蛋白質染色實驗——銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒脫色液戊二醛硝酸銀洗印顯影液儀器、耗材培養箱搖床實驗步驟1. 將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以5倍體積的固定液覆蓋，在旋轉搖床中緩慢搖動30 min 以上。 2. 傾去固定液，加5倍凝膠體積的脫色液，緩慢搖動60 min 以上。 3. 傾去脫色液，加5倍凝膠體積的10%戊二醛，在通風櫥中緩慢搖動30 min。 4. 傾去戊二醛溶液，用水洗凝膠4次以上，每次30 min 以上，最后一次洗滌以過夜為佳。緩慢搖動。 5. 傾去水，將凝膠置于約5倍凝膠體積的硝酸銀溶液中平衡（完全蓋沒凝膠），劇烈振蕩 15 min。 6. 將凝膠移至另一塑料盒，用去離子水洗5次，每次精確5 min，緩慢搖動。7. 用500 ml 水稀釋25 ml 顯影液，將凝膠移至另一塑料盒，加入足夠的稀釋顯影液......閱讀全文
tunnel－的凋亡染色－需要染核嗎
tunnel 的凋亡染色并不是專門去染細胞核，但它可以使細胞核著色。TUNEL全名為terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling漢語為：脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法。原理：細胞凋亡中, 染色體DNA
tunnel－的凋亡染色－需要染核嗎
tunnel 的凋亡染色并不是專門去染細胞核，但它可以使細胞核著色。TUNEL全名為terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling漢語為：脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法。原理：細胞凋亡中, 染色體DNA
關于DNA測序技術的測序凝膠的銀染介紹
染色過程要求凝膠浸在塑料盤中。因而至少使用兩個盤子，大小與玻璃板類似。在盤中加入新鮮溶液之前須用高質量的水洗滌盤子。 1.電泳完畢后用一個塑料片子小心地分開兩板，凝膠應該牢固地附著在短玻璃板上。 2. 固定凝膠：將凝膠(連玻璃板)放入塑料盤，用固定/停止溶液浸沒,充分振蕩20分鐘或直至樣品中
蛋白質凝膠染色法實驗3
糖蛋白的檢測1. 通用糖蛋白檢測糖 基 化 是 真 核 細 胞 中 最 常 見 的 蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 。寡 糖 通 常 連 接 于 天 冬 酰 胺 側 鏈(iV-連 接 糖 基 化 ) 或 絲 氨 酸 和 蘇 氨 酸 羥 基 側 鏈 (〇 連 接 糖 基 化）。凝 膠 中 蛋 白 質
蛋白質凝膠染色法實驗2
2. 總蛋白質熒光法染色熒光染色法結合了檢測靈敏度 (可與銀染法媲美) 與染色流程簡便性 (與考馬斯亮藍染 色 或 Z n?2+?反染法相同），且其線性定量范圍較比色法大 10?100 倍 。檢測依賴于儀器,需要一個單色激發光源、能將波長較長的發射光從波長較短 (也更亮）的激發光中分離出來的選擇性光
蛋白質凝膠染色法實驗（四）
(3) 用 10% 〇 //V ) 甲醇、7 % ( V /V ) 乙酸進行簡單的凝膠脫色。利用基于微波爐的方案可以加快染色過程的進行。 SYPRO R uby 蛋白質凝膠染料具有相對較高的消光系數和量子產率，因此它十分亮眼, 化學穩定性和光穩定性都很高。光譜的激發可借助紫外線或是藍光光源;
蛋白質凝膠染色法實驗（五）
磷 蛋 白 的 檢 測作為基本的細胞信號機制, 指定氨基酸殘基的可逆磷酸化作用的重要性已無需爭辯。當前磷蛋白染料具有受ZL保護的構型，即磷酸基結合部分共價連接于熒光團。檢測的方式是選擇性結合磷酸化的氨基酸，但是沒有熒光增強作用。從某種程度上講, 許多可溶的熒光復合物都可作為總蛋白質染色劑
蛋白質凝膠染色法實驗（三）
尼羅紅蛋白質凝膠染色劑尼羅紅 (Nile red) 是一種吩囉嗪酮類染料, 當其從水轉入到疏水環境，如 S D S 微粒或蛋白質-S D S 復合物中時，便顯示出強烈的熒光增強作用。尼 羅 紅 不 會 與 S D S 單體發生顯著作用》利用這一特點開發出了一種適合 S D S 凝膠的迅速
細胞凋亡檢測(單染法)
實驗概要本實驗介紹了細胞凋亡檢測(Annexin-V-FITC 單染法)(Assay of Cell Apoptosis)的原理及操作流程。實驗原理細胞凋亡或稱程序性細胞死亡（Programmed ?Cell ?Death，PCD）是細胞的生命現象之一，它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴
銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產品使用說明
主要用途YIJI銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑是一種旨在通過端粒酶體外合成端粒重復序列的引物延展方法，繼而進行多聚酶聯擴增反應，在非變性聚丙烯酰胺電泳上，通過經典的銀染技術，呈現六堿基相間的階梯圖像，以分析和評價活細胞端粒酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。廣
銀染后的膠打質譜蛋白很少的原因
你指的蛋白很少是指分析出來的蛋白個數少，還是蛋白量低啊？銀染靈敏度高，如果切單條帶，蛋白含量本來就低，所以后續處理再損失一部分，打譜出來后，有些蛋白因為量實在太低了，低于檢測下限，就沒法檢測出來了。建議先增加蛋白用量，另外也要查詢打譜后的數據，看酶切處理是不是完全，有沒有可能是不完全酶切，導致大片段
PAGE凝膠快速銀染試劑盒操作手冊
PAGE凝膠快速銀染試劑盒貨號: G7210規格: 1L保存: 室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12個月。試劑盒內容： G7210硝酸銀 2g染色液A 100ml顯色液B 100ml顯色液C 100ml終止液D 100ml注：1L 規格指可配制的硝酸銀染色液的體積，實際使用次數根據PAGE
固相化－pH－梯度雙向凝膠電泳實驗10
方案11 銀氨染色實驗方法原理銀染聚丙烯酰胺凝膠首先由 Switzer 等引進（1979)，已迅速成為一種最普遍使用的高靈敏度蛋白質染色方法。因存在背景高、重復性不好及銀鏡等問題，多年來對此方法的改進較多。目前，Rabilloud 等（1994b）在文獻中發現 100 多種不同的方案，但所有這些方案
蛋白質染色
二維凝膠電泳(2-DE)是廣為蛋白質組學科學家們應用的經典技術之一，蛋白混合物在兩個維度上被分離。第一步是常規的等電聚焦，此過程中蛋白質根據其等電點被分離。接著，第二維使用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，將蛋白質按分子量進一步分離。上述兩步操作在互相垂直的兩個方向上，使分離的蛋白
培養細胞染色體顯示法實驗
實驗方法原理 培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點，是制備染色體極好的對象。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材 酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟 1. ?培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %～90 %匯合單層培養細胞；
染色體分離實驗——Percoll梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒精胺精咪Percoll 溶液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 在體積為 10 ml 分離得到的染色質物質中加入精胺和精咪至終濃度分別為 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，勻漿分離得到的染色質。Percoll 溶液：
染色體分離實驗——甘油梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒甘油 染色質分離緩沖液溶液儀器、耗材JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟1. 準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度沉降
染色體分離實驗——聚胺法分離染色質
實驗材料細胞試劑、試劑盒秋水仙胺聚胺緩沖液實驗步驟有絲分裂中細胞的同步化1. 37℃，用合適的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培養基培養細胞。2. 收集有絲分裂細胞前 10~16 小時在培養基中以 0.06 μg/ml 的濃度加入秋水仙胺。收獲細胞并在聚胺緩沖液中裂解3. 收獲細胞。對于懸浮培養
染色體分離實驗—水相法分離染色質
實驗材料細胞試劑、試劑盒水相裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟1. 像聚胺法的第 1、2 步中講的那樣誘導懸浮或單層培養細胞的中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃，1000 g 離心 10 分鐘然后重懸浮，典型的制備量為 10 ml 新鮮培養基含 108?個細胞。3. 將濃的細胞懸液在冰上放置至少 30
Annexin－VPI雙染法
Annexin V-PI 雙染法在細胞凋亡的早期就有細胞膜表面破損發生。破損時凋亡細胞表面的磷脂腺絲氨酸(PS)可以從細胞內膜翻轉至細胞的外膜。該過程發生在DNA片段化之前，因而檢測PS的表達，能反映早期凋亡。AnnexinV是相對分子質量為35 000大小的Ca2+依賴的磷脂結合蛋白，對PS有很高
PAGE電泳條帶該如何分析
我們實驗室都是蛋白的染色是G250，核酸的都是EB，你的這個核酸染色應該是銀染了吧。這種染色我沒做過，只是書本上看的。但是銀染的靈敏度非常的高，只有5ng或更少的DNA均可經銀染法清晰地顯示出來。看你的圖覺得是核酸含量夠了，倒是認為核酸含量很雜，到處都是。不過你認為條帶不清可以試試0．2％硝酸銀染色
PAGE電泳條帶該如何分析
我們實驗室都是蛋白的染色是G250，核酸的都是EB，你的這個核酸染色應該是銀染了吧。這種染色我沒做過，只是書本上看的。但是銀染的靈敏度非常的高，只有5ng或更少的DNA均可經銀染法清晰地顯示出來。看你的圖覺得是核酸含量夠了，倒是認為核酸含量很雜，到處都是。不過你認為條帶不清可以試試0．2％硝酸銀染色
銀染核仁形成區的光鏡和電鏡標本制備及觀察
實驗原理?在細胞分裂中期核型中，人的端著絲粒染色體短臂區和在間期細胞核的核仁中有與銀離子特異親合物質，通過銀染可以顯示它們的致量，因此一直被人們所關注。近年來發現，雖然人的端著絲粒染色體短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位，稱核仁形成區(Nucleolar organizer
蛋白質質譜鑒定技術概述及常見問題
蛋白質（Protein）是生物體中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物細胞，作為生命的物質基礎之一，蛋白質在催化生命體內各種反應進行、調節代謝、抵御外來物質入侵及控制遺傳信息等方面都起著至關重要的作用，因此蛋白質也是生命科學中極為重要的研究對象。現代研究結果發現越來越多的多肽同蛋白質一樣
蛋白質組與蛋白質組學簡介2
3 甲基化干擾實驗用來檢測蛋白質的結合位點。甲基化修飾的DNA探針可以干擾蛋白質的結合。結合位點上未被修飾的DNA片段才能與蛋白結合，然后將DNA從被修飾的堿基處切割，電泳分離，結合蛋白的DNA在結合位點上不能被修飾，不能切斷，可確定結合位點的位置。 4 Dnase I 足紋分析 蛋白
基于PCR的基因分型實驗—用銀染的方法無放射性的分析SSLP
實驗材料PCR 擴增 SSLP 的變性聚丙烯酰胺凝膠試劑、試劑盒乙醇硝酸硝酸銀染色溶液顯色液乙酸儀器、耗材Whatman 濾紙染色儀器80℃真空電爐實驗步驟1.電泳后，小心的打開儀器，分開玻璃板。將有膠的那塊板子放于染色一起的底部，仔細地將上面的架子和墊圈放置于膠邊緣的上面，擰緊閂子。膠里如果有小空
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中，而是放在燒杯或瓶子的容器中；通過攪拌或搖動而混內層析；以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料 蛋白質溶液儀器、耗材 離子交換層析裝置實驗步驟 1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂，不斷攪拌以促進平衡；2. 傾瀉掉大部分溶液，保留的溶液置要使樹脂能輕松的
批量層析法濃縮蛋白質實驗
批量層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中，而是放在燒杯或瓶子的容器中；通過攪拌或搖動而混內層析；以過濾或離心的辦法分出層析液。
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中，而是放在燒杯或瓶子的容器中；通過攪拌或搖動而混內層析；以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料蛋白質溶液儀器、耗材離子交換層析裝置實驗步驟1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂，不斷攪拌以促進平衡；2. 傾瀉掉大部分溶液，保留的溶液置要使樹脂能輕松的攪拌；3
蛋白質含量測定實驗——Bradford法
蛋白質含量測定實驗可以用于：（1）測定蛋白質濃度；（2）檢測所提取的蛋白質含量。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒牛血清NaCl考馬斯亮藍儀器、耗材分光光度計離心機實驗步驟1. ?分別在兩組微量離心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白，以 0.15 mmol/l NaCl補足至100 ul，同時以兩管