淋巴細胞轉化實驗
淋巴細胞轉化實驗在臨床上應用可用于(1)反映出受試者T細胞總體水平的應答功能,判斷細胞免疫狀態和探討發病機制(2)選擇適宜的移植供體(3)尋找遲發型變態反應的原因(4)估計疾病的療效和預后。實驗方法原理正常機體的T淋巴細胞在體外培養過程中受到特異性抗原或有絲分裂原刺激。可轉化為淋巴母細胞。細胞免疫缺陷時,患惡性腫瘤或某些其他疾病時。轉化率顯然降低。基本原理是采用T淋巴細胞敏感 的刺激物在體外刺激T淋巴細胞,T淋巴細胞受到刺激后可發生形態學和生物化學的變化,部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細 胞,并進行有絲分裂。用形態學法或放射性 核素法檢測T細胞的增值程度,并以此評定相應的細胞功能。實驗材料肝素試劑、試劑盒199培養液小牛血清鏈霉素青霉素PHA儀器、耗材注射器針頭試管吸管離心機實驗步驟1. 采肝素抗凝血1~2毫升(1毫升血中加肝素20單位)充分混勻。37℃靜置1~2小時。紅細胞沉淀后,吸取血漿層并捎帶些紅細胞。移入另一......閱讀全文
EB病毒轉化成淋巴細胞
實驗材料全血試劑、試劑盒刀豆凝集素A儀器、耗材RPMI 生長培養基離心管實驗步驟1. 混合 10 ml 全血和 10 ml RPMI 生長培養基。生長培養基(RPMI1640 800 ml,FBS 200 ml,2 mmol/L-谷氨酰胺,5 μg/ml 兩性霉素,50 μg/ml 慶大霉素)2.
T淋巴細胞轉化試驗的概述
T淋巴細胞轉化試驗:體外培養時,T淋巴細胞在有絲分裂原如植物血凝素(PHA)或刀豆素A(CONA)的刺激下,代謝活躍,增加蛋白質、RNA和DNA的合成,從而轉化為母細胞,部分細胞發生有絲分裂。從而反應T淋巴細胞的免疫功能。T淋巴細胞轉化試驗(T lymphocyte transformation
淋巴細胞轉化率有哪些癥狀
椎體結核,鼻部結核,膀胱結核,結核桿菌血行播散
淋巴細胞轉化試驗的參考值
轉化細胞形態學計數方法:0.50~0.70(50%~70%)
T淋巴細胞轉化試驗參考值
形態學檢測法:60.1%±7.6%。 3H-TdR滲入法:0~2%。 刺激指數(SI)>2為有意義。
淋巴細胞轉化的形態學改變
淋巴細胞轉化率 T淋巴細胞表面有多種受體,在體外培養中加入特異性抗原或非特異性促有絲分裂原的刺激下,細胞代謝和形態可發生一系列變化,如能轉化成體積較大的原淋巴細胞。轉化細胞數量可反映機體細胞免疫功能,測定T淋巴細胞的應答能力,診斷...
T淋巴細胞轉化試驗的詳細介紹
樣本要求 肝素抗凝血5ml,室溫 參考值 形態學檢測法:60.1%±7.6%。 3H-TdR滲入法:0~2%。 刺激指數(SI)>2為有意義。 臨床意義 1、T淋巴細胞在體外培養過程中受有絲分裂原刺激,可轉化成為體積較大的母細胞。計數轉化的細胞可反映機體的細胞免功能。 2、細胞免疫功
影響淋巴細胞轉化試驗細胞轉化率的因素有哪些
⑴、受體細胞轉化的受體細胞一般是限制-修飾系統缺陷的突變株,即不含限制性內切酶和甲基化酶的突變株,它可容忍外源DNA分子進入體內并穩定地遺傳給后代。另外還應根據載體的性質及實驗的目的選擇合適的宿主。此外,受體細胞生長狀態和密度也很重要。不要使用經過多次轉接或儲存于4℃的培養菌。細胞生長密度以剛進
酵母轉化實驗_電穿孔轉化
實驗材料酵母試劑、試劑盒二硫蘇糖醇山梨醇儀器、耗材電穿孔儀器電擊池水浴鍋實驗步驟1. ?實驗前兩天,將轉化用酵母菌株的單菌落接種于5 ml YPD培養基中,30℃過夜培養至飽和。?2. ?轉化前一天晚上,在裝有500 ml YPD培養基的2 L 無菌燒瓶中接種適量的過夜培養液,于30℃劇烈搖動培養過
酵母轉化實驗_乙酸鋰轉化
實驗材料酵母試劑、試劑盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸鋰儀器、耗材搖床水浴鍋轉子離心機培養箱實驗步驟1. ?在開始實驗前2天,接種待轉化的酵母菌株的單菌落于5 ml YPD培養基中,于30℃恒溫搖床,培養過夜。?2. ?轉化的前一天晚上,往1 L 無菌燒瓶中加入300 ml YPAD培養基,然后
酵母轉化實驗
實驗材料?酵母試劑、試劑盒?YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸鋰儀器、耗材?搖床水浴鍋轉子離心機培養箱實驗步驟 1.? 在開始實驗前2天,接種待轉化的酵母菌株的單菌落于5 ml YPD培養基中,于30℃恒溫搖床,培養過夜。?2.? 轉化的前一天晚上,往1 L 無菌燒瓶中加入300 ml YPAD
酵母轉化實驗
實驗材料酵母菌株質粒儀器、耗材YPD 平板SC-ura平板產孢子平板實驗步驟展開
煙草轉化實驗
實驗材料煙草細胞:BY-2實驗步驟1. BY-2?細胞培養BY -2?細胞懸浮培養在搖床上,避光,溫度260 C,轉速130r pm,每7天將?1m l?細胞轉入20m?l新鮮的液體培養基中繼續培養。BY -2?愈傷組織生長在固體培養基上,每3-4周繼代一次。轉基因的懸浮細胞和愈傷組織生長在含相應抗
PHA淋巴細胞轉化試驗的正常值
計數淋巴細胞200個,識別淋巴母細胞(超過正常淋巴細胞2-4倍,核膜清晰,核染質疏松而成細網狀,核仁明顯,胞漿豐富,呈嗜堿性)、過渡型淋巴細胞(體積變化不大,僅為上述明顯核變化)、小淋巴細胞(體積稍大于紅細胞,核染質致密,無核仁),統計其轉化率。皮膚科轉化率正常值大于58%。
淋巴細胞轉化試驗的形態學方法
形態學方法:轉化率=(60.1±7.6)%T淋巴細胞在體外經植物血凝素激活后,可轉化為淋巴母細胞,根據淋巴細胞的轉化情況,可反應機體的細胞免疫水平。淋巴細胞轉化率降低表示細胞免疫水平低下,可見于運動失調性毛細血管擴張癥、惡性腫瘤、何杰金病、淋巴瘤、淋巴肉芽腫、重癥真菌感染、重癥結核、瘤型麻風等。此外
淋巴細胞轉化試驗的基本原理
淋巴細胞轉化試驗是檢測細胞免疫功能的經典試驗。基本原理是采用T淋巴細胞敏感 的刺激物在體外刺激T淋巴細胞,T淋巴細胞受到刺激后可發生形態學和生物化學的變化,部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細 胞,并進行有絲分裂。用形態學法或放射性 核素法檢測T細胞的增殖程度,并以此評定相應的細胞功能。
PHA淋巴細胞轉化試驗的臨床意義
PHA淋巴細胞轉化率下降,是細胞免疫功能降低的反應。此項檢查,皮膚科多用于疾病分型(如麻風)、病情判斷(如皮膚惡性腫瘤)、藥物療效觀察,以及某些免疫缺陷性和變態反應性皮膚病的研究。 異常結果: 免疫功能降低引發的各種癥狀 需要檢查的人群: 疑似麻風、皮膚惡性腫瘤癥狀的病人
淋巴細胞轉化試驗(MTT)原理=材料和方法
(一)原理:四甲基偶氯唑鹽(MTT)可作為線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當有活細胞存在時,線粒體內琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成紫蘭色的甲臢,將結晶的甲臢溶解釋放后,可根據所測的OD值反映活細胞的數量和活性,從而推知待測樣品的水平。(二)材料:MTT、電子天平、PBS液、二甲基亞砜、無菌針頭過濾
淋巴細胞轉化率的注意事項
不合宜人群:一般無特殊人群 檢查前禁忌:一定要配合醫生把姓名寫正確,工整,避免同名或相類似名混淆帶來不便。注意了這些,抽血會更方便、更迅速,能更好地為自己節約診斷時間。 檢查時要求:不要穿袖口過小、過緊的衣服,以避免在抽血時衣袖卷不上來或抽血后衣袖過緊,引起手臂血管血腫。不同的化驗項目要問清
淋巴細胞轉化率的檢查過程
傳統的檢測淋巴細胞轉化率的方法是將全血或所分離的淋巴細胞與促有絲分裂素一起培養一定的時間,觀察淋胞巴細胞轉化為母細胞的比例,從而確定淋巴細胞的轉化率。
淋巴細胞轉化率有哪些相關疾病
幼年型慢性粒細胞白血病,毛細胞白血病,衣原體淋巴肉芽腫,變應性口炎
T淋巴細胞轉化試驗的參考值
形態學檢測法:60.1%±7.6%。 3H-TdR滲入法:0~2%。 刺激指數(SI)>2為有意義。
PHA淋巴細胞轉化試驗的檢查過程
操作方法: 1.取無菌肝素抗凝血0.lml,加入1.8ml細胞培養液中,同時加入1 000μg/m1 PHA 0.1m1,對照管不加PHA,將細胞置37℃、5%CO2培養3d,每天搖動1次。 2.培養結束時吸棄大部分上清液,加入8.5g/L NH4Cl 4ml混勻,置37℃水浴10min。
T淋巴細胞轉化試驗的注意事項
檢測方法可分為3H-TdR摻入法、形態學法和MTT法等。 1、3H-TdR摻入法 T淋巴細胞受PHA或特異性抗原刺激后,發生有絲分裂,細胞進入S期,且伴隨新的DNA合成,若此時加入氚標記的胸腺嘧啶核苷3H-TdR,則3H-TdR可被淋巴細胞作為合成DNA的原料攝入,根據3H-TdR的攝入量,可
PHA淋巴細胞轉化試驗的注意事項
1.培養基成分對轉化率影響較大,注意其有效期。 2.小牛血清用前需滅活。 3.培養時要保證有足夠的氣體,一般10ml培養瓶內液體總量不要超過2ml。 4.PHA劑量過大對細胞有毒性,太小不足以刺激淋巴細胞轉化,試驗前應先測定PHA轉化反應劑量。 5.實驗中要嚴格無菌操作,防止污染。 不
酵母轉化實驗_原生質體轉化
實驗材料酵母試劑、試劑盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG選擇性再生瓊脂儀器、耗材水浴鍋離心機分光光度計培養箱實驗步驟1. ?在實驗前2天,將轉化用酵母菌株的單菌落接種到5 ml YPD培養基中,于30℃培養過夜(如果酵母菌株是溫度敏感的應在低溫下培養)。2. ?轉化前一天晚上,從5 ml 過夜培養
淋巴細胞增殖實驗
淋巴細胞增殖法對于(1)免疫學的研究(2)淋巴細胞的T細胞,吞噬細胞等的功能研究。實驗方法原理淋巴細胞在體外經某種物質刺激,細胞代謝和形態相繼變化,在24——48h細胞內蛋白質和核酸的合成增加,產生一系列增殖的變化,如細胞變化、細胞漿擴大、出現空泡、核仁明顯、核染色質疏松等,由淋巴細胞轉變為淋巴母細
淋巴細胞轉化形態學檢查法
實驗概要本實驗對淋巴細胞的轉化進行了形態學檢查。主要試劑1. 植物血凝素? 目前國內已有成品出售(廣州醫藥工業研究所),可根據需要,作適當稀釋后使用。一般為每毫升培養液加入PHA 50~75μg。也可自制,即從廣東食用紅腎豆(雞子豆)或東北菜豆中提取,經效價滴定后,按每毫升培養液加入0.1m
淋巴細胞轉化試驗有哪些不同的檢測方法
工具/原料 RPMI1640 培養液 Hank's 液 刀豆蛋白A(Concanvalin A, ConA),用RPMI1640 液配成1mg/ml,分裝小瓶,冷凍保存 MTT 1mg/ml 2.5%碘酒、75%酒精 方法/步驟 小鼠脾細胞懸液的制備: 取一個滅菌的平皿,
淋巴細胞轉化試驗的操作與計算方法
形態學方法:轉化率=(60.1±7.6)%T淋巴細胞在體外經植物血凝素激活后,可轉化為淋巴母細胞,根據淋巴細胞的轉化情況,可反應機體的細胞免疫水平。淋巴細胞轉化率降低表示細胞免疫水平低下,可見于運動失調性毛細血管擴張癥、惡性腫瘤、何杰金病、淋巴瘤、淋巴肉芽腫、重癥真菌感染、重癥結核、瘤型麻風等。此外