MTT實驗兩年心得
MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法，由于細胞活力與細胞數呈正相關，因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT的原理：活細胞有琥珀酸脫氫酶，將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多，筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。1、培養好細胞點板。養細胞沒啥好說的，如果不知道細胞如何養，那就看看相關的文獻方法。如果知道了細胞的名字，就可以上www.atcc.org檢索細胞的培養信息，這個網站上的培養方法是標準培養方法。當然可以根據自己實驗要求進行修改。由于細胞計數很繁瑣，點板時的細胞濃度是最難掌握的，這一點筆者的心得如下：自己先將細胞養一段時間，大概了解細胞的增殖情況，在MTT檢測時實際上要求細胞大概能長滿96-孔板的80-90%，如果打算養48小時就檢測，根據細胞的生長情況反推點板時的細胞濃度狀況。這時可以將細胞不進行計數，將消化好的細胞混勻后（可能是10 ml）直接在一個廢棄（最好進行過無菌處理）的96孔板中依次加入1......閱讀全文
MTT實驗兩年心得
MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法，由于細胞活力與細胞數呈正相關，因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT的原理：活細胞有琥珀酸脫氫酶，將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多，筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。1、培養好細胞點板。養細胞沒啥好說的，如果不知道細胞如何養，那就看
MTT實驗心得
MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法，由于細胞活力與細胞數呈正相關，因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT的原理：活細胞有琥珀酸脫氫酶，將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多，筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。1、培養好細胞點板。養細胞沒啥好說的，如果不知道細胞如何養，那就看
細胞增殖檢測：MTT法心得
MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法，由于細胞活力與細胞數呈正相關，因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。一、MTT的原理活細胞有琥珀酸脫氫酶，將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多，筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。二、MTT法檢測細胞增殖實驗的注意事項1、培養好細胞點板養細胞沒
MTT分析實驗
實驗概要本實驗介紹了一種檢測細胞存活和生長的方法- MTT分析實驗。實驗原理MTT是一種粉末狀化學試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo ?(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，漢語化學名為 ?3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二
四唑鹽（MTT）比色實驗——MTT法
實驗方法原理活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色結晶物，用酶聯免疫檢測儀在490? nm 波長處測定其光吸收值，可間接反映細胞數量。在一定細胞數范圍內，MTT結晶物形成的量與細胞數成正比。?實驗材料細胞
MTT法實驗原理
原理：活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。
MTT法實驗原理
原理：活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。
關于MTT實驗總結
MTT分析法以活細胞代謝物還原劑3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑藍為基礎。MTT為黃色化合物，是一種接受氫離子的染料，可作用于活細胞線粒體中的呼吸鏈，在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用下tet
MTT法實驗步驟
貼壁細胞1、收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度至1000-10000孔，（邊緣孔用無菌PBS填充）。2.、5%CO2，37℃孵育，至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）,加入濃度梯度的藥物,原則上，細胞貼壁后即可加藥，或兩小時，或半天時間，但我們常在前一天下午鋪板
3’RACE－實驗心得
引子：從06年12月份開始，斷斷續續做了一個多月的3’RACE，有了一些心得和體會。期間看了很多前輩們分享的經驗，受益匪淺。在這里，我就自己的經歷略作總結，希望能給像我一樣的新人們有點啟示，少走些彎路，不當之處歡迎指正。一、試劑盒的選擇：3’RACE從原理上就能明白，它比5’RACE 要容易得多，所
MTT實驗原理和實驗步驟
MTT原理：MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，是一種黃顏色的染料。活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶能夠代謝還原MTT，同時在細胞色素C的作用下，生成藍色（或藍紫色）不溶于水的甲臜（Formaza
MTT法實驗原理與MTT－溶液的配制方法
通常，此法中的mtt濃度為5mg/ml。因此，可以稱取mtt0.5克，溶于100ml的磷酸緩沖液(pbs)或無酚紅的培養基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。需要注意的是，mtt法只能用來檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細
MTT法實驗原理與MTT－溶液的配制方法
原理：活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。
MTT法實驗原理與MTT溶液的配制方法
通常，此法中的mtt濃度為5mg/ml。因此，可以稱取mtt0.5克，溶于100ml的磷酸緩沖液(pbs)或無酚紅的培養基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。需要注意的是，mtt法只能用來檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細
mtt實驗中細胞處于什么狀態時加入mtt
要進行預實驗檢測其貼壁率、MTT，盡量無菌操作，細胞會由增殖期漸漸趨向G0期而趨于靜止，才能保證MTT結晶形成數量與細胞數呈的線性關系。要根據自己的實際情況調整。用含15%胎牛血清培養液培養細胞時，太少觀察不到差異。一定要多看文獻，不能測定細胞絕對數，以保證培養終止致細胞過滿，可能你用的時間和濃度根
MTT法實驗原理與MTT溶液的配制方法
通常，此法中的mtt濃度為5mg/ml。因此，可以稱取mtt0.5克，溶于100ml的磷酸緩沖液(pbs)或無酚紅的培養基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。需要注意的是，mtt法只能用來檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細
Realtime－PCR實驗心得和RNA提取心得
并不是所有的實驗都可以做real－time的，技術路線要選好當你的基因表達量少或有些不表達具體就是做普通pcr跑膠條帶比較弱，不是很亮的情況下個人覺得最好不要選擇real，不容易做好，特別是融解曲線用sbgr green染料做的話，引物設計時擴增片斷最好小于250bp，太長了不好擴預實驗先rt－pc
mtt的實驗方法
⒈選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MT
mtt的實驗方法
⒈選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MT
四唑鹽（MTT）比色實驗
MTT法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色
四唑鹽（MTT）比色實驗
MTT法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色
MTT法檢測細胞生長實驗
?? MTT法也就是MTT比色法，這種方法就是用來檢測檢測細胞存活和生長的。? ? 這個方法中的MTT濃度為5mg/ml，可以稱取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃ 避光保存即可。您在配制和保存的過程中，容器用
關于藥物分析降解實驗心得
今天我們說說5種條件下的降解實驗及深入的討論降解實驗，是否可以參照破壞試驗?破壞試驗的目的是什么?實驗條件的設置要注意什么?等等問題。 降解實驗也就是通過高溫、酸、堿、氧化等實驗條件對其產品進行產物降解，也屬于破壞性實驗，主要看都能產生哪些雜質。 1、酸降解試 一般選擇0.1N的鹽酸，在
基于－MTT－的細胞毒性實驗
實驗方法原理 將指數生長期的細胞暴露在細胞毒性藥物中，暴露的持續時間通常決定于產生最大損傷所需的時間，但是它也受藥物穩定性的影響。將藥物撤除后，讓細胞再增殖 2~3 個群體倍增時間（PDT )，這樣就可以把能夠增殖的存活細胞與那些不能增殖的存活細胞區別開來。然后用 MTT 染料還原反應測定存
基于－MTT－的細胞毒性實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將指數生長期的細胞暴露在細胞毒性藥物中，暴露的持續時間通常決定于產生最大損傷所需的時間，但是它也受藥物穩定性的影響。將藥物撤除后，讓細胞再增殖 2~3 個群體倍增時間（PDT )，這樣就可以把能夠增殖的存活細胞與那些不能增殖
基于－MTT－的細胞毒性實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將指數生長期的細胞暴露在細胞毒性藥物中，暴露的持續時間通常決定于產生最大損傷所需的時間，但是它也受藥物穩定性的影響。將藥物撤除后，讓細胞再增殖 2~3 個群體倍增時間（PDT )，這樣就可以把能夠增殖的存活細胞與那些不能增殖
基于－MTT－的細胞毒性實驗
實驗方法原理將指數生長期的細胞暴露在細胞毒性藥物中，暴露的持續時間通常決定于產生最大損傷所需的時間，但是它也受藥物穩定性的影響。將藥物撤除后，讓細胞再增殖 2~3 個群體倍增時間（PDT )，這樣就可以把能夠增殖的存活細胞與那些不能增殖的存活細胞區別開來。然后用 MTT 染料還原反應測定存活細胞的數
mtt實驗法注意事項
加藥時間主要看你的實驗目的、細胞的生長速度以及你的鋪板密度。MTT最好還是吸出來，因為倒的力度太小，溶液倒不干凈；力度太大又可能把結晶也倒掉了。如果用槍頭吸取，可以傾斜30度慢慢地吸，一定不要把結晶吸出來，也可以用注射器吸取。總的原則就是既要把MTT溶液吸干凈，又不能讓結晶有所損失，否則都將影響最后
MTT實驗前期細胞密度如何確定
⒈選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MT
MTT實驗前期細胞密度如何確定
⒈選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MT