細胞培養——細胞保藏
Working Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank Master Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a master cell bank Freezer and Cell Line Database (contributed by Nanci Donacki)Very useful Microsoft Access database program (486kb) for managing your cell li......閱讀全文
細胞培養——細胞保藏
Working Cell Bank?(Contributed by?Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank????Master Cell Bank?(Contributed by?Na
菌種保藏實驗_沙土保藏法
實驗方法原理微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。?選用優良菌株，根據生理生化特征干燥菌種使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態，生長繁殖受抑制從而降低變異率。此法多用于能產生孢子的微生物如霉菌
菌種保藏實驗_濾紙保藏法
實驗方法原理微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。?選用優良菌株，根據生理生化特征隔絕空氣使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態，生長繁殖受抑制從而降低變異率。細菌、酵母菌、絲狀真菌均可用此法保
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
菌種保藏實驗_液氮冷凍保藏法
實驗方法原理微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。?選用優良菌株，根據生理生化特征通過低溫使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態，生長繁殖受抑制從而降低變異率。此法除適宜于一般微生物的保藏外，對
菌種保藏實驗_液體石蠟保藏法
實驗方法原理微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。選用優良菌株，根據生理生化特征隔絕空氣使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態，生長繁殖受抑制從而降低變異率。此法實用而效果好。霉菌、放線菌、芽孢
菌種保藏實驗_斜面低溫保藏法
實驗方法原理微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。選用優良菌株，根據生理生化特征創造一個低溫環境使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態，生長繁殖受抑制從而降低變異率。此法為實驗室和工廠菌種室常用
動物細胞培養——細胞培養介紹
實驗方法原理目的細胞培養的評判性檢查。應用檢查常規維持的一致性；在復蘇、傳代、凍存前培養狀況的評估；對新的或實驗性情形反應的評估；確認明顯的污染物。訓練目標熟悉不同類型和不同密度的細胞培養的外觀；數碼或膠片相機的使用；滅菌物品和污染物間的區別，健康的和不健康的培養物間的區別；培養物生長階段的評估。監
細胞培養技術的細胞培養方式
高等生物是由多細胞構成的整體，在整體條件下要研究單個細胞或某一群細胞在體內（in vivo）的功能活動是十分困難的。但是如果把活細胞拿到體外（in vitro）培養進行觀察和研究，則要方便得多。活細胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動，特別是高等動植物細胞要求的生存條件極其嚴格，稍有不
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
細胞的篩選馴化和保藏方法介紹
實現懸浮培養首先需要選擇合適的宿主細胞，細胞系的特征直接影響放大的可能性以及放大技術的選擇。同一種細胞在懸浮培養和貼罐培養時對同一病毒的敏感性不同；同一株細胞不同的克隆對營養條件有不同的需求，對病毒敏感性亦可能不同。 常根據毒株特性，綜合考慮所用毒株能在何種細胞上增殖、表達，懸浮或貼壁細胞屬性足否適
菌種保藏
實驗概要學習與比較幾種菌種保藏的方法。實驗原理 微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據這三個因素而設
細胞培養
細胞培養是一種常用的實驗室技術，其中原核或真核細胞在受控條件下生長。大規模哺乳動物細胞培養被廣泛用于生物技術中，特別是用于生產疫苗，蛋白質，酶，抗體和激素。細胞培養還用于許多研究**域，特別是在制藥**域，其中將細胞用作研究許多疾病（例如癌癥或心臟病）的模型。細胞用于靶標鑒定和驗證，基于細胞的測定法
菌種保藏實驗_冷凍干燥保藏法
實驗方法原理微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。?選用優良菌株，根據生理生化特征通過冷凍干燥使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態，生長繁殖受抑制從而降低變異率。此法為菌種保藏方法中最有效的方
巨噬細胞培養常用細胞培養器皿介紹
常用細胞培養器皿有培養瓶、培養板、培養皿等。常準備量是使用量的三倍。器皿應選擇透明度好，無毒，利于細胞粘附和生長的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。巨噬細胞1、液體儲存瓶：用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體，常用規格有500ml、250ml、100ml等幾
細胞培養細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
懸浮培養法細胞的篩選馴化和保藏
實現懸浮培養首先需要選擇合適的宿主細胞，細胞系的特征直接影響放大的可能性以及放大技術的選擇。同一種細胞在懸浮培養和貼罐培養時對同一病毒的敏感性不同；同一株細胞不同的克隆對營養條件有不同的需求，對病毒敏感性亦可能不同。 常根據毒株特性，綜合考慮所用毒株能在何種細胞上增殖、表達，懸浮或貼壁細胞屬性足否適
豬甲狀腺細胞培養實驗_細胞培養技術
實驗方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織，所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯合消化法，用單一的胰蛋白酶消化效果一般；促甲狀腺激素(TSH)是培養甲狀腺細胞必備的，它能夠起到促進甲狀腺細胞生長的作用。實驗材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛 TSH儀器、耗材眼科剪滴
骨骼肌細胞培養和肌細胞培養
骨骼肌細胞培養 1．殺死動物，無菌取大腿肌組織，切成0.3～0.5厘米小塊。 2．用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，無菌紗網或紗布濾過，合成培養基加10％小牛血清培養，為促進分化可加1％的胎汁。 3．細胞接種量為2×106/皿，接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
細胞培養細胞培養的一般過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。二、取材在無菌
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
細胞培養方法
一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。 二、取材
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
LSCM細胞培養
細胞培養上述生化介導的質粒轉染方法是瞬時導入。這種方法使細胞能暫時但高水平表達目的蛋白。一般在轉染后?1 ~ 4d?內可獲得大量的表達蛋白。此外還有物理方法(電轉方法和顯微注射)和病毒介導的方法。當細胞用常規方法很難轉染(如原代細胞)，或轉染試劑的毒性較大，這時可使用顯微注射?(microinjec
細胞培養FAQ
1 冷凍管應如何解凍？?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？?除少數特別
細胞培養方法
一、準備工作? 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。?二、取
細胞培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞試劑、試劑盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起