用于小鼠誘導多能干細胞的逆轉錄病毒的制備及感染
實驗概要用于小鼠誘導多能干細胞的逆轉錄病毒的制備及感染主要試劑0.05%Trypsin、Polybrene、細胞基礎培養液、DPBS、凍存液、Lipo LTX、Opti-MEM、Plat-E培養液、0.1%明膠主要設備35 mm、60 mm、100 mm培養皿;1.5 mL、15 mL、50 mL離心管;0.45 μm濾器、超濾管實驗材料Plat-E細胞:Plat-E是非常重要的逆轉錄病毒包裝細胞系(Ecotropic),全稱是Platinum-E,來源于人胚腎(Human Embryonic Kidney, HEK)293細胞系。主要用于快速、短暫地產生高滴度逆轉錄病毒,同時也能用于穩定地產生逆轉錄病毒。由Plat-E包裝細胞系產生的病毒表達一種單嗜性的被膜,只能感染小鼠和大鼠細胞,因而安全性較高。質粒:pMX-SOX2、pMX-OCT4、pMX-KLF4、pMX-C-MYC和pMX-GFP。這些質粒來源于addgen......閱讀全文
什么是逆轉錄病毒?
逆轉錄病毒(Retrovirus),又稱反轉錄病毒,屬于RNA病毒中的一類,它們的遺傳信息不是儲存在脫氧核糖核酸(DNA),而是儲存在核糖核酸(RNA)上。逆轉錄病毒基因組為二倍體,兩條相同的單股正鏈RNA,其兩端為長末端重復序列(LTR),內含有較強啟動子和增強子,對病毒DNA的轉錄調控具有重
逆轉錄病毒的分類
逆轉錄病毒亞科該亞科中常見的病毒腫瘤病毒亞科??(禽類)rous肉瘤病毒(RSV),rous 相關病毒(RAV),其他雞肉瘤病毒,禽白血病病毒(ALV)(哺乳類)鼠肉瘤病毒(MSV),鼠白血病毒(MLV),鼠內源性病毒,豬肉瘤病毒,牛白血病病毒,豬白血病病毒,鼠乳腺瘤病毒(靈長類)靈長類肉瘤病毒,猴
逆轉錄病毒的特點
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜;2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA;3)含有逆轉錄酶和整合酶;4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒);5)具有gag、pol、env編碼基因,以及長末端重復序列
逆轉錄病毒的結構特征
(1)所有的反轉錄病毒都有一個結構特征,即粗大的球形顆粒,大小為 80~100 nm。并有完好的突起的外膜。(2)反轉錄病毒顆粒的化學成分幾乎是一樣的,RNA 占 2%,蛋白質占 60%~70%,其中 5%~ 7% 是復雜的糖蛋白,脂類為 30%~40%,碳水化合物為 1%~2%。(3)在反轉錄病毒
逆轉錄病毒有哪些特點?
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜; 2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA; 3)含有逆轉錄酶和整合酶; 4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒); 5)具有gag、pol、env編碼基因
簡述逆轉錄病毒的特點
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜; 2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA; 3)含有逆轉錄酶和整合酶; 4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒); 5)具有gag、pol、env編碼基因
關于逆轉錄病毒的簡介
逆轉錄病毒(Retrovirus),又稱反轉錄病毒,屬于RNA病毒中的一類,它們的遺傳信息不是儲存在脫氧核糖核酸(DNA),而是儲存在核糖核酸(RNA)上。逆轉錄病毒基因組為二倍體,兩條相同的單股正鏈RNA,其兩端為長末端重復序列(LTR),內含有較強啟動子和增強子,對病毒DNA的轉錄調控具有重
逆轉錄病毒的結構特征
(1)所有的反轉錄病毒都有一個結構特征,即粗大的球形顆粒,大小為 80~100 nm。并有完好的突起的外膜。(2)反轉錄病毒顆粒的化學成分幾乎是一樣的,RNA 占 2%,蛋白質占 60%~70%,其中 5%~ 7% 是復雜的糖蛋白,脂類為 30%~40%,碳水化合物為 1%~2%。(3)在反轉錄病毒
作為逆轉錄病毒警報的酶
研究人員發現一種叫做環-GMP-AMP合成酶(簡稱cGAS)的特殊的酶可作為一種應對HIV及其它逆轉錄病毒的免疫感測器,它會在出現第一個感染跡象時拉響警報。盡管人們在逆轉錄病毒中有著巨大的生物醫學興趣,但人們就身體對就逆轉錄病毒的先天免疫反應仍然知之甚少,而它又轉而阻礙了疫苗的研發。??????
概述逆轉錄病毒的感染相關
反轉錄病毒的感染能否實現,取決于細胞的特性,細胞的分裂時相以及與病毒有關的受體是否存在。而病毒的感受性則由細胞基因所決定。只有在許多條件都具備時,腫瘤因子才能感染細胞。首先,病毒吸附在細胞表面。在這一過程中,細胞受體及膜蛋白起主導作用,細胞沒有相應的受體就不會被病毒感染。在敏感的細胞里,吸附的病
關于逆轉錄病毒的傳播介紹
反轉錄病毒在自然界的傳播分為水平傳播和垂直傳播。水平傳播是通過個體接觸而傳播,例如貓白血病病毒的傳播。垂直傳播即由上一代向下一代的傳遞,病原體長期在機體內潛伏,不表現出任何特征,也不引起疾病的任何癥狀。只有在特殊條件的影響下,病毒才活躍起來,對宿主而言,就有可能誘發腫瘤的發生發展,以至死亡。這種
逆轉錄病毒介導的基因技術
是目前將外源基因導入細胞的最有效的方法。此系統包括重組逆轉錄病毒載體和包裝細胞兩個部分,廣泛應用的逆病毒載體LNL6是以Moloney鼠白血病病毒(MO-MLV)改建的。該病毒為RNA病毒,感染細胞后,其基因組RNA經逆轉產生雙鏈DNA拷貝插入宿主染色體形成前病毒,前病毒轉錄產生正鏈即為病毒基因組R
逆轉錄病毒的基本概念
逆轉錄病毒(Retrovirus),又稱反轉錄病毒,屬于RNA病毒中的一類,它們的遺傳信息不是儲存在脫氧核糖核酸(DNA),而是儲存在核糖核酸(RNA)上。逆轉錄病毒基因組為二倍體,兩條相同的單股正鏈RNA,其兩端為長末端重復序列(LTR),內含有較強啟動子和增強子,對病毒DNA的轉錄調控具有重要作
逆轉錄病毒介導的基因技術
是目前將外源基因導入細胞的最有效的方法。此系統包括重組逆轉錄病毒載體和包裝細胞兩個部分,廣泛應用的逆病毒載體LNL6是以Moloney鼠白血病病毒(MO-MLV)改建的。該病毒為RNA病毒,感染細胞后,其基因組RNA經逆轉產生雙鏈DNA拷貝插入宿主染色體形成前病毒,前病毒轉錄產生正鏈即為病毒基因組R
逆轉錄病毒的結構特征介紹
(1)所有的反轉錄病毒都有一個結構特征,即粗大的球形顆粒,大小為 80~100 nm。并有完好的突起的外膜。 (2)反轉錄病毒顆粒的化學成分幾乎是一樣的,RNA 占 2%,蛋白質占 60%~70%,其中 5%~ 7% 是復雜的糖蛋白,脂類為 30%~40%,碳水化合物為 1%~2%。 (3)
逆轉錄病毒載體的特點
保留病毒顆粒的包裝信號,而缺失病毒顆粒包裝蛋白基因;它可以克隆并表達外源基因,但不能自我包裝成有增殖能力的病毒顆粒。
逆轉錄病毒介導的基因技術
是目前將外源基因導入細胞的最有效的方法。此系統包括重組逆轉錄病毒載體和包裝細胞兩個部分,廣泛應用的逆病毒載體LNL6是以Moloney鼠白血病病毒(MO-MLV)改建的。該病毒為RNA病毒,感染細胞后,其基因組RNA經逆轉產生雙鏈DNA拷貝插入宿主染色體形成前病毒,前病毒轉錄產生正鏈即為病毒基因組R
逆轉錄病毒的感染途徑分析
反轉錄病毒的感染能否實現,取決于細胞的特性,細胞的分裂時相以及與病毒有關的受體是否存在。而病毒的感受性則由細胞基因所決定。只有在許多條件都具備時,腫瘤因子才能感染細胞。首先,病毒吸附在細胞表面。在這一過程中,細胞受體及膜蛋白起主導作用,細胞沒有相應的受體就不會被病毒感染。在敏感的細胞里,吸附的病毒經
逆轉錄病毒的主要特點
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜;2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA;3)含有逆轉錄酶和整合酶;4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒);5)具有gag、pol、env編碼基因,以及長末端重復序列
簡述逆轉錄病毒的結構特征
(1)所有的反轉錄病毒都有一個結構特征,即粗大的球形顆粒,大小為 80~100 nm。并有完好的突起的外膜。 (2)反轉錄病毒顆粒的化學成分幾乎是一樣的,RNA 占 2%,蛋白質占 60%~70%,其中 5%~ 7% 是復雜的糖蛋白,脂類為 30%~40%,碳水化合物為 1%~2%。 (3)
Nature刷新對逆轉錄病毒的認識
逆轉錄病毒會將自己的遺傳學物質插入被感染細胞,通過這種方式利用細胞的蛋白生產機器,生產病毒蛋白并裝配出新的病毒顆粒。這些新的病毒顆粒隨后又去感染其他細胞。當前最受矚目的逆轉錄病毒無疑是能夠引起艾滋病的HIV。HIV病毒的傳染性很強,其病毒基因會整合到人類免疫細胞并最終將其殺死。 逆轉錄病毒把D
逆轉錄病毒載體的應用優點
(1)逆轉錄病毒結構基因gag、env和pol的缺失不影響其他部分的活性;(2)包裝好的假病毒顆粒易于分離制備;(3)逆轉錄病毒攜帶的遺傳物質高效地進入靶細胞;(4)前病毒通過LTR高效整合至靶細胞基因組中,有利于外源基因在靶細胞中的永久表達。
抗逆轉錄病毒藥物有哪些?
核苷類反轉錄酶抑制劑(NRTIs):這類藥物能選擇性與HIV逆轉錄酶結合,并摻入正在延長的DNA鏈中,使DNA鏈中止,從而抑制HIV的復制及轉錄。常用藥物有疊氮胸苷、拉米夫定、阿巴卡韋、替諾福韋等。 非核苷類反轉錄酶抑制劑(NNRTIs):這類藥物主要作用于HIV反轉錄酶特定位點使其失去活性,
逆轉錄病毒的主要種類和劃分
逆轉錄病毒亞科該亞科中常見的病毒腫瘤病毒亞科??(禽類)rous肉瘤病毒(RSV),rous 相關病毒(RAV),其他雞肉瘤病毒,禽白血病病毒(ALV)(哺乳類)鼠肉瘤病毒(MSV),鼠白血病毒(MLV),鼠內源性病毒,豬肉瘤病毒,牛白血病病毒,豬白血病病毒,鼠乳腺瘤病毒(靈長類)靈長類肉瘤病毒,猴
淺談幾種逆轉錄病毒的檢測方法
按照中國藥典三部中,生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制中表1的要求,逆轉錄病毒是細胞內、外源病毒因子檢查中的重要一環,今天我們將就逆轉錄病毒的檢查要求進行總體介紹,并于后續的推文中逐步介紹其檢查方法。已知雞胚成纖維細胞(CEF)或其他禽源性細胞含有逆轉錄病毒序列,常可產生缺陷型逆轉錄病毒顆
簡述逆轉錄病毒載體的缺點
保留病毒顆粒的包裝信號,而缺失病毒顆粒包裝蛋白基因;它可以克隆并表達外源基因,但不能自我包裝成有增殖能力的病毒顆粒。 (1)隨機整合,有插入突變、激活癌基因的潛在危險; (2)逆轉錄病毒載體的容量較小,只能容納7 kb以下的外源基因。
什么是逆轉錄病毒?它有什么特點?
逆轉錄病毒(Retrovirus),又稱反轉錄病毒,屬于RNA病毒中的一類,它們的遺傳信息不是儲存在脫氧核糖核酸(DNA),而是儲存在核糖核酸(RNA)上。逆轉錄病毒基因組為二倍體,兩條相同的單股正鏈RNA,其兩端為長末端重復序列(LTR),內含有較強啟動子和增強子,對病毒DNA的轉錄調控具有重要作
逆轉錄病毒介導的基因技術的缺陷
①載體的滴度較低;②是輔助病毒與載體病毒重組重新獲得包裝信號使病人面臨感染輔助病毒的危險性;③此載體只能整合至分裂相細胞;④此載體容納的外源基因量較少,不利于較大的基因的插入。
關于逆轉錄病毒載體的優點介紹
(1)逆轉錄病毒結構基因gag、env和pol的缺失不影響其他部分的活性; (2)包裝好的假病毒顆粒易于分離制備; (3)逆轉錄病毒攜帶的遺傳物質高效地進入靶細胞; (4)前病毒通過LTR高效整合至靶細胞基因組中,有利于外源基因在靶細胞中的永久表達。
關于逆轉錄病毒感染的內容介紹
反轉錄病毒的感染能否實現,取決于細胞的特性,細胞的分裂時相以及與病毒有關的受體是否存在。而病毒的感受性則由細胞基因所決定。只有在許多條件都具備時,腫瘤因子才能感染細胞。首先,病毒吸附在細胞表面。在這一過程中,細胞受體及膜蛋白起主導作用,細胞沒有相應的受體就不會被病毒感染。在敏感的細胞里,吸附的病