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  • 免疫球蛋白標記技術_熒光素標記抗體技術

    實驗方法原理目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200,RB200)。在堿性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合,標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力。在熒光燈源紫外線或蘭紫光激發下產生黃綠色熒光,通過在熒光顯微鏡下觀察或流式細胞儀分析可對相應抗原進行定性、定位或定量的檢測。實驗材料抗體試劑、試劑盒FITCPBSDMSO碳酸鹽緩沖液儀器、耗材攪拌器紫外分光光度計實驗步驟1. 將純化的IgG抗體對PH9~9.5碳酸鹽緩沖液透析過夜,透析后抗體液移入小燒杯中 2. 稱取適量IFTC,加入二甲亞砜(DMSO)(FITC~1 mg/1 ml DMSO),使終濃度為1 mgFITC/1 mlDMSO FITC/IgG比例如IgG濃度為......閱讀全文

    免疫球蛋白標記技術_熒光素標記抗體技術

    實驗方法原理目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200,RB200)。在堿性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合,標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力。在熒

    免疫球蛋白標記技術_酶標記抗體

    免疫標記技術是用特定的物質標記抗原或抗體進行的抗原抗體反應。可借助各種儀器觀察結果或進行自動化測定,可在細胞、亞細胞、超微結構及分子水平上,對抗原抗體反應進行定性和定位研究;或應用各種液相和固相免疫分析方法,對液體中的抗原、半抗原或抗體進行定性和定量測定。實驗方法原理酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗

    熒光素標記抗體技術

    (一) 原理  目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在鹼性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合,標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力

    免疫球蛋白標記技術

    酶標記抗體 熒光素標記抗體技術 125I標記單克隆抗體技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量

    免疫球蛋白標記技術

    實驗方法原理 酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否,因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中最常用的是酶標記抗體,它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前

    免疫球蛋白標記技術_125I標記單克隆抗體技術

    實驗方法原理氯胺桾即對甲苯碘氯胺鈉,在水溶液中生成次氯酸,為一種溫和氧化劑,當加入到有蛋白質和碘的弱堿水溶液中,可將I2氧化為I+并結合到氨基酸上。如標記條件溫和,標記后的McAb仍具有良好的結合活性,通過放射性同位素強度的測定可反映相應抗原的含量。實驗材料McAb125I試劑、試劑盒磷酸緩沖液氯胺

    免疫熒光標記技術

    .原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法:將標記

    多肽FRET熒光標記技術

    熒光標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物,受到紫外光或藍紫光照射時,可激發成為激發態,當從激發態恢復基態時,發出熒光。熒光標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上,利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒光標記的無放射物污染,操作簡

    RAPD標記技術

    實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly ?amplifiled polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上,它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體)

    AFLP標記技術

    實驗概要AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來(附圖)。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的

    RFLP標記技術

    實驗概要DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction ?Fragment Length ?Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基因組的限制性內切酶的酶

    免疫熒光標記技術是什么

    .原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法:將標記

    免疫熒光標記技術的原理

    免疫熒光標記技術(immunofluorescence technique)是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位,檢測出抗原或抗體。

    免疫熒光標記技術是什么

    .原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法:將標記

    FITCAMC等熒光標記技術

    熒光標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物,受到紫外光或藍紫光照射時,可激發成為激發態,當從激發態恢復基態時,發出熒光。熒光標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上,利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒光標記的無放射物污染,操作簡

    Science發布革命性熒光標記技術

      霍華德·休斯醫學研究所的科學家們開發了一個革命性的新工具,可以在動物大腦中永久性標記神經元活動。在神經元激發鈣離子流入時,這個工具(熒光蛋白CaMPARI)會從綠色變為紅色。此前,研究者們需要在正確的時間用顯微鏡聚焦正確的細胞才能觀察到神經元活動,現在這個永久性的熒光標記為他們帶來了解

    免疫標記技術介紹

    免疫標記技術是指將抗原抗體反應與標記技術相結合,將已知的抗體或抗原標記上示蹤物質,通過檢測標記物,間接測定抗原-抗體復合物的一類實驗方法。常用的標記物有酶,熒光素,放射性核素,化學發光物質及膠體金等。

    熒光素FITC標記抗體的方法

    當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時,主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵(thiocarbmide)結合,形成FITC-蛋白質結合物,即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基,一般zui多能結合15~20個,一個IgG分子可結合2~8個分子的FITC,其反應式如下FI

    熒光素標記抗體的操作步驟

    ? ? ? ? ? ?FITC熒光素標記抗體的操作步驟??????www.runwelltac.com當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時,主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵(thiocarbmide)結合,形成FITC-蛋白質結合物,即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴

    穩定同位素標記技術的原理

    高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么這些元素是否都具有放射性呢?其實不然!所謂同位素是指具有相同原子序數(即質子數相同,因而在元素周期表中的位置相同),但質量數不同,亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出

    穩定同位素標記技術的原理

    高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么這些元素是否都具有放射性呢?其實不然!所謂同位素是指具有相同原子序數(即質子數相同,因而在元素周期表中的位置相同),但質量數不同,亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出

    穩定同位素標記技術的原理

    高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么這些元素是否都具有放射性呢?其實不然!所謂同位素是指具有相同原子序數(即質子數相同,因而在元素周期表中的位置相同),但質量數不同,亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出

    穩定同位素標記技術的原理

    高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么這些元素是否都具有放射性呢?其實不然!所謂同位素是指具有相同原子序數(即質子數相同,因而在元素周期表中的位置相同),但質量數不同,亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出

    病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體

    實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法:較為常用,具體步驟是:1) 抗體溶液的制備:用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素:根據待標記抗體的總量,按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白

    EMBL科學家發布新熒光標記技術

    歐洲分子生物學實驗室EMBL的科學家們在12月8日的《Nature Methods》上發表了一種新標記技術,為人們揭示了小鼠神經系統的更多細節。研究者們可以在此基礎上很方便的使用各種人工標記,拓展自己的研究范圍,提高熒光成像的分辨率。“這一技術能幫我們看到之前看不清楚的細節,”這項研究的領導者,EM

    親和標記技術的應用

    有人用親和標記技術直接鑒別結合部位的氨基酸殘基。其做法是將一化學性質活躍的側鏈連接到半抗原上,當此帶有側鏈的半抗原與相應抗體結合后,側鏈即與鄰近的氨基酸形成共價鍵,也就是說,結合部位鄰近的氨基酸殘基被標記了。也有人用疊氮基作側鏈連接到半抗原上,并與相應抗體結合,經紫外線照射后,疊氮基轉變成活化的硝基

    PCR-SSCP標記技術

    實驗概要日本Orita等研究發現,單鏈DNA片段呈復雜的空間折疊構象,這種立體結構主要是由其內部堿基配對等分子內相互作用力來維持的,當有一個堿基發生改變時,會或多或少地影響其空間構象,使構象發生改變,空間構象有差異的單鏈DNA分子在聚丙烯酰胺凝膠中受排阻大小不同.因此,通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(

    免疫金標記技術原理

    免疫金標記技術原理:膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能,蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面,無共價鍵形成,標記后大分子物質活性不發生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標蛋白在相應的配體處大量聚集時,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅

    常用單抗的標記技術

    目前動物用單抗,在動物疫病診斷和檢疫、妊娠檢測、性別鑒定等方面有廣泛的應用,大多以診斷試劑(盒)的形式提供,其中核心試劑為標記的單抗。下面將介紹最常用的幾種標記技術。1.酶標記(1)辣根過氧化物酶(HRP)標記辣根過氧化物酶(HRP)標記單抗和多克隆抗體的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖基用

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