96wellPlateDualLuciferaseAssay96孔板熒光素酶檢測
Reagents: Plasmids: can be found in my plasmid(1) box in the ?20oC freezer. 985 : FR-tk-luciferase 2517 : Renilla-tk-luciferase 2145 : GFP Lipfectamine and lipofectamine plus reagents: in the upper shelf of the medium freezer in tissue culture room. DMEM-10 D20F: 100ul for one well Protocol : I pick up colonies and grow them in 24well plate. One ml medium each well. Once the cells of most of the wells are more tha......閱讀全文
熒光素和熒光素酶是什么
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發和發射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統
熒光素酶的分析
螢光素或螢光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產生螢光的底物和其對應的酶的統稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發光反應。最為人所知的發光生物是螢火蟲,而其所采用不同的螢光素酶與其他發光生物如螢光菇(發光類臍菇,Omphalotus oleariu'
熒光素酶的測定
實驗方法原理 熒光素 4-單氧酶(ATP-水解)提取于螢火蟲,Photinus Pyralis。熒光素+ATP+O2→氧和蟲熒光素+PPi+H2O+光光密度 I 是和 Michaelis-Menten 等式相關的式中,H 是 Planck 常量;v 是發射光的頻率。當 ATP 濃度非常低([ATP]
雙熒光素酶驗證
miR 和LncRNA/circRNA/mRNA 結合雙熒光素酶驗證方案 一、 檢測原理全基因合成 miR 潛在結合位點上下游~500bp( LncRNA、circRNA 或 mRNA 的3’UTR)野生形式 WT 及結合位點的突變形式 Mut,克隆到 psiCHECK-2 多克隆位點處
96well-Plate-Dual-Luciferase-Assay96孔板熒光素酶檢測
Reagents: Plasmids: can be found in my plasmid(1) box in the ?20oC freezer. 985 : FR-tk-luciferase 2517 : Renilla-tk-luciferase 2145 : GFP Lipfectami
什么是雙熒光素酶
熒光素酶(Luciferase)是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
熒光素酶的測定實驗
實驗方法原理熒光素 4-單氧酶(ATP-水解)提取于螢火蟲,Photinus Pyralis。熒光素+ATP+O2→氧和蟲熒光素+PPi+H2O+光光密度 I 是和 Michaelis-Menten 等式相關的式中,H 是 Planck 常量;v 是發射光的頻率。當 ATP 濃度非常低([ATP]<
什么是雙熒光素酶
熒光素酶(Luciferase)是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
什么是雙熒光素酶
熒光素酶(Luciferase)是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
熒光素酶的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 熒光素 4-單氧酶(ATP-水解)提取于螢火蟲,Photinus Pyralis。熒光素+ATP+O2→氧和蟲熒光素+PPi+H2O+
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
熒光素酶檢測(Luciferase-assay)
Introduction Luciferase can be used as a reporter gene to measure the activity of promoters, and/or the transfection efficiency. Aims You will be prov
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
熒光素酶互補(Luc)實驗
【導入】基于熒光素酶(Luciferase)的發光原理,形成了雙熒光素酶報告基因檢測系統。該系統包括螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase)和海參熒光素酶(Renilla luciferase)。兩者可與各自的底物發生氧化作用產生生物熒光,產生的熒光值即表示兩種酶的表達量多少。圖片來源
“熒光素,熒光素酶,能態,基態”是什么意思
免疫熒光法免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位,檢測出抗原或抗體。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素(fluorecein isothiocyante,FITC
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
關于熒光素酶的基本介紹
螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,其中最有代表性的是一種學名為Photinus pyrali'的螢火蟲體內的螢光素酶,螢火蟲發光的腹部或海洋的藍色發光波浪將大自然中生物發光奇跡呈現于世。在生物化學和分子生物學的早期,這一現象被認為是發展生物分
熒光素酶的種類以及應用
在細胞和基因的微觀世界中研究探索,遺傳報告基因是非常有用的"可視化和量化"工具,具有廣泛的應用。熒光素酶(螢光素酶)以出色的靈敏度、使用方便、可以定量檢測而成為理想的報告基因。熒光素酶不是特定的分子,是一類中能催化產生生物發光的酶的統稱,不同來源的熒光素酶各有特點,可催化底物發出不同顏色的光,有的還