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    AFLP標記技術

    實驗概要AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來(附圖)。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘末端順序和接頭順序就作為以后PCR反應的引物結合位點。實驗中,根據需要通過選擇在末端上分別填加了1~3個選擇性核苷的不同引物,可以達到選擇性擴增的目的。這些選擇性核苷酸使得引物能選擇性地識別具有特異配對順序的內切酶片段,進行結合,導致特異性擴增。主要試劑Taq酶 EcoR I/ Mse I EcoR I/ Mse I接頭 E A引物M C引 物T4 DNA&nb......閱讀全文

    分子標記

    內容:一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來,植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的,當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時,表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀,如

    農作物種子純度鑒定方法綜述4

    4.2 SSR(Simple sequence repeat,簡單序列重復標記)由Moore等于1991年創立。SSR即微衛星DNA,是一類由幾個(多為1~5個)堿基組成的基序(motif)串聯重復而成的DNA串聯重復序列,其長度一般較短,廣泛分布于基因組的不同位置,如(cA)n、(AT)n、(GG

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

    基因多態性的檢測方法概述

    多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性

    基因多態性的檢測方法

    多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性

    常用的幾種分子標記

    RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。 SSR

    基于 AFLP 的轉錄表達譜分析

    實驗材料Total RNA試劑、試劑盒鏈霉親和素包被的磁珠洗滌緩沖液EDTA第一鏈緩沖液第二鏈緩沖液DTT4 dNTP 的混合物SuperScript IIRNase HSTEXTris· ClRL緩沖液ATPPCR 緩沖液T4 多核苷酸激酶緩沖液加樣染料硅烷黏合硅烷溶液變性聚丙烯酰胺凝膠TBE 分

    SSR分子標記技術及其在構建玉米DNA指紋庫上的應用2

    2玉米DNA指紋庫的構建2. 1利用SSR分子標記構建玉米DNA指紋庫目 前,國內外對玉米種質鑒定采用的遺傳標記仍以形態標記為主,參考同工酶和種子貯藏蛋白標記。但形態標記的表現受環境影響較大,鑒定工作量大,周期長,受季 節限制。同工酶和種子貯藏蛋白標記多態性不夠豐富,同工酶還存在組織和器官特異性,取

    牧草DNA指紋圖譜應用前景看好

      牧草品種的真假和種子質量的優劣直接關系到草業生產安全、農民增收和農(牧)區社會穩定。隨著農牧業生產對優良牧草品種需求的提高,每年進入市場的育成牧草新品種數量也在快速增加,各種優良牧草品種越來越受到青睞,種植面積越來越大。而一些不法商家在利益驅動下,在種子生產經營過程中以假亂真、以次充好,坑農害農

    植物RAPD分析技術

    RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意為隨機擴增多態性DNA,是利用PCR技術進行隨機擴增,把擴增的DNA片段進行瓊脂糖凝膠電泳,根據DNA條帶的多態性來反應模板DNA序列上的多態性。RAPD同AFLP、SSR等分子標記一樣都基于PCR擴增,只

    從基因組到新品種 一根黃瓜也能“頂天立地”

      1月8日是2018年度國家科技獎勵大會召開的日子。2018年度國家自然科學獎二等獎和科技進步獎二等獎獲獎團隊部分成員黃瓜的馴化過程  清晨,黃三文和顧興芳在進入人民大會堂參加大會之前合了一張影,成為他們科研友誼的見證。  他們同來自中國農業科學院蔬菜花卉研究所(以下簡稱蔬菜所),同樣研究黃瓜,在

    激光顯微細胞分離技術

      在基礎醫學研究中涉及越來越多的如某一疾病狀態組織中,多種基因或遺傳變化,區別發展中的組織細胞群以及疾病狀態組織細胞,將有助于了解疾病發生的分子機制。因此,在下一代的分子分析方法將需要進入微觀世界及自動化程度高。對某一特殊個體的切片進行遺傳指紋圖譜鑒定,將有助于診斷及指導治療。 

    SSR分子標記技術及其在構建玉米DNA指紋庫上的應用1

    SSR分子標記技術及其在構建玉米DNA指紋庫上的應用 康麗麗 周鴻飛(沈陽農業大學農學院) 玉 米是一種重要的飼用、糧用和工業加工作物,在國民經濟中占有重要的地位。玉米育種方法的改進對農業發展具有重要意義。長期以來,育種家們大多數是借用易于 鑒別的形態學和同工酶等遺傳標記來輔助育種,并取得了很大成功

    用PCR進行基因分型

    與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)時覺得見效很快,不再需要等幾天才能看到結果,不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步,RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化,甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白

    用PCR進行基因分型-1

    與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)時覺得見效很快,不再需要等幾天才能看到結果,不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步,RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化,甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白

    法醫物證檢測中DNA分析技術的應用

    法醫物證檢測中DNA分析技術的應用摘 要:本文以DNA 分析技術為研究對象,對其常見技術在法醫物證檢測中的應用進行了探究,以期拓 展法醫鑒定范圍、增強物證檢測質量的目的。   隨著現代生物學和醫學的發展, 逐步形成了許 多DNA提取、鑒定和分析技術。 這些技術在多個領 域中得到了

    生物檢測技術在食品檢驗中的應用研究

      [摘 要]本文以生物檢測技術為例,通過闡述其在食品檢測中的意義,介紹了生物檢測技術的主要內容,并分析了生物檢測技術在食品檢驗中的應用。   引言   食品安全及質量與人們生活健康息息相關,也是影響食品工業發展及對外貿易的重要因素。近些年發展的生物技術檢測方法因其特異的生物識別

    Nature報道一種新型電泳技術:液晶電泳

          摘要: 來自美國肯特州立大學(Kent State University)的研究人員發現了一種新型電泳技術:向列液晶(nematic liquid crystal)電泳技術,這一技術未來也許將為生命科學領域提供新穎的分離技術,這一研究成果

    重測序構建芝麻超高密度圖譜以及花序基因的定位

    連鎖分析尋找QTL位點,是最經典的性狀定位方法。而遺傳圖譜的密度是限制定位精度的其中一個方面。目前,構建圖譜的方法已從基于傳統的SSR、AFLP等基于片段長度多態性的分子標記,過渡到了基于SNP芯片或NGS測序的SNP分子標記。NGS測序最常用的是簡化基因組測序和全基因組重測序,區別在于標記數量的多

    水生所揭示出異育銀鯽“中科3號”培育形成的機制

      異育銀鯽“中科3號”是中國科學院水生生物研究所桂建芳研究員等在鑒定出可區分銀鯽不同克隆系的分子標記,證實銀鯽同時存在單性雌核生殖和有性生殖雙重生殖方式的基礎上,利用銀鯽雙重生殖方式,從D系銀鯽(♀)與A系銀鯽(♂)交配所產后代中篩選出少數優良個體,再經雌核生殖增殖擴群,經多代生長對比養殖試驗評價

    AFLP技術

    實驗概要本實驗介紹了AFLP(amplified fragment length polymorphism)技術。AFLP是一種建立在PCR基礎上的限制性片斷長度多態性分析,是一種重要而有效的分子標記技術。主要試劑AFLP試劑盒、測序膠、銀染試劑主要設備PCR儀、銀染設備實驗步驟1. 總DNA提取(

    第二屆全國藥品質量分析論壇圓滿閉幕

      2011年4月20日,第二屆全國藥品質量分析論壇的第二天,首先進行了為期半天的分會報告,從事化學藥品、生化藥品、中藥、中藥注射劑、藥包材/藥用輔料的專家學者繼續給出了精彩的報告,每場報告后都進行了熱烈的互動交流。下午,來自中國食品藥品檢定研究院的林瑞超教授、江蘇省食品藥品檢驗所的樊夏雷主任、國家

    北京出入境研發出微生物“馬達”快檢技術

    課題研發人員在進行業務研討  俗話說,病從口入。有時人們在外面吃飯鬧個肚子,最多去醫院,買點消炎藥就算了,根本不會想到這可能是由于致病微生物引起的食物中毒事件。對于老百姓來說,微生物引起的食源性疾病其實就在身邊。  但很多時候,看不見的微生物經常會隱匿于食物和各種環境中,稍不留神就可能遭到它們的襲擊

    食品中沙門氏菌的檢測方法

    生吃西紅柿等新鮮的時蔬水果是再平常不過的事了。然而,2008年6月在美國中西部和南部30個州,卻有數百人因生食了從超市或是餐館購買的新鮮西紅柿而出現發燒、腹瀉、腹痛等癥狀,其中有幾十人因病情嚴重需住院,甚至有重癥病人死亡 。這就是2008年發生的“西紅柿事件”,不僅使美國人驚恐不已,也引起

    樣品總RNA的提取

    實驗概要本實驗介紹了樣品總RNA的提取方法。完整RNA的提取和純化,是進行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過程中都有五個關鍵點,即:樣品細胞或組織的有效破碎;有效地使核蛋白復合體變性;對內源RNA酶的

    總RNA的提取

     完整RNA的提取和純化,是進行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過程中都有五個關鍵點,即1):樣品細胞或組織的有效破碎;2),有效地使核蛋白復合體變性;3),對內源RNA酶的有效抑制;4)有

    分子標記方法:AFLP原理和操作步驟

    AFLP原理:AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘

    AFLP分子標記實驗

    其基本原理是:以PCR(聚合酶鏈式反應)為基礎,結合了RFLP、RAPD的分子標記技術。把DNA進行限制性內切酶酶切,然后選擇特定的片段進行PCR擴增(在所有的限制性片段兩端加上帶有特定序列的“接頭”,用與接頭互補的但3-端有幾個隨機選擇的核苷酸的引物進行特異PCR擴增,只有那些與3-端嚴格配對的片

    九大測序平臺對比(一)

    1.sanger企業:Life Technology推出時間:1977年發明,1986年第一臺商業化測序儀主流型號:3730XL樣品要求:PCR產物:濃度≥50ng/ul 體積≥10ul;質粒:含量≥5ug;菌液:體積≥1ml。測序原理:雙脫氧鏈終止法:Sanger法測序的原理就是,每個反應含有所有

    分子標記——AFLP原理和操作步驟

    一、原理AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘末端順

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