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  • 乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗

    實驗方法原理乳酸脫氫酶(LDH)是活細胞胞漿內含酶之一。在正常情況下,不能透過細胞膜。當靶細胞受到效應細胞的攻擊而損傷時,細胞膜通透性改變,LDH可釋放至介質中,釋放出來的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的過程中,使氧化型輔酶I(NAD+)變成還原型輔酶I (NADH2),后者再通過遞氫體-吩嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)還原碘硝基氯化氮唑藍(INT)或硝基氯化四氮唑藍(NBT)形成有色的甲簪類化合物,在490nm或570nm波長處有一高吸收峰,利用讀取的OD值,經過計算即可得NK細胞活性 實驗步驟1.靶細胞制備 取培養24~48h的靶細胞,洗滌3次,最后用完全RPMI-1640培養液調整細胞濃度至1×105/ml,備用。 2.效應細胞的制備 常規方法分離PBMC或小鼠脾細胞,洗滌3次,最后用完全RPMI-1640培養液調整細胞濃度至1×l07/ml。 3.效-靶細胞作用 將效應細胞和靶細胞各0.1ml(E/T......閱讀全文

    乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗

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    乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗

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    乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗

    實驗方法原理 乳酸脫氫酶(LDH)是活細胞胞漿內含酶之一。在正常情況下,不能透過細胞膜。當靶細胞受到效應細胞的攻擊而損傷時,細胞膜通透性改變,LDH可釋放至介質中,釋放出來的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的過程中,使氧化型輔酶I(NAD+)變成還原型輔酶I (NADH2),后者再通過遞氫體-吩嗪

    乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗

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    NK細胞活性測定實驗——乳酸脫氫酶釋放法

    實驗方法原理乳酸脫氫酶(LDH)存在于細胞內,正常情況下,不能透過細胞膜。當細胞受到損傷時,由于細胞膜通透性改變,LDH可從細胞內釋放至培養液中。釋放出來的LDH再催化乳酸的過程中,使氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)變成還原型輔酶(NADH2),后者再通過遞氫體-吩嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)還原碘硝基氯化氮唑

    NK細胞活性測定:LDH法

    實驗方法原理活細胞的胞漿內含有LDH。正常情況下,LDH不能透過細胞膜,當細胞受到NK細胞的殺傷后,LDH釋放到細胞外。LDH 可使乳酸鋰脫氫,進而使NAD還原成NADH,后者再經遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)還原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶標儀上

    NK細胞活性測定:LDH法

    實驗概要活細胞的胞漿內含有LDH。正常情況下,LDH不能透過細胞膜,當細胞受到NK細胞的殺傷后,LDH釋放到細胞外。LDH ?可使乳酸鋰脫氫,進而使NAD還原成NADH,后者再經遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)還原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT ?接受H+被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶標儀上

    NK細胞活性測定:LDH法原理和實驗步驟

    一、原理?活細胞的胞漿內含有LDH。正常情況下,LDH不能透過細胞膜,當細胞受到NK細胞的殺傷后,LDH釋放到細胞外。LDH 可使乳酸鋰脫氫,進而使NAD還原成NADH,后者再經遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)還原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶

    LDH法測定NK細胞活性

    一、原理活細胞的胞漿內含有LDH。正常情況下,LDH不能透過細胞膜,當細胞受到NK細胞的殺傷后,LDH釋放到細胞外。LDH 可使乳酸鋰脫氫,進而使NAD還原成NADH,后者再經遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)還原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶標儀上用4

    大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA檢測法

    大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?LDH?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?LDH與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠LDH,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Strep

    NK細胞活性檢測實驗步驟

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    血清乳酸脫氫酶(LDH)活性測定方法和意義

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    細胞介導細胞毒作用檢測法3:LDH釋放法

    LDH釋放法1)測定方法1.用含5%小牛血清的RPMI-1640培養液將靶細胞調整到5×104~2×105/ml,此濃度需根據情況預先標定。2.在96孔圓底細胞培養板中加入靶細胞,每孔加100μl。3個效應細胞自然釋放對照孔不加靶細胞,只加100μl培養液。3.向各孔加100μl效應細胞,效應細胞與

    NK細胞活性測定實驗——放射性核素釋放

    實驗方法原理用放射性核素標記靶細胞,當靶細胞受到破壞時,放射性核素被釋放出來,通過測定釋放或殘留在未被破壞細胞內的放射性核素放射活性,即可計算和推測殺傷細胞的細胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本實驗采用51Cr釋放法檢測人NK細胞活性。實驗材料靶細胞試劑、試劑盒

    NK細胞活性測定實驗

    實驗方法原理 用放射性核素標記靶細胞,當靶細胞受到破壞時,放射性核素被釋放出來,通過測定釋放或殘留在未被破壞細胞內的放射性核素放射活性,即可計算和推測殺傷細胞的細胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本實驗采用51Cr釋放法檢測人NK細胞活性。實驗材料 靶細胞試劑、試

    血清乳酸脫氫酶(LDH)活性測定的臨床意義是什么

      1.正常參考值  速率法(LDH-L法):100~240 U/L  比色法:190~310 U/L  2.臨床意義:  ①心肌梗塞:心肌梗塞后9~20h開始上升,36~60h達到高峰,持續6~10天恢復正常(比AST、CK持續時間長),因此可作為急性心肌梗塞后期的輔助診斷指標。  ②肝臟疾病:急

    比色法測定血清乳酸脫氫酶(LDH)實驗

    實驗方法原理 乳酸脫氫酶催化L-乳酸脫氫,生成丙酮酸,丙酮酸和2,4-二硝基苯肼反應,生成丙酮酸、二硝基苯腙,在磁性溶液中呈棕紅色,其顏色深淺與丙酮酸濃度成正比,由此計算酶的活力單位。實驗步驟 一、 實驗試劑:1. 底物緩沖液(含0.3mol/L乳酸,PH8.8):稱取二乙醇胺2.1g,加蒸餾水約8

    比色法測定血清乳酸脫氫酶(LDH)實驗

    實驗方法原理乳酸脫氫酶催化L-乳酸脫氫,生成丙酮酸,丙酮酸和2,4-二硝基苯肼反應,生成丙酮酸、二硝基苯腙,在磁性溶液中呈棕紅色,其顏色深淺與丙酮酸濃度成正比,由此計算酶的活力單位。實驗步驟一、 實驗試劑:1. 底物緩沖液(含0.3mol/L乳酸,PH8.8):稱取二乙醇胺2.1g,加蒸餾水約80m

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    乳酸脫氫酶(LDH)的醫學決定水平

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    125IUdR釋放試驗測定NK細胞活性

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    大鼠乳酸脫氫酶(LDH)酶聯免疫分析

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