抗原與免疫血清的制備
實驗方法原理 動物產生抗體的量,一方面可因動物的種類、年齡、營養狀況及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面還與抗原的種類、注射量、注射途徑、注射次數以及注射的間隔時間有關。抗原量低到一定限度時,抗體不能產生或用現有方法不能測出,但超過最高限度對抗體的產生反起抑制作用。在最低限度以上,抗體根據抗原量的增加而增加,達到最高限度時,即不再增加。每種類型的抗原,其使用量都是根據經驗而得出的。本實驗的抗原是細菌細胞,采用每毫升中含 9 億個細菌,比較恰當。抗原初次注射后,經一段誘導期,血清內即可找到抗體,以后逐漸上升,抗體量一般不高,然后逐漸下降。但再次注射時,抗體量迅速上升到最高水平,而且維持時間也長。因此,制備抗體一般需要多次注射抗原,才能得到高效價的免疫血清。注射途徑最常用的是靜脈。實驗材料 24 h 培養的大腸桿菌斜面 2 kg 左右的健康雄家兔或未孕的健康雌家兔試劑、試劑盒 硫柳汞0.5% 石炭酸生理鹽水儀器、耗材 M......閱讀全文
抗原與免疫血清的制備
實驗方法原理 動物產生抗體的量,一方面可因動物的種類、年齡、營養狀況及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面還與抗原的種類、注射量、注射途徑、注射次數以及注射的間隔時間有關。抗原量低到一定限度時,抗體不能產生或用現有方法不能測出,但超過最高限度對抗體的產生反起抑制作用。在最低限度以上,抗體根據抗原量
抗原與免疫血清的制備實驗
將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。
抗原與免疫血清的制備實驗
將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。實
抗原和免疫血清的制備實驗
實驗材料 家兔試劑、試劑盒 普通培養基甲醛鹽水石灰酸鹽水生理鹽水儀器、耗材 標準比濁管離心機實驗步驟 1. 抗原的制備:標準菌株的選擇:所用的菌種傷寒桿菌H901和傷寒桿菌O901應具有典型形態菌落及生化反應。在生理鹽水中不發生自身凝集,與特異血清有高度凝集者可作為菌種。2. 菌液的制備(1)原液制
抗原和免疫血清的制備實驗——抗菌血清的制備
抗體是機體接受抗原刺激后產生的一種具有免疫特異性的球蛋白。在免疫學實踐,為制備抗體常以抗原性物質(細菌、病毒、類毒素、血清及其他蛋白質)給動物注射。經過一定時間后,動物血清中可以產生大量的特異性抗體。這種含有特異性抗體的血清稱為免疫血清。實驗材料家兔試劑、試劑盒普通培養基甲醛鹽水石灰酸鹽水生理鹽水儀
抗原和免疫血清的制備實驗——抗人血清抗體的制備
實驗材料家兔試劑、試劑盒羊毛脂石蠟油卡介苗生理鹽水儀器、耗材研缽離心機培養箱實驗步驟1. ?弗氏佐劑的制備將羊毛脂與石蠟油按1:5比例混合,高壓滅菌。2. ?人血清—弗氏完全的制備將滅菌佐劑一份置研缽中,邊研磨邊滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳劑,研磨要充分,使乳劑滴入冰水中
抗原和免疫血清制備實驗—抗紅細胞抗體(溶血素)制備
實驗材料家兔試劑、試劑盒紅細胞懸液生理鹽水阿氏液儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1.? 紅細胞懸液的制備(1) 采血采取的綿羊血與滅菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存數周,也可用抗凝方法(2) 洗滌血球先將抗凝血液離心沉淀(2000 cpm×5分鐘)吸去上清。加入2~3倍的生理鹽水并用毛細滴管反復吹
免疫血清的制備
實驗方法原理 具有免疫原性的抗原可刺激機體相應B細胞增殖、分化形成漿細胞并分泌特異性抗體。由于抗原分子表面的不同決定簇為不同特異性的B細胞克隆所識別,因此由某一抗原刺激機體后產生的抗體,實際上為針對該抗原分子表面不同決定簇的抗體混合物(即多克隆抗體)。另外,抗體的產生具有回憶應答的規律性,現為初次免
免疫血清制備方法
免疫血清的制備可用于:(1)制備免疫標記抗體等;(2)供特異性免疫治療用等。實驗方法原理具有免疫原性的抗原可刺激機體相應B細胞增殖、分化形成漿細胞并分泌特異性抗體。由于抗原分子表面的不同決定簇為不同特異性的B細胞克隆所識別,因此由某一抗原刺激機體后產生的抗體,實際上為針對該抗原分子表面不同決定簇的抗
免疫血清的制備實驗
免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術。高效價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑(如用于制備免疫標記抗體等),也可供特異性免疫治療用。(來源:醫學基礎免疫學實驗指導,主編金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界圖書出版社,1990)??實驗方法原理具有免疫原性的抗原可刺激機體相應B細胞增殖、分化
免疫血清制備方法(二)
五、結果鑒定?以雙相瓊脂擴散試驗測定所獲免疫血清的抗體效價,并用瓊指免疫電泳鑒定免疫血清中抗體的質量,應產生單一的沉淀弧線。鑒定方法的具體步驟參見有關部分。?六、材料?(一) 動物:健康成年家兔,雄性,體重2~3公斤。?(二) 器材:剪刀、鑷子、注射器(2ml、50ml)附針頭(9號、6號)、稱量瓶
免疫血清制備方法(一)
免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術。高效價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑(如用于制備免疫標記抗體等),也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應答性的機體,常可獲得高效價的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時
免疫血清的制備及效價測定
實驗概要本實驗制備了抗綿羊紅細胞 (SRBC)的免疫血清并對其效價進行了測定。實驗原理1. ?制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B ?細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B ?細胞系產生該決定簇的
免疫血清的制備及效價測定
實驗概要本實驗制備了抗綿羊紅細胞 (SRBC)的免疫血清并對其效價進行了測定。實驗原理1. ?制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B ?細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B ?細胞系產生該決定簇的
免疫血清的制備及效價測定
制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B 細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B 細胞系產生該決定簇的抗體,因此用抗原免疫機體獲得的免疫血清一般均為多克隆抗體。?制備的免疫血清的質量(特異性、
抗原制備
不管是制備單抗還是多抗,抗原的設計與制備都是一個非常重要的問題,設計或者制備得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗體來。一個良好的抗原必須具體的條件:(1)分子足夠大。對于多肽或蛋白質類的抗原來說,一個抗原決定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8個氨基酸殘基組成。而平均每5-10kD才有一個表位
免疫學技術:免疫血清制備方法
免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術。高效價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑(如用于制備免疫標記抗體等),也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應答性的機體,常可獲得高效價的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時
抗原的制備方法
實驗概要除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。實驗步驟一、抗原的提取
抗原的制備方法
抗原的制備 除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。 一、抗原的提取
抗原的制備1
抗原的制備 除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。 一、抗原的提取
抗原的制備方法
實驗步驟一、抗原的提取 抗原的制備是一件十分細致的工作,要制備一個高純度的抗原,需要付出艱巨的努力,制備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎科二個方面:①利用混合物中幾個組分分配率的差別將他們分配到可用機械方法分離的兩或幾個物相中
抗原的制備方法
實驗步驟一、抗原的提取抗原的制備是一件十分細致的工作,要制備一個高純度的抗原,需要付出艱巨的努力,制備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎科二個方面:①利用混合物中幾個組分分配率的差別將他們分配到可用機械方法分離的兩或幾個物相中,如
抗原的制備2
2.核酸的分離純化 從細胞中提取核酸后,仍混雜著蛋白質、多糖和各種大小分子核酸同類物。除去這些“雜質”的過程,也就是核酸提純過程。在核酸的分離純化時,為防止核酸大分子的變性降解,必須在0~4℃的低溫條件下操作。核酸酶的水解作用,是過去制備具有活性核酸大分子的嚴重障礙,現普遍采用加入去污劑或加入E
抗原的制備方法2
表2-1 室溫下由S1提高到S2時每升加固體硫酸銨的克數 0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00?0 55 113 114 175 209 242 278 3
ICC用細胞抗原的制備
一、材料和試劑1、0.01M PBS(pH7.4): NaCl 8.0g; KCl 0.2g; Na2HPO4 1.44g; KH2PO4??0.24g; ddH2O至1000ml ; 高壓滅菌,分裝。2、0.25%胰酶:稱取EDTA 0.02g? ?NaCl? ?0.8g??KCl??0.04g?
若想提供抗原制備抗體,需要提供多少抗原?
① 如果您的抗原是合成多肽,通常需要5mg以上。對于需要做親和純化的項目,需要額外提供3-4mg多肽。提供的多肽要求是凍干粉。② 如果抗原是蛋白,建議您提供3-5mg濃度為1mg/ml以上的蛋白并注明蛋白保存的緩沖液和蛋白濃度。對于需要做親和純化的項目,需要額外提供3-4mg蛋白用于親和純化。 該量
皮膚試驗的條件和抗原制備
首先應當制備試驗用抗原,如有合格商品可直接購買。可以作為變應原的物質種類繁多,例如動物皮毛、家禽羽毛、鴿糞、昆蟲、螨類、真菌、花粉、雜草、物理粉塵和各種食品等都可能成為變應原。不同抗原的制備方法不同,但一般包括以下幾個步驟:①收集原料;②粉碎與勻漿;③脫脂與提取;④過濾與分離;⑤分裝保存。分裝保存之
酶標記抗體或抗原的制備
標記方法應符合:技術方法簡單、產率高,且重復性好;標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性;酶標志物穩定,應避免酶、抗體(抗原)以及酶標志物各自形成聚合物等。 1.戊二醛交聯法:同源雙功能交聯劑 (1)一步法:連接AP。 ①優點:操作簡便、有效,重復性好。 ②缺點:交聯時分子間比例不嚴格,大小
酶標記抗體或抗原的制備
標記方法應符合:技術方法簡單、產率高,且重復性好;標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性;酶標志物穩定,應避免酶、抗體(抗原)以及酶標志物各自形成聚合物等。1.戊二醛交聯法:同源雙功能交聯劑(1)一步法:連接AP。?①優點:操作簡便、有效,重復性好。②缺點:交聯時分子間比例不嚴格,大小不一,影響效果。(
免疫血清的分類
免疫血清 immune serum亦稱抗血清。含有抗體的血清制劑。種類很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。