方案8通過肽的半胱氨酰化捕獲蛋白質
實驗材料復雜蛋白混合物試劑、試劑盒生物素化試劑生物素化 胰酶消化緩沖變性緩沖液變性 還原緩沖液二硫蘇糖醇(DTT)甲酸碘乙酰胺PBS胰酶儀器、耗材Centricon YM-3冷凍離心機免疫純化的固定化抗生物素親和柱Oasis HLB 抽提柱真空干燥器實驗步驟一、變性、還原和緩沖液置換1.在真空干燥器中濃縮 120 ug 混合蛋白樣品,直至完全干燥。2.將蛋白樣品重新溶解在約 1ml 變性/還原緩沖液中,37°C 孵育 30 min,使樣品變性還原。體積不掃要非常精確,因為在下一步操作中緩沖液還需置換。不過樣品體積越小,需要置換的時間就越短。3.除去還原劑,降低尿素濃度以及除去緩沖液中的干擾成分。用約 4 ml 生物素化/胰酶消化緩沖液置換原液,在 Centricon YM-3 濃縮管中進行(4°C 離心)。二、標記 Biotin-HPDP 和緩沖液置換4.標記所有自由巰基。加入 50ul 4 mmol/L Biotin-HPDP......閱讀全文
方案8-通過肽的半胱氨酰化捕獲蛋白質
實驗材料復雜蛋白混合物試劑、試劑盒生物素化試劑生物素化 胰酶消化緩沖變性緩沖液變性 還原緩沖液二硫蘇糖醇(DTT)甲酸碘乙酰胺PBS胰酶儀器、耗材Centricon YM-3冷凍離心機免疫純化的固定化抗生物素親和柱Oasis HLB 抽提柱真空干燥器實驗步驟一、變性、還原和緩沖液置換1.在真空干燥器
質譜在蛋白質組學中的應用實驗
方案1 蛋白質和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法 方案2 反相微型層析柱的制備實驗 方案3 固定化酶微型層析柱的制備 方案4 用于蛋白質組分析的微毛細管 HPLC 色譜及 ESI —體化裝置的制備和使用 方案5 利用 Nano-LC
氨酰化的結構特點
中文名稱氨酰化英文名稱aminoacylation定 義轉移核糖核酸在氨酰tRNA合成酶和ATP存在下,與氨基酸相互作用進行兩步反應,得到氨酰tRNA的過程。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
簡化細胞凋亡研究的工具
有許多凋亡觸發器,其中包括某些細胞因子,蛋白質 - 蛋白質相互作用和化學品。一旦開始凋亡,線粒體膜電位變化,可以測量通過流式細胞儀使用BD:MitoScreen(JC-1)流式細胞儀檢測試劑盒。 線粒體膜電位導致線粒體膜通透性增加,并釋放出可溶性蛋白,如細胞色素C和親半胱天冬酶的增加。 半胱天冬
半胱天冬酶的結構和功能特點
通常半胱天冬酶以酶原的形式合成,稱為半胱天冬酶原(Procaspases)。在人類基因組中,這個蛋白質家族已知包含至少有12個成員 ,它們參與細胞凋亡、發育、壞死、炎癥等許多重要的生理過程。其英文名稱Caspases來自于半胱氨酸cysteine、天冬氨酸aspartic acid和蛋白酶prote
氨酰化的基本信息
中文名稱氨酰化英文名稱aminoacylation定 義轉移核糖核酸在氨酰tRNA合成酶和ATP存在下,與氨基酸相互作用進行兩步反應,得到氨酰tRNA的過程。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞化學詞匯氨酰化
中文名稱:氨酰化英文名稱:aminoacylation定 義:轉移核糖核酸在氨酰tRNA合成酶和ATP存在下,與氨基酸相互作用進行兩步反應,得到氨酰tRNA的過程。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
怎樣確定一個蛋白質中二硫鍵的位置
二硫鍵位置的確定一般用蛋白酶水解帶有二硫鍵的蛋白質,從部分水解產物中分離出含二硫鍵的肽段,再拆開二硫鍵,將兩個肽段分別測序,再與整個多肽鏈比較,即可確定二硫鍵的位置。常用胃蛋白酶,因其專一性低,生成的肽段小,容易分離和鑒定,而且可在酸性條件下作用(pH2),此時二硫鍵穩定。肽段的分離可用對角線電泳,
雙半胱乙酯注射液的藥理毒理
[sup]99m[/sup]Tc-ECD是中性脂溶性放射性藥物,靜脈注射后,能穿透血腦屏障,其腦內攝取正比于局部血流量,灰質/白質攝取比為4.5:1。注射后5分鐘,腦攝取達注射劑量的6.5%。放射性按雙指數方式從腦中清除,半清除期為1.3小時(40%)和42.3小時(60%)。99mTc-EC
方案11-利用脫水胰酶親和捕獲蛋白質實驗
試劑、試劑盒乙酸牛胰酶CaCl2溴化氰活化的 Sepharose 4BHClKOHNaHCO3NaOHPMSFPBS硫酸鮭精蛋白乙酸鈉三氟乙酸Tris-Cl儀器、耗材透析膜燒結的玻璃漏斗水浴鍋實驗步驟一、ST-Sepharose 親和樹脂的制備二、脫水胰酶的制備三、脫水胰酶親和柱的制備四、樣品制備、
雙半胱乙酯注射液的不良反應
無明顯不良反應。偶見靜脈注藥后面部潮紅,可自行消退。
雙半胱乙酯注射液的注意事項
1.本品應在具有《放射性藥品使用許可證》的醫療單位使用。 2.制備本品應使用新鮮洗脫的锝[99m Tc]發生器洗脫液。 3.本品如發生混濁、出現沉淀,應停止使用。 4.本品采用配體交換法制備,注射用比西酯、注射用亞錫葡庚糖酸鈉及洗脫用氯化鈉注射液,需在制備前從冰箱中取出,放置至室溫,制成锝[99
雙半胱乙酯注射液的成分及性狀
成份 還原的锝[[sup]99m[/sup]Tc]與配體比西酯形成的中性絡合物。 性狀 本品為無色澄明液體。
雙半胱乙酯注射液的適應癥
用于各種腦血管性疾病(梗塞、出血、短暫性缺血發作等),癲癎和癡呆、腦瘤等疾病的腦血流灌注顯像。
大鼠血清、血漿及相關液體樣本中同型半胱...
實驗概要本實驗采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠同型半胱氨酸(Hcy)單克隆抗體的透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HR
蛋白質分子中氨基酸的連接方式
?? 在蛋白質分子中,氨基酸之間是以肽鍵(peptide bond)相連的。肽鍵就是一個氨基酸的α-羧基與另一個氨基酸的α-氨基脫水縮合形成的鍵。 氨基酸之間通過肽鍵聯結起來的化合物稱為肽(peptide)。兩個氨基酸形成的肽叫二肽,三個氨基酸形成的肽叫三肽……,十個氨基酸形成的肽叫十肽,一般將十
氨肽素片的性狀
本品為糖衣片或薄膜衣片,除去包衣后顯黃褐色。
氨肽素片的成分
本品主要成份為氨肽素,系由豬蹄甲經提取制的。
锝[99mTc]雙半胱乙酯注射液
制法(1)一步法臨用前,在無菌操作條件下,依高锝[mT]酸鈉注射液的放射性濃度,取1~4ml注入注射用錫雙半胱乙酯瓶中,充分振搖,使凍干物溶解,靜置15分,即得。(2)二步法臨用前,在無菌操作條件下,依高锝[9mTc]鈉注射液的放射性濃度,取1~4ml注人注射用亞錫葡庚糖鈉瓶中,充分振搖,使凍干物溶
輔酶谷胱甘肽的功能作用
谷胱甘肽(Glutathion) 谷胱甘肽是一個小分子量的胞內三肽,即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸在大多數生物細胞中,谷胱甘肽的主要作用是保護一些蛋白質的巰基以維持它們在還原狀態。谷胱甘肽還在生物體內產生的過氧化氫還原上起一定作用,但這些都不是輔酶的作用。谷胱甘肽也作為一些酶的輔酶而起作用,例
關于生長激素釋放抑制素的介紹
GRIH或SRIF,十四肽,其結構式為丙·甘·半胱·賴·天冬酰胺·苯丙·苯丙·色·賴·蘇·苯丙·蘇·絲·半胱。首先從下丘腦中分離,因抑制垂體生長激素的釋放而得名。實際上,它是多位分布的,既存在于神經中樞及下丘腦,也存在于胃腸道胰腺等組織,具有多方面作用,即發揮如神經遞質樣、激素、旁分泌調節因子等
生長激素釋放抑制素的基本信息和分布應用
GRIH或SRIF,十四肽,其結構式為丙·甘·半胱·賴·天冬酰胺·苯丙·苯丙·色·賴·蘇·苯丙·蘇·絲·半胱。首先從下丘腦中分離,因抑制垂體生長激素的釋放而得名。實際上,它是多位分布的,既存在于神經中樞及下丘腦,也存在于胃腸道胰腺等組織,具有多方面作用,即發揮如神經遞質樣、激素、旁分泌調節因子等效應
锝[99mTc]雙半胱乙酯注射液的類別
放射性診斷用藥。
雙半胱乙酯注射液的藥代動力學
本品從靜脈注射后迅速從血中清除,注藥后2小時和4小時的放射性量分別是注藥后1分鐘的28.5%和2.8%。本品在腦中濃聚快,靜脈注射1分鐘達峰值,10分鐘穩定,15分鐘開始下降10%左右,45分鐘時腦攝取率達到7.4%左右,未進腦的99mTc-ECD經肝、腎代謝成為水溶性物質,從腎中排出。
雙半胱乙酯注射液的性狀及適應癥
性狀 本品為無色澄明液體。 適應癥 用于各種腦血管性疾病(梗塞、出血、短暫性缺血發作等),癲癎和癡呆、腦瘤等疾病的腦血流灌注顯像。
氨肽素片的用法用量
口服。一次5片,一日3次。兒童用藥酌減或遵醫囑。
方案13-膠內蛋白質的酶解和肽段提取實驗
實驗材料在二維凝膠電泳中分離的蛋白質試劑、試劑盒膠內胰酶消化緩沖液三氟乙酸(TFA)儀器、耗材冷凍干燥離心機小離心管水浴鍋實驗步驟1.切下凝膠上的蛋白質點,放人小離心管中。2.以 0.lmol/L NH4HCO3、50% 乙腈(用于胰酶)或 0.05mol/L Tris-HCl(PH9.3)、50%
細胞化學詞匯肽鍵的形成原理
由一氨基酸的羧基與另一氨基酸的氨基脫去一分子水形成的酰氨鍵又稱為肽鍵。肽鍵具有特殊性質。從鍵長看,肽鍵鍵長(0.132nm)介于C—N單鍵(0.146nm)和雙鍵(0.124mm)之間,具有部分雙鍵的性質,不能自由旋轉;從鍵角看,肽鍵中鍵與鍵的夾角均為120°。因此,與肽鍵相連的6個原子(Cn、C、
肽鍵的形成原理
由一氨基酸的羧基與另一氨基酸的氨基脫去一分子水形成的酰氨鍵又稱為肽鍵。?肽鍵具有特殊性質。從鍵長看,肽鍵鍵長(0.132nm)介于C—N單鍵(0.146nm)和雙鍵(0.124mm)之間,具有部分雙鍵的性質,不能自由旋轉;從鍵角看,肽鍵中鍵與鍵的夾角均為120°。因此,與肽鍵相連的6個原子(Cn、C
詳細敘述肽鍵的形成原理
由一氨基酸的羧基與另一氨基酸的氨基脫去一分子水形成的酰氨鍵又稱為肽鍵。 肽鍵具有特殊性質。從鍵長看,肽鍵鍵長(0.132nm)介于C—N單鍵(0.146nm)和雙鍵(0.124mm)之間,具有部分雙鍵的性質,不能自由旋轉;從鍵角看,肽鍵中鍵與鍵的夾角均為120°。因此,與肽鍵相連的6個原子(C