衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒EcoRI 酶儀器、耗材SGII 培養基實驗步驟1. 500 ml 燒瓶中裝 250 ml SGII 培養基，在通氣和恒定光照條件下，培養細胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切質粒。3. 去細胞壁，低速離心濃縮細胞，在 SGII-NO3 培養基重懸細胞為 109 個/ml。4. 將細胞放入滅菌燒瓶中，剛好蓋上瓶底，在亮光下輕搖 4 個小時。5. 轉化時，將細胞稀釋到 1.7X108 個/ml，取 0.3 ml 加入裝有 0.3 g 玻璃珠的 15 ml 帶塑料帽的圓錐形離心試管中。6. 加入滅菌 PEG 溶液，終濃度為 5%。7. 立即加入 1 μg 線性化的 pMN24 DNA，用旋轉混合儀最高速度旋轉混合 45 秒。8. 立即加入 10 ml SGII-NO3 培養基稀釋交配混合液，將細胞倒入一干凈的 15 ml 試管中，用桌面醫......閱讀全文
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
衣藻的遺傳技術(轉化) ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 EcoRI 酶 儀器、耗材
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒EcoRI 酶儀器、耗材SGII 培養基實驗步驟1. 500 ml 燒瓶中裝 250 ml SGII 培養基，在通氣和恒定光照條件下，培養細胞至 5X106?/ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切質粒。3. 去細胞壁，低速離心濃縮細胞，在 SGII-NO3?培養基重懸細胞為
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒EcoRI 酶儀器、耗材SGII 培養基實驗步驟1. 500 ml 燒瓶中裝 250 ml SGII 培養基，在通氣和恒定光照條件下，培養細胞至 5X106?/ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切質粒。3. 去細胞壁，低速離心濃縮細胞，在 SGII-NO3?培養基重懸細胞為
衣藻的遺傳技術(四分體分析) 實驗
配子發生 交配 合子成熟 合子萌發 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞苔層
衣藻的遺傳技術(四分體分析) 實驗
實驗材料 細胞苔層試劑、試劑盒 蒸餾水儀器、耗材 培養基實驗步驟 1. 在含 M 或 TAP 培養基的瓊脂平板上生長細胞苔層。配子最容易從成熟但不老的細胞苔層獲得。2 周以內的培養物最好，但較老的平板培養物常與一些細胞株一起使用。2. 用接種環取 1 環細胞，重懸在 1 ml 滅菌蒸餾水中。3. 光
衣藻的遺傳技術(四分體分析) 實驗
配子發生 交配 合子成熟 合子萌發 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞苔層
衣藻的遺傳技術(四分體分析) 實驗——交配
實驗材料mt+ 和 mt- 配子儀器、耗材96 孔皿相差顯微鏡或 DIC 顯微鏡實驗步驟1. 在 96 孔皿的 1 個孔中混合基本等量的 mt+ 和 mt- 配子。2. 光照 2 小時，用相差顯微鏡或 DIC 顯微鏡取 1 滴交配混合液分析交配效果。3. 將 1 滴交配混合液滴到瓊脂平板中心。4.
衣藻的遺傳技術(四分體分析) 實驗——合子萌發
實驗材料 合子 儀器、耗材 平板立體解剖顯微鏡 實驗步驟 1. 打開平板包裝，將表面用滅菌的單刃剃刀片刮幾次。 2. 平板光照至少 18 小時。 3. 用立體解剖顯微鏡將合子放到平板上，用纖維光源照亮平板。 4. 用圓頭玻璃針，將萌發的四分體的 4 個細胞推
衣藻的遺傳技術(四分體分析) 實驗——合子成熟
實驗材料合子儀器、耗材平板鋁箔實驗步驟1. 光照 18~24 小時孵育合子。2. 再強力塑料包裝材料包裹平板，再用鋁箔封好，放黑暗中至少 5 天。平板可在黑暗中數月保持活力，也不會干燥。如果 5 天后所有合子萌發形成八細胞，將細胞在黑暗處放更長的時間。黑暗孵育更長時間通常會得到更高的四細胞萌發百分率