抗原和免疫血清的制備實驗——抗人血清抗體的制備
實驗材料家兔試劑、試劑盒羊毛脂石蠟油卡介苗生理鹽水儀器、耗材研缽離心機培養箱實驗步驟1. 弗氏佐劑的制備將羊毛脂與石蠟油按1:5比例混合,高壓滅菌。2. 人血清—弗氏完全的制備將滅菌佐劑一份置研缽中,邊研磨邊滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳劑,研磨要充分,使乳劑滴入冰水中不擴散。3. 免疫動物可采用一次性免疫法,即將抗原與佐劑制成的乳劑分多個點兔背部皮膚,也可注入足底2~4針各0.45毫升,總量約3毫升,一個月后試血。......閱讀全文
抗原和免疫血清的制備實驗——抗人血清抗體的制備
實驗材料家兔試劑、試劑盒羊毛脂石蠟油卡介苗生理鹽水儀器、耗材研缽離心機培養箱實驗步驟1. ?弗氏佐劑的制備將羊毛脂與石蠟油按1:5比例混合,高壓滅菌。2. ?人血清—弗氏完全的制備將滅菌佐劑一份置研缽中,邊研磨邊滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳劑,研磨要充分,使乳劑滴入冰水中
抗原和免疫血清制備實驗—抗紅細胞抗體(溶血素)制備
實驗材料家兔試劑、試劑盒紅細胞懸液生理鹽水阿氏液儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1.? 紅細胞懸液的制備(1) 采血采取的綿羊血與滅菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存數周,也可用抗凝方法(2) 洗滌血球先將抗凝血液離心沉淀(2000 cpm×5分鐘)吸去上清。加入2~3倍的生理鹽水并用毛細滴管反復吹
抗原和免疫血清的制備實驗——抗菌血清的制備
抗體是機體接受抗原刺激后產生的一種具有免疫特異性的球蛋白。在免疫學實踐,為制備抗體常以抗原性物質(細菌、病毒、類毒素、血清及其他蛋白質)給動物注射。經過一定時間后,動物血清中可以產生大量的特異性抗體。這種含有特異性抗體的血清稱為免疫血清。實驗材料家兔試劑、試劑盒普通培養基甲醛鹽水石灰酸鹽水生理鹽水儀
抗原和免疫血清的制備實驗
實驗材料 家兔試劑、試劑盒 普通培養基甲醛鹽水石灰酸鹽水生理鹽水儀器、耗材 標準比濁管離心機實驗步驟 1. 抗原的制備:標準菌株的選擇:所用的菌種傷寒桿菌H901和傷寒桿菌O901應具有典型形態菌落及生化反應。在生理鹽水中不發生自身凝集,與特異血清有高度凝集者可作為菌種。2. 菌液的制備(1)原液制
抗原與免疫血清的制備實驗
將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。
抗原與免疫血清的制備實驗
將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。實
抗原與免疫血清的制備
實驗方法原理 動物產生抗體的量,一方面可因動物的種類、年齡、營養狀況及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面還與抗原的種類、注射量、注射途徑、注射次數以及注射的間隔時間有關。抗原量低到一定限度時,抗體不能產生或用現有方法不能測出,但超過最高限度對抗體的產生反起抑制作用。在最低限度以上,抗體根據抗原量
免疫血清的制備實驗
免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術。高效價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑(如用于制備免疫標記抗體等),也可供特異性免疫治療用。(來源:醫學基礎免疫學實驗指導,主編金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界圖書出版社,1990)??實驗方法原理具有免疫原性的抗原可刺激機體相應B細胞增殖、分化
免疫血清的制備
實驗方法原理 具有免疫原性的抗原可刺激機體相應B細胞增殖、分化形成漿細胞并分泌特異性抗體。由于抗原分子表面的不同決定簇為不同特異性的B細胞克隆所識別,因此由某一抗原刺激機體后產生的抗體,實際上為針對該抗原分子表面不同決定簇的抗體混合物(即多克隆抗體)。另外,抗體的產生具有回憶應答的規律性,現為初次免
兔抗人血清抗體的制備和效價測定
實驗原理?凡能刺激機體產生抗體,并能與抗體發生特異性結合的物質稱為抗原。物質所具有的這種特性稱為抗原性(Antigenicity)。當機體受抗原刺激后,在體液中出現的一種能與相應抗原發生反應的球蛋白,稱免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。含有免疫球蛋白的血清稱免疫血清。?醫學上常
免疫血清制備方法
免疫血清的制備可用于:(1)制備免疫標記抗體等;(2)供特異性免疫治療用等。實驗方法原理具有免疫原性的抗原可刺激機體相應B細胞增殖、分化形成漿細胞并分泌特異性抗體。由于抗原分子表面的不同決定簇為不同特異性的B細胞克隆所識別,因此由某一抗原刺激機體后產生的抗體,實際上為針對該抗原分子表面不同決定簇的抗
免疫血清制備方法(二)
五、結果鑒定?以雙相瓊脂擴散試驗測定所獲免疫血清的抗體效價,并用瓊指免疫電泳鑒定免疫血清中抗體的質量,應產生單一的沉淀弧線。鑒定方法的具體步驟參見有關部分。?六、材料?(一) 動物:健康成年家兔,雄性,體重2~3公斤。?(二) 器材:剪刀、鑷子、注射器(2ml、50ml)附針頭(9號、6號)、稱量瓶
免疫血清制備方法(一)
免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術。高效價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑(如用于制備免疫標記抗體等),也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應答性的機體,常可獲得高效價的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時
抗肽抗體的制備實驗
提高免疫原性肽的抗血清,是最簡單的方法,獲得非隔離的蛋白質的抗體,例如,對來自DNA序列信息的推定蛋白質序列。 這種方法也是有用的,當隔離的抗原是困難或費時,或當抗原是一個大的蛋白家族的成員。實驗步驟: ?將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉
抗肽抗體的制備實驗1
實驗材料抗體試劑、試劑盒磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS儀器、耗材分光光度計離心機實驗步驟1. ?將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液中,置于一個2 ml 的玻璃試管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室溫下溫和攪拌30 min。?2. ?加
抗肽抗體的制備實驗2
實驗材料抗體試劑、試劑盒磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS儀器、耗材分光光度計離心機實驗步驟1. ?將10 mg 的血藍蛋白溶于2 ml pH10的硼酸緩沖液中,置于15 ml 的玻璃試管中,溫和振搖。2. ?加10 μmol 的合成肽。3. ?緩慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液,于室溫
免疫血清的制備及效價測定
實驗概要本實驗制備了抗綿羊紅細胞 (SRBC)的免疫血清并對其效價進行了測定。實驗原理1. ?制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B ?細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B ?細胞系產生該決定簇的
免疫血清的制備及效價測定
實驗概要本實驗制備了抗綿羊紅細胞 (SRBC)的免疫血清并對其效價進行了測定。實驗原理1. ?制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B ?細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B ?細胞系產生該決定簇的
免疫血清的制備及效價測定
制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B 細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B 細胞系產生該決定簇的抗體,因此用抗原免疫機體獲得的免疫血清一般均為多克隆抗體。?制備的免疫血清的質量(特異性、
抗肽抗體的制備
實驗材料 抗體試劑、試劑盒 磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS儀器、耗材 分光光度計離心機實驗步驟 1. ?將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液中,置于一個2 ml 的玻璃試管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室溫下溫和攪拌30 min。?2
免疫學技術:免疫血清制備方法
免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術。高效價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑(如用于制備免疫標記抗體等),也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應答性的機體,常可獲得高效價的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時
血清制備實驗
血清制備實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 血 儀器、耗材
血清制備實驗
抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。實驗材料血儀器、耗材低溫離心機4℃冰箱試管–80℃低溫儲藏箱實驗步驟1. 取血后,37℃下,讓血液凝固1 到2 小時(不加抗凝劑);2. 4℃冰箱過夜(讓
血清制備實驗
實驗材料 血儀器、耗材 低溫離心機4℃冰箱試管–80℃低溫儲藏箱實驗步驟 1. 取血后,37℃下,讓血液凝固1 到2 小時(不加抗凝劑);2. 4℃冰箱過夜(讓血塊固縮);3. 當血清自然析出后, 4℃,3000 轉/分,離心10 分鐘,分離血清,棄去不溶物;4. 將血清移至一干凈試管,并分裝成小份
酶標記抗體或抗原的制備
標記方法應符合:技術方法簡單、產率高,且重復性好;標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性;酶標志物穩定,應避免酶、抗體(抗原)以及酶標志物各自形成聚合物等。 1.戊二醛交聯法:同源雙功能交聯劑 (1)一步法:連接AP。 ①優點:操作簡便、有效,重復性好。 ②缺點:交聯時分子間比例不嚴格,大小
酶標記抗體或抗原的制備
標記方法應符合:技術方法簡單、產率高,且重復性好;標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性;酶標志物穩定,應避免酶、抗體(抗原)以及酶標志物各自形成聚合物等。1.戊二醛交聯法:同源雙功能交聯劑(1)一步法:連接AP。?①優點:操作簡便、有效,重復性好。②缺點:交聯時分子間比例不嚴格,大小不一,影響效果。(
抗原抗體反應的人單克隆抗體的制備
小鼠的單克隆抗體蛋白應用于人體后,作為抗原能引起人的免疫應答,大大降低其生物活性,并可能導致變態反應。因此人源單克隆抗體在臨床治療上有廣泛應用前景,引起人們的普遍興趣。但是人單克隆抗體制備存在許多技術上和倫理上的障礙,如人雜交瘤細胞系不穩定,有些抗原不能對人進行人工免疫,人B細胞只能從外周血中分
若想提供抗原制備抗體,需要提供多少抗原?
① 如果您的抗原是合成多肽,通常需要5mg以上。對于需要做親和純化的項目,需要額外提供3-4mg多肽。提供的多肽要求是凍干粉。② 如果抗原是蛋白,建議您提供3-5mg濃度為1mg/ml以上的蛋白并注明蛋白保存的緩沖液和蛋白濃度。對于需要做親和純化的項目,需要額外提供3-4mg蛋白用于親和純化。 該量
抗磷酸肽的多克隆抗體制備實驗
實驗材料用磷酸肽-BSA 交聯物免疫過的兔的粗制血清試劑、試劑盒PBS/疊氮化物MgCl2儀器、耗材分光光度計透析袋填裝有 BSA-瓊脂糖親和介質的柱子填裝有磷酸酪氨酸親和介質的柱子填裝有同種非磷酸肽親和介質的柱子填裝有同源的磷酸肽親和介質的柱子填裝有陽性-篩選的磷酸肽親和介質的柱子實驗步驟1. 將
抗磷酸肽的多克隆抗體制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 用磷酸肽-BSA 交聯物免疫過的兔的粗制血清試劑、試劑盒 PBS/疊氮化物MgCl2儀器、耗材 分光光度計透析袋填裝有 BSA-瓊脂糖親和介質的柱子填裝有磷酸酪氨酸親和介質的柱子填裝有同種非磷酸肽親和介質的柱子填裝有同源的磷酸肽親和介質的柱子填裝有陽性-篩選的磷酸肽親和介質的