染色體分離實驗——甘油梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒甘油 染色質分離緩沖液溶液儀器、耗材JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟1. 準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度沉降。3. 以 3 ml —份收集梯度頂部組分。4. 每一組分固定少量樣品（10~20 ml）于載玻片上，用相差顯微鏡觀察確定含染色體的組分。5. 收集含有純化的染色體的樣品。6. 制備得到的樣品用 JA-20 轉頭在 4℃，5000 r/min 離心 15 分鐘以除去其中的甘油，用分離緩沖液重懸浮染色體沉淀。展開......閱讀全文
染色體分離實驗——甘油梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒甘油 染色質分離緩沖液溶液儀器、耗材JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟1. 準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度沉降
染色體分離實驗——Percoll梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒精胺精咪Percoll 溶液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 在體積為 10 ml 分離得到的染色質物質中加入精胺和精咪至終濃度分別為 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，勻漿分離得到的染色質。Percoll 溶液：
染色體分離實驗——蔗糖梯度純化法
實驗材料染色質粗品試劑、試劑盒蔗糖分離緩沖液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 準備兩種 18ml，濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液（聚胺，水相或己二醇法的緩沖液），然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中，用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品溶液輕輕
甘油梯度法染色實驗
實驗材料：染色質試劑、試劑盒：甘油、染色質、分離緩沖液溶液儀器、耗材：JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟：準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度
染色體分離實驗——聚胺法分離染色質
實驗材料細胞試劑、試劑盒秋水仙胺聚胺緩沖液實驗步驟有絲分裂中細胞的同步化1. 37℃，用合適的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培養基培養細胞。2. 收集有絲分裂細胞前 10~16 小時在培養基中以 0.06 μg/ml 的濃度加入秋水仙胺。收獲細胞并在聚胺緩沖液中裂解3. 收獲細胞。對于懸浮培養
染色體分離實驗—水相法分離染色質
實驗材料細胞試劑、試劑盒水相裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟1. 像聚胺法的第 1、2 步中講的那樣誘導懸浮或單層培養細胞的中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃，1000 g 離心 10 分鐘然后重懸浮，典型的制備量為 10 ml 新鮮培養基含 108?個細胞。3. 將濃的細胞懸液在冰上放置至少 30
抗藥性突變株的分離實驗——梯度平板法
實驗方法原理生物的抗藥性突變是 DNA 分子的某一特定位置的結構改變所致，與藥物的存在無關，某種藥物的存在只是作為分離某種抗藥性菌株的一種手段，而不是作為引發突變的誘導物，因而在含有一定抑制生長藥物濃度的平板上涂布大量的細胞群體，極個別抗性突變的細胞會在平板上長成菌落。將這些菌落挑取純化，進一步進行
線粒體分離實驗—用蔗糖密度梯度法純化線粒體
實驗材料線粒體懸液試劑、試劑盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA儀器、耗材Bockman SW28 號轉頭實驗步驟1. 在用于 Bockman SW28 號轉頭（或與其等同的產品）的 Uitradear 離心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一層 15 ml 1.5 mol
密度梯度細胞分離法
實驗方法原理 制備密度梯度液，通過密度梯度液離心細胞，收集各梯度組分，用培養基稀釋，培養細胞。實驗材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶儀器、耗材 生長培養基生長培養基+20% Percoll25ml離心管注射器或梯度收集器24孔培養板折光儀或密度計低速離心機實驗步驟 通過下述方法之一制備密度梯度液：(
密度梯度細胞分離法
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 制備密度梯度液，通過密度梯度液離心細胞，收集各梯度組分，用培養基稀釋，培養細胞。 實驗材料 細胞樣品
密度梯度細胞分離法
實驗方法原理制備密度梯度液，通過密度梯度液離心細胞，收集各梯度組分，用培養基稀釋，培養細胞。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒D-PBS0.25%胰蛋白酶儀器、耗材生長培養基生長培養基+20% Percoll25ml離心管注射器或梯度收集器24孔培養板折光儀或密度計低速離心機實驗步驟通過下述方法之一制備密
密度梯度細胞分離法
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 制備密度梯度液，通過密度梯度液離心細胞，收集各梯度組分，用培養基稀釋，培養細胞。 實驗材料 細胞樣品
染色體分離實驗
聚胺法分離染色質 水相法分離染色質 用己二醇法分離中期染色質 蔗糖梯度純化法 Percoll梯度法 甘油梯度法 ? ? ? ? ? ?
Percoll梯度法染色實驗
實驗材料：染色質試劑、試劑盒：精胺、精咪、Percoll、溶液儀器、耗材：聚碳酸酯離心管實驗步驟：1. 在體積為 10 ml 分離得到的染色質物質中加入精胺和精咪至終濃度分別為 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，勻漿分離得到的染色質。Perco
蔗糖梯度純化法實驗
實驗材料：染色質粗品試劑、試劑盒：聚碳酸酯離心管儀器、耗材：Dounce 勻漿器實驗步驟：準備兩種 18ml，濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液（聚胺，水相或己二醇法的緩沖液），然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中，用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品
密度梯度分離法分離單個核細胞（MNCs）
試劑和材料：1. 合適的培養基或冷凍液；2. PBSA；3. Ficoll-Hypague；4. 巴氏吸管；5. 50ml離心管；實驗方法：1. 將臍血樣品用PBSA按1：1比例稀釋；2. 將15ml Ficoll-Hypague吸入50ml離心管；3. 將30mlPBSA稀釋的臍血樣品緩慢地加到F
染色體分離實驗——用己二醇法分離中期染色質
實驗材料細胞試劑、試劑盒己二醇緩沖液儀器、耗材Dounce 勻漿器實驗步驟1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述誘導 500 ml 懸浮或單層培養細胞為中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃ 1000 r/min 離心 10 分鐘，用 10 ml 培養基重懸浮。3. 將重懸浮的細胞冷卻至 4℃ 放置 20
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
實驗方法原理 本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。實驗材料 λ 噬菌體顆粒懸浮液試劑、試劑盒 EDTA甘油SM胰 DNase Ⅰ儀器、耗材 Beckman SW41 或 SW28 轉子或相當型號離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液E
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。 實驗材料 λ 噬菌體顆粒懸浮液
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。實驗材料λ 噬菌體顆粒懸浮液試劑、試劑盒ED
離心技術在使用Metrizamide梯度分離染色體中的應用
?本文講述使用Metrizamide梯度分離染色體的方法和步驟。1.?????????細胞系和組織培養。中國倉鼠卵巢（CHO）和Hela細胞系在McCoy’s培養基中補加10%胎牛血清培養，用碳酸氫鹽緩沖系統，需要5%CO2。2.?????????細胞同步化。為了在收獲時有更多的有絲分裂細胞，用0.
【銳賽小課題】染色體分離實驗
一、聚胺法分離染色質 試劑、試劑盒：秋水仙胺、聚胺緩沖液 實驗步驟： 有絲分裂中細胞的同步化 1. 37℃，用合適的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培養基培養細胞。 2. 收集有絲分裂細胞前 10~16 小時在培養基中以 0.06 μg/ml 的
分離核仁實驗——高鎂法分離核仁
實驗材料細胞試劑、試劑盒Dulbecco’s 鹽溶液蔗糖核仁保存液儀器、耗材Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 準備溶液Dulbecco’s 鹽溶液：0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4，pH 7.0蔗糖 A
乙酸丙酮法血清甘油三酯測定實驗
實驗方法原理本法用異丙醇抽提血清TG，氧化鋁吸附磷脂及游離甘油氫氧化鉀皂化，過碘酸鈉氧化生成甲醛，甲醛與乙酸丙酮在氨離子存在下加熱生成黃色的 3，5二乙酰-1，4二甲基吡啶〔Hantgsch止反應）顯色程度與標本中TG濃度成正比。實驗步驟一、實驗試劑：1. 異丙醇（分析試劑）2. 氧化鋁（中性、層分
乙酸丙酮法血清甘油三酯測定實驗
實驗方法原理 本法用異丙醇抽提血清TG，氧化鋁吸附磷脂及游離甘油氫氧化鉀皂化，過碘酸鈉氧化生成甲醛，甲醛與乙酸丙酮在氨離子存在下加熱生成黃色的 3，5二乙酰-1，4二甲基吡啶〔Hantgsch止反應）顯色程度與標本中TG濃度成正比。實驗步驟 一、實驗試劑：1. 異丙醇（分析試劑）2. 氧化鋁（中性、
PH梯度萃取分離及柱色譜分離原理
pH梯度萃取法是分離酸性、堿性、兩性成分常用的手段.其原理是由于溶劑系統 pH變化改變了它們的存在狀態（游離型或解離型）,從而改變了它們在溶劑系統中的分配系數.如混合黃酮苷元,由于結構中酚羥基的數目和位置不同,...
培養細胞染色體顯示法實驗
實驗方法原理 培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點，是制備染色體極好的對象。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材 酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟 1. ?培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %～90 %匯合單層培養細胞；
什么叫PH梯度萃取分離
PH梯度萃取分離就是根據不同物質在不同PH下析出沉淀的原理來提純所需物質pH梯度萃取法是分離酸性、堿性、兩性成分常用的手段。其原理是由于溶劑系統 pH變化改變了它們的存在狀態（游離型或解離型），從而改變了它們在溶劑系統中的分配系數。如混合黃酮苷元，由于結構中酚羥基的數目和位置不同，各自所呈酸性強弱不
小鼠單個核細胞分離一步梯度法去除死細胞
PriCells-小鼠單個核細胞分離一步梯度法去除死細胞?基本原理活細胞（密度較小）和死細胞（密度較大）密度不同，從而有助于將活的淋巴細胞和紅細胞分離。?附加材料高密度溶液：Ficoll-Paque（Ficoll和泛影酸鈉；Pharmacia LKB）或Lympholyte-M（Cedarlane）