(二)乳過氧化物酶法(LPO) 本法反應溫和,對抗原、抗體免疫活性影響小,已被廣泛應用。缺點是標記率較低,一般為20~40%。 1.原理此法是利用乳過氧化物酶(Lactoperoxidase)有促進微量過氧化氫對125I-的氧化作用,生成125I+,并標記在多肽、蛋白質酪氨酸分子上。 2.方法以標記蛋白質抗原為例。 (1)反應液組成:蛋白質2~5μg溶于磷酸緩沖液10~25μl中,加入Na125i 1m Ci(10μl)、乳過氧化物酶溶液25ng(10μl)、H2O2200ng(10μl); (2)在室溫保溫7min; (3)加入H2O2200ng(10μl); (4)過7min再加入H2O2(3μl); (5)保溫7min后,加入0.5ml、10mmol/L巰基乙醇以停止反應; (6)10min后加入NaI載體溶液1ml ; (7)按常規方法分離純化。 3.注意事項 (1)LPO質量好壞,可直接影響標記......閱讀全文
蛋白質與多肽激素的放射免疫分析第一節 概述 1960年,美國學者Yalow 和Berson 創立了放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA),并首先用于糖尿病人血漿中胰島素含量的測定。這是醫學和生物學領域中方法學的一項重大突破,開辟了醫學檢測史上的一個新紀元。它使得那些原先認為是無法
在RIA中,標記抗原質量的優劣,直接影響測定結果,必須制備比放射性強、純度高的標記抗原,并保持免疫活性不受喪失。 一、同位素的選擇 同位素有穩定性和放射性兩種。放射性同位素可利用其衰變時放出的放射線進行測量,這種測量較靈敏而方便,故多用放射性同位素。標記抗原,常用的放射性同位素有3H、14C、1
郝繁運 綜述 中國誤診學雜志 2007年 第一期 第五次全國中青年檢驗醫學學術會議論文匯編 摘要:本文主要介紹了酶免疫分析的發展現狀,從酶免疫分析標記技術若干環節的技術進步、在方法學上與現代化技術的融合與發展、酶免疫分析技
一、放射免疫分析的基本試劑 (一)標準品 標準品是放射免疫分析法定量的依據,由于以標準品的量用來表示被涮物質的量,故標準品與被測物質應當化學結構一致并具有相同免疫活性。標準品作為定量的基準。應要求高度純化。標準品除含量應具有準確性外,還應具備穩定性,即在合理的貯存條件下保持原來的特性。 按實
(四)磁性分離法 1975年,Hersh報道了用磁化分離技術分離血清狄高辛放免測定的B、F后,受到了廣泛的重視。近年來國內外許多學者對磁化顆粒的制備進行了系統地研究,應用于B與F的分離,并取得了引人注目的進展,使放免的B、F分離不再使用離心,縮短了放免操作時間,便于放免自動化測量。磁性分離的具體
腫瘤具有高死亡率、高轉移率和高復發率,是危害人類健康的重大疾病。診斷腫瘤的傳統方法有病理組織活檢、核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、電子計算機斷層掃描(computed tomography,CT)、B 超、X 線胸片、內鏡檢查等。這些檢查對于腫瘤早期
腫瘤具有高死亡率、高轉移率和高復發率,是危害人類健康的重大疾病。診斷腫瘤的傳統方法有病理組織活檢、核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、電子計算機斷層掃描(computed tomography,CT)、B 超、X 線胸片、內鏡檢查等。這些檢查對于腫瘤早期
一、放射免疫分析的基本試劑(一)標準品標準品是放射免疫分析法定量的依據,由于以標準品的量用來表示被涮物質的量,故標準品與被測物質應當化學結構一致并具有相同免疫活性。標準品作為定量的基準。應要求高度純化。標準品除含量應具有準確性外,還應具備穩定性,即在合理的貯存條件下保持原來的特性。按實驗要求,將標準
作者:汪 欣,趙素萍 作者單位:350003 福建福州,福建省第二人民醫院檢驗科【摘要】 目的 探討美國雅培公司的AXSYM全自動免疫分析儀和i2000型全自動免疫分析儀及其配套試劑檢測血清CA19-9結果的差異。方法 AXSYM全自動免疫分
根據WHO資料,全球范圍內惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因,占總死亡人數的22%,并逐年增加。10種常見腫瘤:胃癌、肝癌、食管癌、結直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發現、早期診斷、早期治療是患者獲得長期生存的最主要途徑。以肝癌為例,腫瘤直徑<
根據WHO資料,全球范圍內惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因,占總死亡人數的22%,并逐年增加。 10種常見腫瘤:胃癌、肝癌、食管癌、結直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發現、早期診斷、早期治療是患者獲得長期生存的最主要途徑。以肝癌
隨著基礎醫學深入研究,高新科技檢測技術在檢驗醫學的廣泛應用,使國內血液各項檢查項目水平明顯提高,但相比之下,先進的技術及方法在體液學常規檢查中應用較少,為了提高我國體液學檢測水平,現將近年來國內外進展綜述如下。 一、尿液沉渣檢查及尿液蛋白分析 1.尿沉渣檢驗方法學進展主要是顯微鏡檢查的標準化和沉
(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混
(二)正式實驗階段 1.選擇放射性同位素的劑量 同位素必須能經得起稀釋,使其最后樣品的放射性不能低于本底,一般來說放射性同位素在生物體內不是完全均勻地被稀釋,可能在某些器官、組織、細胞、某些分子中有選擇性地蓄積,蓄積的部分放射性就會很強,在這種情況下,應以相關部位對示蹤劑的蓄積率來考慮示蹤劑用量
【摘要】 采用鏈霉親和素包被磁納米粒子,將生物素標記的特異性抗體偶聯在磁納米粒子上,制備出高特異性的磁納米探針;利用此探針對人絨毛膜促性腺激素(HCG)進行測定,建立了定量檢測蛋白類激素的化學發光分析方法。利用紫外可見分光光度計、透射電鏡及動態檢驗地帶網光散射儀對磁納米探針進行表征,同時
思考題 1. 酶聯免疫吸附實驗的基本原理是什么?常用方法有那些? 2. 間接法和直接法相比各有什么優缺點? 放射免疫測定法—— 125 I 標記技術 放射免疫測定 (radioimmunoassay, RIA) 是將同位分析的高靈敏度與抗原抗體
質譜技術 (mass spectrometry) 是分離和檢測帶電粒子質荷比的分析技術。隨著離子源及質量分析器技術的變革、質譜儀器設計的快速改進等,質譜技術已成為化學分析領域和生命科學領域非常有效的分析工具,尤其在醫學檢驗中的應用越來越為廣泛和深入。 由于質譜技術的高特異性、高靈敏度、單次分析
質譜技術 (mass spectrometry) 是分離和檢測帶電粒子質荷比的分析技術。隨著離子源及質量分析器技術的變革、質譜儀器設計的快速改進等,質譜技術已成為化學分析領域和生命科學領域非常有效的分析工具,尤其在醫學檢驗中的應用越來越為廣泛和深入。 由于質譜技術的高特異性、高靈敏度、單次分析
質譜技術 (mass spectrometry) 是分離和檢測帶電粒子質荷比的分析技術。隨著離子源及質量分析器技術的變革、質譜儀器設計的快速改進等,質譜技術已成為化學分析領域和生命科學領域非常有效的分析工具,尤其在醫學檢驗中的應用越來越為廣泛和深入。 由于質譜技術的高特異性、高靈敏度、單次分析
第一部份:時間分辨的原理、我國乙肝兩對半的流行情況及時間分辨在乙肝兩 對半上 的應用技術 一、時間分辨熒光分析( Time-resolved Fluorescence Immunoassay TRFIA )的基本原理。 TRFIA 是用三價稀土離子及其螯合劑作為示蹤物,如 銪 ( Eu3+ )
第一部份:時間分辨的原理、我國乙肝兩對半的流行情況及時間分辨在乙肝兩 對半上 的應用技術一、時間分辨熒光分析( Time-resolved Fluorescence Immunoassay TRFIA )的基本原理。 TRFIA 是用三價稀土離子及其螯合劑作為示蹤物,如 銪 ( Eu3+ )、 鋱
實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大