293fectin?Transfection
實驗概要293fectin? is a proprietary, cationic lipid-based formulation for transfection of DNA into eukaryotic cells. 293fectin? is optimized for transfection of suspension 293 human embryonic kidney cells (e.g. FreeStyle? 293-F cells, Cat. no. R790-07) in defined, serum-free FreeStyle? 293 Expression Medium, and is intended for use with the FreeStyle? 293 Expression System (Cat. no. K9......閱讀全文
Transfection－with－PEI
實驗概要Use PEI (Linear 25 kDa Reagent) to transfect in HEK293T cells.主要試劑PEI is polyethyleimine, a 25 kDa linear from Polysciences Inc. Make up solutio
293fectin?－Transfection
實驗概要293fectin? ?is a proprietary, cationic lipid-based formulation for transfection of ?DNA into eukaryotic cells. 293fectin? is optimized for transfe
Transfection－of－siRNA－oligos－to－peritoneal－macrophages
Use DeliverX Transfection from PanomicsModified protocol belowStep 1:? Make complexesNote:? Do not scale up more than 3xThaw siRNA and DeliverX reagen
Reverse－Transfection－for－Gene－Function－Analysis
This guide describes a microarray-based system for the functional analysis in mammalian cells of many genes in parallel. Mammalian cells are cultured
Transfection－of－Mammalian－Cells－Using－Lipofectamine
Materials:???????LipofectamineBasal Medium containing 10% fetal bovine serum, 1% glutamine, 1% aaBasal Medium containing 1% glutamineBasal Medium cont
Transient－Transfection－of－Cos1－Cells
Transient Transfection of Cos-1 CellsNote:?This protocol has been optimized for Cos-1 cells. Successful transfection of each cell type requires optimi
Transient－transfection－into－293T－cells
PurposeTransient transfection into 293T cells is a convenient way to overexpress and obtain both cellular and extracellular (secreted or membrane) pro
細胞轉染（Cell－Transfection）技術綜述
一、細胞轉染途徑轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于物理介導技術；化學介導方法很多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術；生物介導方法，有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。1、物理介導（1）電穿
BLOCKiT?－Fluorescent－Oligo－as－RNAi－Transfection－Control
實驗概要Intended UseDynabeads? ?Streptavidin are ideal for numerous applications, including ?purification of proteins, nucleic acids purification, protein
Cosmid－Cloning:－Cell－preparation,－DNA－packaging,－and－Cell－Transfection
Cosmid Cloning: Cell preparation, DNA packaging, and Cell TransfectionProtocol taken from Stratagene's Gigapack packaging extracts instruction man
Growth,－Maintenance－and－Transfection－of－Suspension－Adapted－293EBNA－cells
ProcedureI. INTRODUCTIONThe 293 EBNA cell line is established from primary embryonal human kidney cells transformed with sheared human adenovirus type
DNA轉染
DNA轉染·?????????Transfection of Mammalian Cells Using Lipofectamine (LTI)·?????????Guide to Eukaryotic Transfections with Cationic Lipid Reagents?(PDF)
siRNA－轉染程序
?A．siRNA轉染的方法???哺乳動物轉染的常見方法有：磷酸鈣共沉淀、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene、機械法（例如,顯微注射和基因槍）、陽離子脂質體試劑，其中陽離子脂質體試劑轉染法是目前最常用的轉染方法。應用脂質體型轉染試劑進行轉染需要注重的幾個方面：1.???????轉染試劑的用
表皮細胞的轉染實驗技巧
表皮細胞廣泛遍布于身體，正常的表皮細胞較難轉染，尤其是使用基于脂質體技術的轉染試劑。我們使用電轉(Amaxa)方法轉染正常人的結腸表皮細胞并得到了65%的GFP標記細胞。非常感謝SignaGen,現在我們使用GenJet Ver II可以成功轉染正常人的結腸表皮細胞并且轉染效率顯著提高至75%。
Transfecting－Plasmid－DNA－into－NIH3T3－Cells－Using－Lipofectamine?－LTX－Reagent
實驗概要Lipofectamine? ?LTX Reagent is a proprietary, animal-origin free formulation for the ?transfection of DNA into eukaryotic cells with low cytotoxic
選擇GenJetTM，LipoD293TM－－PolyJetTMDNA轉染試劑稀釋溶液小技巧
選擇何種稀釋液稀釋DNA及轉染試劑，對于制備有效的轉染復合物至關重要。除了溫度，孵育時間外，稀釋液的性質對于制備高效的轉染復合物亦非常重要，同樣影響DNA轉染效率。根據我們的實驗數據，使用合適的稀釋液得到的轉染效率是使用錯誤稀釋液轉染效率的至少50倍。更為重要的是，實驗者總是忽視稀釋液的重要性，甚至
如何優化GenMuteTM轉染試劑，提高siRNA/DNA共轉染效率？
GenMuteTM siRNA轉染試劑（Cat#SL100568）是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。siRNA/DNA共轉染時，siRNA的最佳濃度范圍是0.5ηM到10ηM，過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”，切勿使用超過20ηM的siRNA。以24孔板為例，如下步驟將對如何優
Transfecting－Suspension－Cells
實驗概要將轉移基因整合到細胞染色體DNA上,形成穩定表達轉移基因的細胞系。?實驗原理? ? 細胞轉染技術是目前廣泛應用于病毒基因結構與功能以及基因調控等的研究。細胞轉染可分為短暫轉染和穩定(或永久) 轉染兩種。在短暫轉染中,被轉染基因并不整合至細胞染色體中,因而不能隨細胞分裂而傳代。轉入病毒基因的轉
siRNA體外轉染——GenMuteTM－siRNA體外轉染的優化
GenMuteTM siRNA轉染試劑（Cat#SL100568）是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。最佳的siRNA濃度范圍是1.0nM到10nM，過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”。我們實驗室已經使用GenMuteTM轉染試劑成功敲除了內源表達的生長因子。以24孔板為例，如下步
Enzyme－Kinetics－assay－of－the－WT
To assay 17 b-HSD activity in lysates, cells were harvested 48h after transfection using PBS Enzyme Free Cell Dissociation Solution ( specialty Media
轉染L929細胞的簡單步驟
L929是小鼠成纖維細胞瘤細胞株，經常被用來檢測TNF-alpha及TNF-beta。對TNF的處理經常會引發細胞凋亡及死亡，因此L929細胞經常被用作免疫分析。但是，轉染L929細胞非常難，尤其使用基于脂質體技術的轉染試劑，我們使用GenJet VerⅡ及PolyJet轉染L929細胞獲得了7
如何優化LipoD293轉染試劑？
LipoD293DNA轉染試劑是脂質體DNA轉運工具的升級版本。我們實驗室使用LipoD293DNA轉染試劑成功轉染了HepG2，LNCaP，CHO及HEK293細胞。接下來，我們樂意就如何提高轉染效率，降低毒性等方面的小技巧同大家分享。1、LipoD293/DNA的比率。盡管合適的比率由細胞類型決
siRNA用戶手冊
The siRNA user guide??(revised May 6, 2004)?Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequenceUsing Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et
SiRNA用戶指南
Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequenceUsing Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et al. 1999), we have systematically analyzed t
報告基因檢測的精明之選—LipoD293DNA轉染試劑
使用lipoD293轉染試劑來轉染哺乳動物細胞（比如Hela 、PC3），以期檢測熒光酶報告基因，同其他轉染試劑相比較，您會得到更多的熒光酶讀數，更少的細胞死亡率。使用unsupplemented RPM11640/DMEM替代Opti-MEM培養基來稀釋lipoD293及DNA（luciferas
Green－Fluorescent－Protein－as－an－Indicator－ofTransfection－in－Chicken－Embryos
Green fluorescent protein (GFP) is responsible for the bioluminescence of the Pacific Northwest jellyfish, Aequorea victoria. In A.victoria, the 27-kD
如何優化PolyJet轉染試劑？
我們使用PolyJet DNA轉染試劑轉染表皮細胞及Raw267.4細胞非常有效，并且毒性很小。對于如何更好的優化PolyJet轉染試劑，我樂意分享以下幾點：1、DNA的質與量。DNA的純度對于轉染實驗至關重要。由E Coli制備的DNA，A260/280必須達到1.80甚至更高。對于6孔板，通常每
96well－Plate－Dual－Luciferase－Assay96孔板熒光素酶檢測
Reagents: Plasmids: can be found in my plasmid(1) box in the ?20oC freezer. 985 : FR-tk-luciferase 2517 : Renilla-tk-luciferase 2145 : GFP Lipfectami
xCELLigence系統實時監測低毒性XtremeGENE－DNA轉染實驗（二）
■??終點法分析，轉染約72h后通過細胞增殖試劑盒WST-1分析確定細胞活性（圖3）。與X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP Transfection Reagent相比，其他試劑轉染細胞后，顯著降低代謝活力，顯示出細胞毒性效應。圖3：比較羅氏X-tremeGENE 9和X-tr
如何有效地降低PepMuteTM，GenMuteTM－and－PepMuteTM－Plus－siRNA轉...
如何有效地降低PepMuteTM，GenMuteTM and PepMuteTM Plus siRNA轉染試劑的毒性PepMuteTM，GenMuteTM 及 PepMuteTM Plus轉染試劑，僅被發現在DMEM基礎細胞培養基中偶有毒性，使用其他的培養基（含10%FBS及抗生素）培養細胞，將基本