方案11利用脫水胰酶親和捕獲蛋白質實驗
試劑、試劑盒乙酸牛胰酶CaCl2溴化氰活化的 Sepharose 4BHClKOHNaHCO3NaOHPMSFPBS硫酸鮭精蛋白乙酸鈉三氟乙酸Tris-Cl儀器、耗材透析膜燒結的玻璃漏斗水浴鍋實驗步驟一、ST-Sepharose 親和樹脂的制備二、脫水胰酶的制備三、脫水胰酶親和柱的制備四、樣品制備、加樣和洗脫展開......閱讀全文
方案11－利用脫水胰酶親和捕獲蛋白質實驗
試劑、試劑盒乙酸牛胰酶CaCl2溴化氰活化的 Sepharose 4BHClKOHNaHCO3NaOHPMSFPBS硫酸鮭精蛋白乙酸鈉三氟乙酸Tris-Cl儀器、耗材透析膜燒結的玻璃漏斗水浴鍋實驗步驟一、ST-Sepharose 親和樹脂的制備二、脫水胰酶的制備三、脫水胰酶親和柱的制備四、樣品制備、
方案5－蛋白質的胰酶消化實驗
實驗材料凍干的目標蛋白質試劑、試劑盒CaCl2NH4HCO3苯甲基磺酰氟（PMSF)胰酶貯存液Tween-20儀器、耗材聚丙烯試管水浴箱實驗步驟1.凍干的蛋白質底物溶解在 1% 的碳酸氫銨中，控制使用盡量少的溶液體積，以達到較高的底物濃度。當蛋白質底物很微量（如小于 1mg) 時，加入 Tween-
親和層析純化胰酶
一、實驗目的與原理生物大分子化合物的重要特征之一是具有與某些相對應的分子通過次級鍵或共價鍵專一結合的能力即親和力。例如酶與抑制劑之間，抗原與抗體之間，結合的雙方不僅是專一的，而且結合以后可以在不喪失生物活性的基礎上用物理或化學的方法進行解離。根據這一特性，如果把具有親和力的一對分子的某一方連接于水不
質譜在蛋白質組學中的應用實驗
方案1 蛋白質和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法 方案2 反相微型層析柱的制備實驗 方案3 固定化酶微型層析柱的制備 方案4 用于蛋白質組分析的微毛細管 HPLC 色譜及 ESI —體化裝置的制備和使用 方案5 利用 Nano-LC
方案9－蛋白質的同位素親和標簽實驗
實驗材料 透析或沉淀處理蛋白樣品 試劑、試劑盒 DTTEDTAICAT 試劑三丁基膦Tris胰酶 實驗步驟 第一階段 ICAT 標記蛋白 第二階段 陽離子交換清洗 ICAT 樣品 第四階段 ICAT 標記多肽的質譜分析 展開
方案11－膠內蛋白質的硝酸銀染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒乙酸顯影液固定液甲醇硫酸銀水溶液終止反應液儀器、耗材塑料皿搖床實驗步驟1.將凝膠放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者徹底洗過的塑料皿），加入足量的固定液以覆蓋凝膠。固定 20 min, 并輕輕搖動。2.棄掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆蓋膠，輕輕搖動
胰酶
制法要求本品應從檢疫合格的豬、羊或牛胰中提取所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求性狀本品為類白色至微黃色的粉末;微臭,但無霉敗的臭氣;有引濕性;水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。檢查脂肪取本品1.0g,置具塞錐形瓶中,加乙醚10ml,密塞,時時旋動,放置約2小時后,將
胰激肽原酶
制法要求本品應從檢疫合格的豬胰中提取,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求。本品來源于動物,在生產過程中應采用適宜的病毒滅活工藝等方法進行病毒安全性控制。性狀本品為白色或類白色粉末;無臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中幾乎不溶鑒別(1)照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液
胰酶簡介
① 40—55℃時催化淀粉水解作用最大，溫度高于55℃，本身遭破壞。②PH值為6.5—7時活性很大；PH值為4時失去活力；PH值為11值活力最大，但極易被破壞。③ 溶液穩定性差，配液后穩定時間為12h。
蛋白質與免疫親和介質結合實驗
儀器、耗材SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠實驗步驟材料與設備SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠（10%)操作程序1) 將溶解、稀釋的 AMS 沉淀物和洗過的免疫親和介質混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取樣 100-ul。2) 立即離心樣品，留上清，供 SDS-PAGE
蛋白質與免疫親和介質結合實驗
儀器、耗材 SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠 實驗步驟 材料與設備 SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠（10%) 操作程序 1) 將溶解、稀釋的 AMS 沉淀物和洗過的免疫親和介質混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取
蛋白質與免疫親和介質結合實驗
材料與設備SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠（10%)操作程序1) 將溶解、稀釋的 AMS 沉淀物和洗過的免疫親和介質混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取樣 100-ul。2) 立即離心樣品，留上清，供 SDS-PAGE 電泳分析，測
方案8－通過肽的半胱氨酰化捕獲蛋白質
實驗材料復雜蛋白混合物試劑、試劑盒生物素化試劑生物素化 胰酶消化緩沖變性緩沖液變性 還原緩沖液二硫蘇糖醇（DTT)甲酸碘乙酰胺PBS胰酶儀器、耗材Centricon YM-3冷凍離心機免疫純化的固定化抗生物素親和柱Oasis HLB 抽提柱真空干燥器實驗步驟一、變性、還原和緩沖液置換1.在真空干燥器
細胞原代培養實驗——胰酶消化法
細胞原代培養可以：（1）為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；（2）為傳代培養創造條件；（3）服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、
核酸親和層析法純化蛋白質實驗
實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通過它們本身的堿基實現的。從理論上講，該方法也許干擾最佳結合序列的接近路徑，但是這樣一個簡單的方法一直被廣泛地成功應用。偶聯效率的定量檢測可經 A260 值測定評估，或者更精確地從偶聯介質上水解核酸和進行磷酸鹽測定。實
核酸親和層析法純化蛋白質實驗
步驟一 偶聯寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步驟二 核酸親和層析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4
胰酶分離提取
一、原理與目的提取制備酶的經典方法，多采用硫酸銨分級沉淀，胰酶在75%飽和度硫酸銨中沉淀，其它雜蛋白一般在10%硫酸銨飽和度下被沉淀而除去。經此多次提取，最后在PH8.0硼酸緩沖液中得到結晶。胰酶在PH3.0時最穩定，可在低溫下儲存較長的時間而不失活；低與此PH酶易變性；高于PH5時，酶易自溶而失活
親和層析法去除交叉反應性抗體實驗
本節介紹一種利用結合細菌蛋白質的基質去除粗制免疫球蛋白中與細菌編碼蛋白質發生反應成分的方法（de Wet et al.1984)。該方法也適用于利用培養的細胞或組織抽提物去除交叉反應抗體。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒緩沖液和
胰泌素促胰酶素聯合試驗
胰泌素-促胰酶素聯合試驗【參考范圍】見臨床意義。【影響因素】1.不同的研究采用不同劑量的胰泌素（0.25～1.OU/kg）和促胰酶素（1U/kg）組合。2.本試驗的敏感度為74%～90%，結果受被研究者疾病的嚴重性、醫學教|育網搜集整理對照組的情況和刺激劑的劑量、用法等因素的影響。【臨床意義】1.用
胰泌素促胰酶素聯合試驗
胰泌素-促胰酶素聯合試驗 【參考范圍】見臨床意義。 【影響因素】1.不同的研究采用不同劑量的胰泌素（0.25～1.OU/kg）和促胰酶素（1U/kg）組合。 2.本試驗的敏感度為74%～90%，結果受被研究者疾病的嚴重性、醫學教|育網搜集整理對照組的情況和刺激劑的劑量、用法等因素的影響。 【臨床意
核酸親和層析法純化蛋白質實驗2
核酸親和層析實驗材料樣品蛋白質試劑、試劑盒平衡緩沖液（Tris-HClKClEDTA）非特異 DNA實驗步驟在上樣品液到核酸親和柱之前，建議首先采用其他的純化方法，如硫酸銨沉淀、離子交換或凝膠過濾層析等富集目的蛋白。這樣可以除去絕大多數的污染物，并減少非特異結合。親和層析柱一般來講是短而粗的，例如長
核酸親和層析法純化蛋白質實驗1
核酸親和柱的應用極大地促進了核酸結合調節蛋白特性的研究，這些蛋白質涉及基因表達、染色體修復和復制、基因重組等的調控。核酸結合蛋白可以結合單鏈 DNA、雙鏈 DNA 或 RNA。DNA 結合蛋白結合 DNA 可以是序列特異的，也可以是非特異的。此外，含有特異寡核苷酸的親和樹脂能用于某些酶的分離，這些酶
如何選擇合適細胞的消化酶重組胰酶和動物源胰酶
培養細胞的老師們都知道細胞的生命是極其脆弱的在培養過程中有哪些行為是比較傷害細胞的呢？在培養貼壁細胞過程中消化過程在一定程度上是對細胞的一種折磨但是又不得不進行這個過程所以如何做好細胞消化善待細胞們是我們一定要了解的步驟~?胰酶的作用原理胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基
胰酶腸溶膠囊
規格0.15g貯藏遮光,密封,在陰涼干燥處保存性狀本品內容物為類白色至微黃色粉末。檢查干燥失重取本品內容物,在105℃千燥4小時,減失重量不得過7.0%(通則0831)微生物限度取本品,照胰酶項下的方法檢查,應符合規定其他應符合膠囊劑項下有關的各項規定(通則0103)效價測定胰蛋白酶照紫外-可見分光
胰酶的制法要求
本品應從檢疫合格的豬、羊或牛胰中提取所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求
胰酶腸溶片
性狀本品為腸溶片,除去腸溶衣后,顯白色至淡黃色。檢查微生物限度取本品,照胰酶項下的方法檢查應符合規定。其他應符合片劑項下有關的各項規定(通則0101)。效價測定胰蛋白酶照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品原液取本品5片(0.3g規格)或3片(0.5g規格),除去腸溶衣,研細,加冷至5℃以
胰凝乳蛋白酶
實驗方法原理 實驗材料 α-胰凝乳蛋白酶試劑、試劑盒 三甲醇胺-NaOH三甲醇胺-NaOHN-琥珀酰-L-苯丙氨酰對硝基苯胺儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」在 25℃。測定 405 nm 吸光值增加，對硝基苯胺的吸收系數為 ε405＝10.2×103 l（mol · c
胰酶的檢查方法
胰蛋白酶照紫外-可見分光光度法(通則401)測定。氯化鈣溶液取氯化鈣1.47g,加水500ml使溶解,用0.lmol/L鹽酸溶液或0.lmol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至6.0~6.2硼酸鹽緩沖液取硼砂2.85g、硼酸10.5g與氯化鈉2.50g,加水使溶解并制成1000ml,調節pH值至7.5±0
胰凝乳蛋白酶
用 SUPHEPA 測定 用 GLUPHEPA 測定 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 α
方案13－膠內蛋白質的酶解和肽段提取實驗
實驗材料在二維凝膠電泳中分離的蛋白質試劑、試劑盒膠內胰酶消化緩沖液三氟乙酸（TFA)儀器、耗材冷凍干燥離心機小離心管水浴鍋實驗步驟1.切下凝膠上的蛋白質點，放人小離心管中。2.以 0.lmol/L NH4HCO3、50% 乙腈（用于胰酶）或 0.05mol/L Tris-HCl(PH9.3)、50%