親和層析實驗：常規方法
實驗步驟一、親和介質的選擇親和純化的成功取決于是否選擇了合適的固相載體和配基。理想的親和介質 (如吸附配基的固相載體)應該具備孔隙大、理化性質高度穩定的特征。親和介質可以選擇性的捕獲相應耙標，既保證較弱的非特異性吸附，又可以在整個過程中維持良好的流動特征。優選介質應具備便宜、易獲取和使用簡便的特點。親和介質可以是商品化的, 或通過適當的化學作用將配基吸附在固相載體上(詳見本章第4節)。下文將詳細討論如何選擇合適的親和介質（GEHealthcare,2007;GustavssonandLarsson，2006;Zachariou，2007), 并對一些需要重點考慮的因素進行總結。1.固相載體材料的基本特征介質顆粒及孔隙應大小一致，且具有良好的流動性能。介質的表面積與孔隙呈負相關，這直接影響固定化配基數量，繼而影響載量。孔隙與排阻限制相關，即一定尺寸范圍或大小(分子質量)的蛋白質不能進入孔隙。大孔不受排阻限制作用的影響，允許大分子無......閱讀全文
親和層析原理及分析方法
親和層析的原理與眾所周知的抗原一抗體、激素一受體和酶一底物等特異性反應的機理相類似，每對反應物之間都有一定的親和力。正如在酶與底物的反應中，特異的廢物(S')才能和一定的酶(E)結合，產生復合物(E－S')一樣。在親和層析中是特異的配體才能和一定的生命大分子之間具有親和力，并產生
實驗室機械破碎樣品的常規方法和設備
組織高速勻漿儀 通常破碎體積大的植物或者動物組織需要用可旋轉、帶有刀片的勻漿儀或者攪拌器 .這些儀器通常通過一個電動的馬達帶動不銹鋼可旋轉切割刀片,可以從頂部或者底部啟動,這個過程中產生很少熱量,但是樣品需要置于冰上。勻漿儀的轉速和刀片的尺寸,需要根據樣品的體積和組織大小來確定。大部分勻漿儀產
溶解受體的凝集素親和層析實驗
溶解受體的凝集素親和層析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 麥胚凝集素（WGA)-瓊脂糖 溶解的胰島素受體
核酸親和層析法純化蛋白質實驗
步驟一 偶聯寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步驟二 核酸親和層析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4
溶解受體的凝集素親和層析實驗
本實驗介紹關于溶解受體的凝集素親和層析過程。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒麥胚凝集素（WGA)-瓊脂糖溶解的胰島素受體牛血清白蛋白[125I] 胰島素（受體級）豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E結合緩沖液儀器、耗材一次性小型塑料柱實驗步驟材料與設
親和層析法去除交叉反應性抗體實驗
試劑、試劑盒 緩沖液和溶液細胞裂解緩沖液NaOHTris-緩沖鹽溶液TBSTriton X-100 溶菌酶胰 DNA 酶 I制備用于文庫篩選的抗體大腸桿菌培養液儀器、耗材 離心和轉子親和層析柱溴化氫活化的 Sepharose 4B實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液，緩沖液和試劑的組分請見附錄 12將貯
親和層析法去除交叉反應性抗體實驗
本節介紹一種利用結合細菌蛋白質的基質去除粗制免疫球蛋白中與細菌編碼蛋白質發生反應成分的方法（de Wet et al.1984)。該方法也適用于利用培養的細胞或組織抽提物去除交叉反應抗體。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒緩沖液和
核酸親和層析法純化蛋白質實驗
實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通過它們本身的堿基實現的。從理論上講，該方法也許干擾最佳結合序列的接近路徑，但是這樣一個簡單的方法一直被廣泛地成功應用。偶聯效率的定量檢測可經 A260 值測定評估，或者更精確地從偶聯介質上水解核酸和進行磷酸鹽測定。實
溶解受體的凝集素親和層析實驗
試劑、試劑盒 麥胚凝集素（WGA)-瓊脂糖溶解的胰島素受體牛血清白蛋白[125I] 胰島素（受體級）豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E結合緩沖液儀器、耗材 一次性小型塑料柱實驗步驟 材料與設備麥胚凝集素（WGA)-瓊脂糖（~2.5 ml 沉積的微球）（Vector Laborat
親和層析法去除交叉反應性抗體實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 細胞裂解緩沖液 NaOH Tris-緩沖鹽溶液 TBS Triton X-100 溶菌酶
親和層析法制備溶菌酶的方法介紹
親和層析法是利用蛋白質和酶的生物學特異性，即蛋白質或酶與其配體之間所具有的專一性親和力而設計的色譜技術。酶一底物復合物形成之后，在一定的條件下分離復合物便得到純凈的酶。常常使用的吸附劑為幾丁質及其衍生物，如：幾丁質粉、羧甲基幾丁質、幾丁質包埋纖維素、脫氨幾丁質粉、N-酰化殼聚糖、脫氨再生幾丁質凝
細胞親和層析的技術方法和步驟
DNA親和層析是利用親和層析的原理與技術分離能與特定DNA序列相互作用的技術方法。總的過程包括兩步，即：一、將某一類細胞中所有的蛋白質過含有該類細胞各種片段的DNA層析柱，用低濃度鹽溶液洗去不與DNA作用的絕大多數蛋白，用中濃度鹽溶液洗脫大部分與能DNA相互作用的蛋白。二、將第一步得到的能與DNA相
常規實驗儀器有哪些？
常規實驗儀器1、干燥箱2、電爐3、低溫冰箱/保存箱4、搖床（振蕩器）5、滅菌器6、恒溫水浴/油浴7、超凈工作臺8、培養箱
常規實驗儀器有哪些？
常規實驗儀器1、干燥箱2、電爐3、低溫冰箱/保存箱4、搖床（振蕩器）5、滅菌器6、恒溫水浴/油浴7、超凈工作臺8、培養箱
常規實驗儀器有哪些？
常規實驗儀器1、干燥箱2、電爐3、低溫冰箱/保存箱4、搖床（振蕩器）5、滅菌器6、恒溫水浴/油浴7、超凈工作臺8、培養箱
核酸親和層析法純化蛋白質實驗1
核酸親和柱的應用極大地促進了核酸結合調節蛋白特性的研究，這些蛋白質涉及基因表達、染色體修復和復制、基因重組等的調控。核酸結合蛋白可以結合單鏈 DNA、雙鏈 DNA 或 RNA。DNA 結合蛋白結合 DNA 可以是序列特異的，也可以是非特異的。此外，含有特異寡核苷酸的親和樹脂能用于某些酶的分離，這些酶
谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗
pGEX 載體表達的外源蛋白與谷胱甘肽 S 轉移酶融合，因此可以通過谷胱甘肽-瓊脂糖親和層析進行純化。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒二硫蘇糖醇谷胱甘肽洗脫緩沖液磷酸緩沖鈉鹽溶液Tri
谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞 試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇 谷胱甘肽洗脫緩沖液 磷酸
谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗
實驗材料 表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇谷胱甘肽洗脫緩沖液磷酸緩沖鈉鹽溶液TritonX-100DNase溶菌酶RNase凝血酶、腸激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材 SorvallSS-34 轉頭或相當的轉頭谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂皮下注射針頭實驗步驟
核酸親和層析法純化蛋白質實驗2
核酸親和層析實驗材料樣品蛋白質試劑、試劑盒平衡緩沖液（Tris-HClKClEDTA）非特異 DNA實驗步驟在上樣品液到核酸親和柱之前，建議首先采用其他的純化方法，如硫酸銨沉淀、離子交換或凝膠過濾層析等富集目的蛋白。這樣可以除去絕大多數的污染物，并減少非特異結合。親和層析柱一般來講是短而粗的，例如長
常規細胞培養方法
原理?1? 將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。???儀器、材料及試劑?儀器：培養箱（調整至37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗
細胞培養常規方法
. 凍存細胞的復蘇應遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調至37-37。5度，取出凍存的細胞迅速放入后將細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化。在無菌臺內將完全培養基加入50ml的小培養瓶內，約5ml左右，然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞，置培養并內輕輕搖晃，使細胞均勻后置培養箱內培養。2. 傳代:對于貼壁細胞
PCR產物常規純化方法
大批量、廉價、用于測序的PCR產物純化方法--PEG沉淀?最近，摸索了一下PEG沉淀PCR產物的方法，貼出來，與大家共享。?目的：探索一種方法，能將PCR產物大批量地、廉價地、純度比較高地純化出來，并且最好能去掉200bp以下的小片段DNA，用于DNA測序。?有文獻和方法說，不同濃度的PEG能沉淀不
快速檢測常規采樣方法
（1）散裝食品①液體、半液體食品采樣? 以一池或一缸為一采樣單位，即每一池或一缸采一份樣本，采樣前先檢查樣本的感官性狀，然后將樣本攪拌均勻后采樣。如果池或缸太大，攪拌均勻有困難，可按池或缸的高度等距離分為上、中、下三層，在各層的四角和中間各取等量樣本混合后，再取檢驗所需樣本。對流動的液體樣本，可定時
常規紅外樣品制備方法
一、固體試樣：常用的方法有壓片法、石蠟糊法和薄膜法。 （1）壓片法： 一般紅外測定用的錠片為直徑13 mm、厚度約1 mm左右的小片。取樣品（約1 mg）與干燥的KBr（約200 mg）在瑪瑙研缽中混和均勻，充分研磨后（使顆粒達到約2 μm），將混合物均勻地放入固體壓片模具的頂模和底模之
厭氧菌的常規培養方法
厭氧菌培養是可以生長在沒有氧氣條件下的生物，有些厭氧菌可以在有氧氣條件下生產，屬于兼性厭氧；有些甚至不能容忍微量氧氣的環境；屬于專性厭氧。厭氧菌是非常普通的；很多都是人體正常菌群的一部分，厭氧微生物轉地球生物群的50%；在醫療系統感染中厭氧菌的檢出率至少在65%以上。厭氧菌屬于人體內主要的正常
實驗室常規離心機的使用及維護保養方法
A、操作方法：1、打開門蓋，裝好轉子及試管，離心管中的加試容量不大于zui大容量的90%，對稱放置于轉子體中，關上門蓋，接通電源開關。2、設定所需離心試樣的轉速、時間等。3、按下啟動開關，整機即運行。（如中途需停機請按下停機鍵），機器運行至設定時間將自動斷電停機，此時，蜂鳴器響，等轉子停穩后方可打開
實驗室常規檢驗用水規范
1.規范性引用文件：GBT 6682-2008?分析實驗室用水規格和試驗方法??????2.常規檢驗用水應符合GBT 6682-2008中三級水標準PH范圍（25℃）：5.0～7.5? 電導率（25℃）（mS/m）：≤0.50? 可氧化物質含量(以O計)/(mg/L)：≤0.4?? 蒸發殘渣（105
實驗室常規檢驗用水規范
常規檢驗用水規范1.規范性引用文件：GBT 6682-2008?分析實驗室用水規格和試驗方法??????2.常規檢驗用水應符合GBT 6682-2008中三級水標準PH范圍（25℃）：5.0～7.5? 電導率（25℃）（mS/m）：≤0.50? 可氧化物質含量(以O計)/(mg/L)：≤0.4??
凝集素親和層析法純化蛋白質實驗
實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如，刀豆素 A（Con A）與糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖結合，而麥芽凝集素只與具 N-乙酰葡糖胺的蛋白質結合。胞膜糖蛋白常與麥芽凝集素結合，而可溶性糖蛋白卻通常用 Con A 或扁豆凝集素親和柱純化。由于在許多情