度中國科學十大進展發布!

      鈷/氧化鈷雜化二維超薄結構電催化還原CO2為液體燃料01  1、研制出將二氧化碳高效清潔轉化為液體燃料的新型鈷基電催化劑  將二氧化碳在常溫常壓下電還原為碳氫燃料,是一種潛在的替代化石原料的清潔能源策略,并有助于降低二氧化碳排放對氣候造成的不利影響。實現二氧化碳電催化還原的關鍵瓶頸問題是將二氧化

    酵母前體mRNA剪接提取物實驗(二)

    (12) RNA 洗脫緩沖液:20 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.6),0.5 mol/L NaCl,10 mmol/L EDTA,2% ( V/V ) 苯酚(Tris EDTA 或 NaAc-EDTA 平衡),4°C 保存。(13) 7.5 moI/L 乙酸銨(NH4Ac):用 0

    中科院多項成果入選2016年中國科學十大進展

       2月20日,科學技術部基礎研究司與高技術研究發展中心聯合召開“2016年度中國科學十大進展解讀會”,發布了2016年度中國科學十大進展。中國科學院相關單位獨立或合作取得的7項重大科學成果入選,包括:研制出將二氧化碳高效清潔轉化為液體燃料的新型鈷基電催化劑;開創煤制烯烴新捷徑;揭示水稻產量性狀雜

    Cell雜志最受關注的五篇文章(4月)

      論文的通訊作者、BIDMC癌癥中心腫瘤學家、哈佛醫學院醫學副教授Gerburg Wulf說:“這項研究證實了PI3K作為一個主要的調控因子整合了癌細胞的結構和它的代謝。”糖分解與細胞結構是如何協調的?Wulf說,答案是一個驚人簡單的生物物理機制。  Wulf解釋道:“在正常細胞中,來自外部的信號

    施一公團隊85后清華女博士:4篇SCI論文 影響因子累積破百

      杭婧,清華大學醫學院2012級直博生,師從施一公教授,研究方向是剪接體領域的結構生物學研究。她共發表SCI論文4篇,以第一作者身份在《自然》上發表文章一篇,在《科學》上發表文章兩篇,影響因子累積破百。  2015年9月11日,兩篇闡釋生命大分子剪接體結構的文章以雜志當期封面的形式,“背靠背”發表

    兩院院士評選中國世界十大科技進展新聞揭曉

       由中國科學院、中國工程院主辦,中國科學院學部工作局、中國工程院辦公廳、中國科學報社承辦,中國科學院院士和中國工程院院士投票評選的2015年中國十大科技進展新聞、世界十大科技進展新聞,2016年1月19日在京揭曉。  此項年度評選活動至今已舉辦了22次。評選結果經新聞媒體廣泛報道后,在社會上產生

    研究揭示LARP7在生精細胞mRNA精準剪接和精子發生中的功能

      2月3日,國際學術期刊Molecular Cell 在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心/生物化學與細胞生物學研究所劉默芳研究組的最新研究成果“LARP7-Mediated U6 snRNA Modification Ensures Splicing Fidelity and Sperm

    酵母剪接體分析實驗(一)

    實驗方法原理 前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。試劑、試劑盒 Tris HCI 溶液EDTATE乙酸鈉SDSRNA 的勻漿緩沖液RNA 的溶解緩沖液T

    人線粒體tRNA牛磺酸修飾酶GTPBP3催化GTP水解

      近期,中國科學院分子細胞科學卓越創新中心(生物化學與細胞生物學研究所)研究員周小龍課題組和研究員王恩多課題組合作,在Nucleic Acids Research上,在線發表題為The human tRNA taurine modification enzyme GTPBP3 is an acti

    探索物質結構之透射電子顯微鏡

    眼睛是人類認識客觀世界的第一架“光學儀器”,但它的能力卻是有限的,通常認為人眼睛的分辨率為0.1 mm。17世紀初,光學顯微鏡(圖1)出現,可以把細小的物體放大到千倍以上,分辨率比人眼睛提高了500 倍以上,這也是人類認識物質世界的一次巨大突破。隨著科學技術的不斷發展,直接觀察到原子是人們一直以來的

    酵母雙雜交技術及其在蛋白質組研究中的應用

    作為后基因組時代出現的新興研究領域之一, 蛋白質組學(proteomics)正受到越來越多的關注。 蛋白質組學的研究目標是對機體或細胞的所有蛋白質進行鑒定和結構功能分析。 蛋白質組學的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白質分離技術如二維凝膠電泳和高效液相層析, 經典的蛋白質鑒定方法如氨

    2018前10月生物醫學風云榜 袁隆平 曹雪濤及施一公等上榜

      經過特殊的算法,我們得到了2018年前10個月中國生物醫學風云榜人物及最火爆的3個重大學術界事件,能夠上榜的風云人物/事件,都曾長時間占據過100多個公生物醫學公眾號的頭版頭條。  在此,我們精選了其中的3個事件及16位風云榜人物。我們對其進行了劃分,分別是:6星級的3個事件,分別位諾貝爾獎,國

    酵母雙雜交技術及其在蛋白質組研究中的應用

         作為后基因組時代出現的新興研究領域之一, 蛋白質組學(proteomics)正受到越來越多的關注。 蛋白質組學的研究目標是對機體或細胞的所有蛋白質進行鑒定和結構功能分析。 蛋白質組學的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白質分離技術如二維凝膠電泳和高效液相

    Cell雜志12月最受關注的八篇文章

      Cell創刊于1974年,現已成為世界自然科學研究領域最著名的期刊之一,并陸續發行了十幾種姊妹刊,在各自專業領域里均占據著舉足輕重的地位。Cell以發表具有重要意義的原創性科研報告為主,許多生命科學領域最重要的發現都發表在Cell上。本月《Cell》前十名下載論文為:  A Method for

    基因編輯進展梳理 Part II 基于CRISPR-Cas9的技術應用篇(下)

      上一期為大家介紹了過去一年里CRISPR技術在動物造模及單堿基技術方面取得的重大突破。本期繼續為大家從功能基因組篩選、細胞譜系示蹤及疾病診斷方面談談CRISPR-Cas系統的技術運用。   一、大規模基因功能的篩選   盡管測序和基因組編輯技術取得了重大進展,但是解析復雜的基因型-表型關系仍

    基因編輯進展梳理 Part II 基于CRISPR-Cas9的技術應用篇(下)

      上一期為大家介紹了過去一年里CRISPR技術在動物造模及單堿基技術方面取得的重大突破。本期繼續為大家從功能基因組篩選、細胞譜系示蹤及疾病診斷方面談談CRISPR-Cas系統的技術運用。   一、大規模基因功能的篩選   盡管測序和基因組編輯技術取得了重大進展,但是解析復雜的基

    外顯子捕獲與擴增

                實驗材料 大腸桿菌菌株 HB101 質粒 pSPL3 COS-7 細胞 載體 pBluescriptⅡ

    共12位學者入選這一重量級獎項名單公布

      近日,求是科技基金會官網公布了2020年度“求是杰出青年學者獎”獲獎名單,此次共有12位學者獲獎。  “求是杰出青年學者獎”是1995年在陳省身、楊振寧、周光召、李遠哲、簡悅威五位科學家顧問的一致倡議下設立的,專門獎助在中國內地從事基礎研究領域的優秀青年科研人員。  2013年,求是基金會啟動新

    酵母雙雜交技術及其在蛋白質組研究中的應用

    摘要  蛋白質組學是在后基因組時代出現的一個新興的研究領域, 它的主要任務是識別鑒定細胞、組織或機體的全部蛋白質, 并分析蛋白質的功能及其模式。 因此, 揭示蛋白質組中蛋白質間的相互作用關系也是蛋白質組學的重要內容之一。 酵母雙雜交技術是用來檢測蛋白質間是否相互作用的一

    酵母前體mRNA剪接提取物實驗(一)

    實驗方法原理 剪接反應的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組分,最常使用的是 HeLa 細胞的提取物。前體 mRNA 底物通常采用噬菌體聚合酶體外轉錄的方法來制備。實驗材料 tRNAUTPRNA 聚合酶試劑、試劑盒 YPTris-HCl ETDASD

    施一公院士Cell Res解析關鍵蛋白結構

      來自清華大學生科院的研究人員發表了題為“Crystal structure and biochemical analysis of the heptameric Lsm1-7 complex”的短訊文章,揭示了Lsm1-7復合物的結構新機制,相關成果公布在Cell Research雜志上。

    2019年中國學者86篇Cell,Nature及Science文章匯總

      2019年上半年很快就結束了,iNature盤點了中國學者在Cell,Nature及Science發表的成果,我們發現總共有86篇(截至2019年6月24日),具體介紹如下:  4-6月發表的文章  【1】2019年6月21日,西北工業大學王文,中科院昆明動物研究所/BGI 張國捷及丹麥哥本哈根

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