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  • 蛋白質染色實驗——銀染法

    實驗材料蛋白質試劑、試劑盒脫色液戊二醛硝酸銀洗印顯影液儀器、耗材培養箱搖床實驗步驟1. 將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以5倍體積的固定液覆蓋,在旋轉搖床中緩慢搖動30 min 以上。 2. 傾去固定液,加5倍凝膠體積的脫色液,緩慢搖動60 min 以上。 3. 傾去脫色液,加5倍凝膠體積的10%戊二醛,在通風櫥中緩慢搖動30 min。 4. 傾去戊二醛溶液,用水洗凝膠4次以上,每次30 min 以上,最后一次洗滌以過夜為佳。緩慢搖動。 5. 傾去水,將凝膠置于約5倍凝膠體積的硝酸銀溶液中平衡(完全蓋沒凝膠),劇烈振蕩 15 min。 6. 將凝膠移至另一塑料盒,用去離子水洗5次,每次精確5 min,緩慢搖動。7. 用500 ml 水稀釋25 ml 顯影液,將凝膠移至另一塑料盒,加入足夠的稀釋顯影液......閱讀全文

    電鏡免疫膠體金―銀法染色技術

    免疫膠體金―銀染色(immunogold-sliverstaining)技術系20世紀80年代Holgate將免疫 金染色和銀顯影方法結合而建立的一種新型檢測技術,亦可用于電鏡包埋前染色。其基本原理是先進行免疫膠體金染色標記抗原,使其結合在組織細胞抗原所在位置,然后進行物理顯影,當顯影劑中的對

    SDSPAGE銀染實驗的基本步驟以及相關純水應用

    摘要:通過闡述水中雜質對銀染實驗帶來的影響,詳細解釋了為什么銀染實驗應該中應該使用EDI純水。SDS聚丙烯酰胺凝膠染色是蛋白質研究的一個基礎方法。染色方法有很多,實際應用中,考馬斯亮藍染色(考染)和銀染是運用的最多的方法。考馬斯亮藍G250在游離狀態下呈紅色,它與蛋白質結合后變為藍色,結合物在595

    關于DNA測序測序凝膠的銀染

      染色過程要求凝膠浸在塑料盤中。因而至少使用兩個盤子,大小與玻璃板類似。在盤中加入新鮮溶液之前須用高質量的水洗滌盤子。  1. 電泳完畢后用一個塑料片子小心地分開兩板,凝膠應該牢固地附著在短玻璃板上。  2. 固定凝膠:將凝膠(連玻璃板)放入塑料盤,用固定/停止溶液浸沒,充分振蕩20分鐘或直至樣品

    銀染后可以做質譜嗎

    不行 質譜要求樣品是純度是分析純,銀染后蛋白質分子結合了銀,即使提純后再做質譜分析也沒有意義了,你可以將樣品分成兩份,一份跑電泳,另一份做質譜。

    DNA測序——非同位素銀染

    實驗方法原理Promega公司的SILVER SEQUENCETM DNA測序系統是一種無放射性的序列分析系統,它通過靈敏的銀染方法檢測凝膠中的條帶。 銀染提供了一種對于放射性或熒光法來說更加快速,廉價的替代方法。測序結果可以在同一天內得到;電泳完成后經90分鐘就可讀序,這是常規的放射性測序法做不到

    核酸染色實驗——核仁組成區嗜銀蛋白

    實驗方法原理核仁組成區是 DNA 的襻,具有核糖體基因(rDNA),在一定條件下可用銀反應法進行定位,是通過銀的聚合物沉積于胱氨酸和半胱氨酸的雙硫鍵位置上,所以在鏡下能夠清楚可見顆粒狀的核仁組成區嗜銀蛋白(AgNOR)。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水明膠粉雙蒸水硝酸銀儀

    蛋白質凝膠染色法實驗

    實驗步驟總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群,使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度,那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析,則首選不會引入共價蛋白

    特染:-結締組織染色

    一、Mallory三色染色法1. 試劑配制(1)重鉻酸鉀液 重鉻酸鉀2.5g,醋酸5ml,蒸餾水95ml(2)苯胺藍桔黃G液 苯胺藍0.5g,桔黃G2g,磷鎢酸1g,蒸餾水100ml(3)酸性復紅液 酸性復紅0.5g,蒸餾水100ml2.染色步驟(1)中性甲醛液固定組織,石蠟切片,常規脫蠟至水。(2

    細菌染色技術(單染技術與革蘭氏染色)

    細菌 ?個體微小,普通光學顯微鏡下不易直接觀察,故常用染色技術使細菌細胞著色。包括細菌單染技術、細菌的革蘭氏染色技術、細菌的芽孢染色技術、細菌的莢膜染色技術和細菌的鞭毛染色技術 Ⅰ、細菌的單染技術 簡單染色通常只用一種染色劑,使細菌整個細胞染上顏色。但看不清結構。所以只便于檢查細菌的形態

    免疫金銀染色

    中文名稱免疫金-銀染色英文名稱immuno-gold-silver staining;IGSS定  義使已在抗原位置沉積的金顆粒發揮催化作用,促進銀離子被氫醌還原為銀原子,后者圍繞金顆粒形成一層銀殼,利用膠體金和膠體銀的雙重標記抗體對抗原進行染色的方法。增強了檢測靈敏度。應用學科細胞生物學(一級學科

    蛋白質染色實驗——考馬斯亮藍染色

    蛋白質染色可用于(1)蛋白質的觀測(2)蛋白質含量的測定。實驗方法原理1. 凝膠中蛋白質的定位可用考馬斯亮藍染料染色或銀染色。前者簡便且快捷,而銀染法具有相當高的靈敏度,能用于檢出更少量的蛋白質。2. 蛋白質的存在影響酸堿滴定中所用某些指示劑的顏色變化,從而改變這些染料的光吸收。在些基礎上發展了蛋白

    Percoll梯度法染色實驗

    實驗材料:染色質試劑、試劑盒:精胺、精咪、Percoll、溶液儀器、耗材:聚碳酸酯離心管實驗步驟:1. 在體積為 10 ml 分離得到的染色質物質中加入精胺和精咪至終濃度分別為 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液,勻漿分離得到的染色質。Perco

    甘油梯度法染色實驗

    實驗材料:染色質試劑、試劑盒:甘油、染色質、分離緩沖液溶液儀器、耗材:JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟:準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%(v/v)甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃,1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度

    蛋白質凝膠染色法實驗(二)

    關鍵步驟通常如下所述。(1) 固定凝膠,以固定蛋白質條帶,并移除凝膠中的干擾物質, 如 S D S 、緩沖液和鹽,這些物質會結合銀并造成背景染色。(2) 用能夠結合蛋白質并提高銀結合能力的物質, 或是能夠干擾剩余未結合的銀造成的背景染色的物質來孵育凝膠。總之,這些各種各樣的方法都和敏化作用有關。(3

    蛋白質硝酸銀染色試劑盒使用說明

    主要用途YIJI蛋白質硝酸銀染色試劑是一種旨在使用硝酸銀通過固著、清洗和染色,直接在聚丙烯酰胺凝膠上顯色,在清晰背景上產生靈敏度10?納克以下蛋白質的銀色條帶的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于蛋白電泳包括?IEF?的檢測。產品即到即用,性能穩定,操作便捷,

    蛋白質凝膠染色法實驗(一)

    總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群,使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度,那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析,則首選不會引入共價蛋白

    關于鞭毛染色法—硝酸銀法的基本介紹

      鞭毛染色法—硝酸銀法的染色操作:  一、選用潔凈載玻片。  二、配制染料,A液為丹寧酸5g,FeCI3 1.58,蒸餾水100ml,待溶解后,加1% NaOH 1ml和15%甲醛2ml。B液為AgNO32g,蒸餾水100ml。待AgNO3溶解后,取出10ml作回滴用,即向90ml B液中滴加濃氫

    蛋白質硝酸銀染色試劑盒產品說明書

      主要用途   YIJI蛋白質硝酸銀染色試劑是一種旨在使用硝酸銀通過固著、清洗和染色,直接在聚丙烯酰胺凝膠上顯   色,在清晰背景上產生靈敏度10 納克以下蛋白質的銀色條帶的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科   學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于蛋白電泳包括 IEF 的檢測。產品即

    兩大蛋白質染色主流方法大比較

    常用的蛋白質染色試劑分為已考馬斯亮藍為代表的有機試劑染色、銀染、熒光染色及同位素顯色。其中考馬斯亮藍染色法的應用較為廣泛,現將其與其他的蛋白質染色方法(主要是銀染法)作一比較,幫助大家更好地去選擇合適的蛋白質染色方法。蛋白質的染色常用的有4類:有機試劑染色、銀染、熒光染色及同位素顯色。其中有機試劑染

    蛋白質凝膠染色法實驗

    實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群,使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度,那么銀

    莢膜染色實驗——濕墨水法

    本實驗介紹 3 種莢膜染色法:濕墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中濕墨水法較簡便、并適用于各種有莢膜的細菌。實驗方法原理莢膜是包圍在細菌細胞外的一層粘液狀或膠質狀物質,其成分為多糖、糖蛋白或多肽。由于莢膜與染料的親和力弱不易著色;而且可溶于水,易在用水沖洗時被除去。所以通常用襯托染色法染色

    莢膜染色實驗——Anthony-氏法

    實驗方法原理莢膜是包圍在細菌細胞外的一層粘液狀或膠質狀物質,其成分為多糖、糖蛋白或多肽。由于莢膜與染料的親和力弱不易著色;而且可溶于水,易在用水沖洗時被除去。所以通常用襯托染色法染色,使菌體和背景著色,而莢膜不著色合在菌體周圍形成一透明圈。由于莢膜含水量高。制片時通常不用熱固定,以免變形影響觀察。實

    莢膜染色實驗——干墨水法

    實驗方法原理莢膜是包圍在細菌細胞外的一層粘液狀或膠質狀物質,其成分為多糖、糖蛋白或多肽。由于莢膜與染料的親和力弱不易著色;而且可溶于水,易在用水沖洗時被除去。所以通常用襯托染色法染色,使菌體和背景著色,而莢膜不著色合在菌體周圍形成一透明圈。由于莢膜含水量高。制片時通常不用熱固定,以免變形影響觀察。實

    非同位素銀染測序系統操作技術

      Promega公司的SILVER SEQUENCETM DNA測序系統是一種無放射性的序列分析系統,它通過靈敏的銀染方法檢測凝膠中的條帶。銀染提供了一種對于放射性或熒光法來說更加快速,廉價的替代方法。測序結果可以在同一天內得到;電泳完成后經90分鐘就可讀序,這是常規的放射性測序法做不到的。 此外

    影響DNA測序技術測序產物銀染的因素

      1. 水的質量對于染色的成功極其重要。超純水(NANOpureR 或Milli-QR 的水)或雙蒸水可獲得較好的效果, 如果水中有雜質, 則低分子量條帶可能無法出現。  2. 碳酸鈉也非常重要。使用新鮮的,美國化學學會級碳酸鈉較好,如Fisher和Kodak ACS試劑級碳酸鈉(Fisher C

    DNA測序測序凝膠的銀染的影響因素

      測序產物的銀染是顯現序列信息的一種新方法,本系統的成敗受幾個因素的影響  ① 水的質量對于染色的成功極其重要。超純水(NANOpureR或Milli-QR的水)或雙蒸水可獲得較好的效果,如果水中有雜質,則低分子量條帶可能無法出現。  ② 碳酸鈉也非常重要。使用新鮮的,美國化學學會級碳酸鈉較好,如

    固相化-pH-梯度雙向凝膠電泳實驗11

    方案11 與質譜兼容的銀染法實驗實驗方法原理在方案 11 中介紹的銀氨方法是用于檢測在 SDS-PAGE 凝膠上蛋白質的最靈敏的方法之一。但是,這種方法和其他標準銀染方法都不適合于質譜分析,而質譜已成為鑒定雙向凝膠上蛋白質的最好方法。因為在凝膠中被質譜分析的蛋白質不能被修飾,許多通常用的敏化試劑(例

    細胞凋亡檢測實驗——AnnexinVFITC-單染法

    實驗方法原理細胞凋亡或稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是細胞的生命現象之一,它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴細胞的清除等方面起著十分重要的作用。細胞凋亡調節的失控可導致臨床各種疾病的發生。如老年性癡呆與神經細胞凋亡過度有關,自身免疫性疾病和腫瘤與

    細菌透射電鏡樣品制備實驗滴液法+負染法

    實驗方法原理由于生物樣品主要由碳、氫、氧、氮等元素組成,散射電子的能力很低,在電鏡下反差小。所以在進行電鏡的生物樣品制備時通常還須采用重金屬鹽染色或金屬噴鍍等方法來增加樣品的反差,提高觀察效果。負染色法就是用電子密度高,本身不顯示結構且與樣品幾乎不反應的物質(如磷鎢酸鈉或磷鎢酸鉀)來對樣品進行「染色

    細菌透射電鏡樣品制備實驗——滴液法+負染法

    透射電鏡樣品的制備方法很多。其中滴液法,或在滴液法基礎上發展出來的其他類似方法如直接貼印法、噴霧法等主要被用于觀察病毒粒子細菌的形態及生物大分子等。由于生物樣品散射電子的能力很低,所以通常還須采用重金屬鹽染色或金屬噴鍍等方法來增加樣品的反差,提高觀察效果。負染色法由于操作簡單,目前在進行透射電鏡生物

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