銀染
1.將固定液中的凝膠搖動過夜或至少1小時。2.將保溫液中的凝膠輕微振蕩2小時。3.去離子水清洗凝膠3次,每次20分鐘。4.將硝酸銀溶液中凝膠輕微振蕩30分鐘。5.用去離子水快速洗膠30秒。6.將定影液中凝膠搖動5~30分鐘,時間由所加的蛋白質量決定。7.如果已經達到所需的顏色深度,將凝膠放到定影液中最少15分鐘。8.換定影液。在暗處,4℃定影液中凝膠可保存幾個月。......閱讀全文
蛋白質染色實驗——非氨鹽銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒DTT硝酸銀碳酸鹽顯影液檸檬酸儀器、耗材搖床實驗步驟1. ?將凝膠置于玻璃或聚乙烯容器中,加入100 ml 固定液,在旋轉搖床中緩慢搖動30 min。?2. ?傾去固定液,將凝膠浸沒在脫色液中,緩慢搖動30 min。?3. ?傾去脫色液,加50 ml 10%戊二醛,在通風櫥
銀染后的膠打質譜蛋白很少的原因
你指的蛋白很少是指分析出來的蛋白個數少,還是蛋白量低啊?銀染靈敏度高,如果切單條帶,蛋白含量本來就低,所以后續處理再損失一部分,打譜出來后,有些蛋白因為量實在太低了,低于檢測下限,就沒法檢測出來了。建議先增加蛋白用量,另外也要查詢打譜后的數據,看酶切處理是不是完全,有沒有可能是不完全酶切,導致大片段
PAGE凝膠快速銀染試劑盒操作手冊
PAGE凝膠快速銀染試劑盒貨號: G7210規格: 1L保存: 室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復檢期12個月。試劑盒內容: G7210硝酸銀 2g染色液A 100ml顯色液B 100ml顯色液C 100ml終止液D 100ml注:1L 規格指可配制的硝酸銀染色液的體積,實際使用次數根據PAGE
SDSPAGE銀染實驗的基本步驟以及相關純水應用
摘要:通過闡述水中雜質對銀染實驗帶來的影響,詳細解釋了為什么銀染實驗應該中應該使用EDI純水。SDS聚丙烯酰胺凝膠染色是蛋白質研究的一個基礎方法。染色方法有很多,實際應用中,考馬斯亮藍染色(考染)和銀染是運用的最多的方法。考馬斯亮藍G250在游離狀態下呈紅色,它與蛋白質結合后變為藍色,結合物在595
銀染核仁形成區的光鏡和電鏡標本制備及觀察
實驗原理?在細胞分裂中期核型中,人的端著絲粒染色體短臂區和在間期細胞核的核仁中有與銀離子特異親合物質,通過銀染可以顯示它們的致量,因此一直被人們所關注。近年來發現,雖然人的端著絲粒染色體短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位,稱核仁形成區(Nucleolar organizer
聚丙烯酰胺凝膠(PAGE膠電泳)電泳的方法與銀染方法
PAGE膠電泳(聚丙烯酰胺凝膠電泳 )主要是以PAGE為介質,根據DNA分子大小和電荷分離DNA分子。PAGE膠電泳采用銀染法進行顯色。銀染的原理:一、銀離子(一般是AgNO3 )和DNA結合;二、還原劑甲醛把Ag+ 還原成銀顆粒,最終DNA呈現為黑褐色。聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持
基于PCR的基因分型實驗—用銀染的方法無放射性的分析SSLP
實驗材料PCR 擴增 SSLP 的變性聚丙烯酰胺凝膠試劑、試劑盒乙醇硝酸硝酸銀染色溶液顯色液乙酸儀器、耗材Whatman 濾紙染色儀器80℃真空電爐實驗步驟1.電泳后,小心的打開儀器,分開玻璃板。將有膠的那塊板子放于染色一起的底部,仔細地將上面的架子和墊圈放置于膠邊緣的上面,擰緊閂子。膠里如果有小空
DNA測序技術(非同位素銀染測序系統操作技術與T7-DNA聚...
3、質粒膜板制備:參照第一章所述的方法。(二)超螺旋質粒DNA 的堿變性:1、取4mg(約2pmol)超螺旋質粒DNA 至一eppendorf管中,加無離子水到終體積18ml。2、加2ml 2mmol/L NaOH/2mmol/L EDTA 溶液,置于室溫(25℃下)保溫5分鐘。3、加2ml 2mo
銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產品使用說明
主要用途YIJI銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑是一種旨在通過端粒酶體外合成端粒重復序列的引物延展方法,繼而進行多聚酶聯擴增反應,在非變性聚丙烯酰胺電泳上,通過經典的銀染技術,呈現六堿基相間的階梯圖像,以分析和評價活細胞端粒酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。廣
淺談預染蛋白Marker與未預染蛋白Marker
在Western實驗中,蛋白Marker可以監控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移,監控蛋白的轉膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是western?blot實驗成功的必備條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預染的Marker,即寬分子量蛋白標準,高分子量蛋白標準及低分子量蛋
DNA測序技術(非同位素銀染測序系統操作技術與T7-DNA...3
二、材料待測的DNA 模板,可用雙鏈或單鏈模板。 三、設備高壓電泳儀,測序用電泳槽,照相顯影用大號塑料盆,制膠設備,吹風機,放射自顯影盒,X-光片。 四、試劑 1、5×T7 DNA 聚合酶緩沖液:200mmol/L Tris?Cl,pH7.5,100mmol/L MgCl2,
C280成像系統在EtBr、SYBR-Green、考馬斯藍和銀染蛋白膠成像...
C280成像系統在EtBr、SYBR Green、考馬斯藍和銀染蛋白膠成像中的應用Azure Biosystems c系列數字成像系列產品是行業領先產品,用戶界面友好、應用靈活。 在本應用中,我們展示了一些可以在c系列家族最新成員Azure Biosystems c280上完成的新應用。簡介Azur
DNA測序技術(非同位素銀染測序系統操作技術與T7-DNA...7
在分子生物學研究中,DNA 的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于測序的技術主要有Sanger等(1977)發明的雙脫氧鏈末端終止法和Maxam和 Gilbert(1977)發明的化學降解法。這二種方法在原理上差異很大,但都是根據核苷酸在某一固定的點開始,隨機在某一個特定的堿基
DNA測序技術(非同位素銀染測序系統操作技術與T7-DNA...2
(1)過夜培養的宿主細胞(如NM522或JM101)用3ml TYP肉汁培養基以1:100稀釋。在37℃強烈震蕩1小時之后,細胞進入對數早期。此時,將一個合適的含有重組M13的噬菌斑(連同瓊脂)用滴管轉入該細胞培養液中。(2)37℃強烈震蕩(300rpm) 培養6小時。(3)把細胞培養液轉入兩只1.
DNA測序技術(非同位素銀染測序系統操作技術與T7-DNA...4
7. 在超純水中浸洗凝膠兩次,每次2分鐘,注意在本操作中戴手套拿著膠板邊緣避免在膠上印上指紋。8. 將凝膠置于室溫干燥或用抽氣加熱法干燥。在可見光燈箱或亮白,黃色背景(如紙)上觀察凝膠,若需永久保存的記錄,則可用EDF膠片保留實驗結果。[注意] 測序產物的銀染是顯現序列信息的一種新方法,本系統的成敗
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(三)電泳:1、預電泳(1)當凝膠聚合完全后,撥出鯊魚齒梳,將該梳子反過來,把有齒的一頭插入凝膠中,形成加樣孔。(2)立即將膠板固定在測序凝膠槽中,一般測序凝膠槽的上下槽是分開的,因而只有在固定好凝膠板后,方能加入TBE緩沖液。(3)稀釋10×TBE緩沖液至1×TBE,將該緩沖液加入上下二個電泳槽中
DNA測序技術(非同位素銀染測序系統操作技術與T7-DNA...6
3、為阻止Taq DNA 聚合酶延伸非特異性退火引物, 熱循環儀必須預熱至95℃。溫度變換應越快越好。下面的循環時間不包括變溫時間。如果你無法確定使用何種模式,建議從模式1開始。 ? 模式1:適用于引物
C280成像系統在考馬斯藍和銀染蛋白膠成像中的應用
Azure Biosystems c系列數字成像系列產品是行業領先產品,用戶界面友好、應用靈活。 在本應用中,我們展示了一些可以在c系列家族最新成員Azure Biosystems c280上完成的新應用。 簡介 Azure Biosystems c280數字成像儀是數字化學發光成像
異染性染料
中文名稱異染性染料英文名稱metachromatic dye定 義使細胞或組織染色后顯示出顏色差異的染料。如甲苯氨藍、天青A等,它們可用于顯示肥大細胞硫酸黏多糖(肝素)的含量。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
負染技術及其應用
負染技術是利用重金屬鹽(常用磷鎢酸鹽或醋酸鈾溶液)沉積到樣品四周,樣品四周散射電子的能力就較強,因而表現為暗區;樣品本身散射電子的能力較弱,則表現為亮區,這樣便能把樣品的外形與表面結構清楚地襯托出來。是觀察微小顆粒狀生物材料的外部形狀常用的染色方法。主要應用于病毒、支原體、細菌等微生物外部形態的觀察
什么是異染性?
異染性metachromasy 指在用單一染料染細胞和組織時,染色部分被染成與染劑色調不同的顏色。
竟用工業染料染牛肉
??? 9月19日,西安市工商局又在沙井村搗毀了一個往牛肉里添加布匹染料的黑窩點。 這個黑窩點在西安市沙井村一居民生活區內,極其隱蔽。記者昨日一踏近窩點,就聞到一股惡臭,地面上滿是血色的雜穢,院內有幾個大盆,盆中泡著膨大的牛皮,在灰暗的作坊內放著已經切好的牛下水和香腸,菜刀上粘著牛油等東西,
胰酶會染菌嗎?
胰酶會被污染,而且細菌真菌都有可能感染,我有胰酶細菌感染的經歷,同行有真菌感染的經歷。胰蛋白酶能裂解細菌表面蛋白,所以對細菌有一定的殺傷作用,但是有細菌及真菌能夠抵抗胰酶,和細菌及真菌的抗藥性是一樣的。所以無菌操作及按需分裝是必要的。
皮膚鞏膜黃染的原因
1、黃疸引發者特點:A,黃疸首先出現于鞏膜,硬腭后部及軟腭黏膜上,隨著血中膽紅素濃度的繼續增高,黏膜黃染更明顯時,才會出現皮膚黃染。B,鞏膜黃染濕連續的,近角鞏膜緣處黃染輕,黃色淡,遠角鞏膜緣處黃染重,黃色深。 2、胡蘿卜素增高引發:A,黃染首先出現于手掌,足底,前額以及鼻部皮膚。B,一般不出
特染:-結締組織染色
一、Mallory三色染色法1. 試劑配制(1)重鉻酸鉀液 重鉻酸鉀2.5g,醋酸5ml,蒸餾水95ml(2)苯胺藍桔黃G液 苯胺藍0.5g,桔黃G2g,磷鎢酸1g,蒸餾水100ml(3)酸性復紅液 酸性復紅0.5g,蒸餾水100ml2.染色步驟(1)中性甲醛液固定組織,石蠟切片,常規脫蠟至水。(2
細胞凋亡檢測(單染法)
實驗概要本實驗介紹了細胞凋亡檢測(Annexin-V-FITC 單染法)(Assay of Cell Apoptosis)的原理及操作流程。實驗原理細胞凋亡或稱程序性細胞死亡(Programmed ?Cell ?Death,PCD)是細胞的生命現象之一,它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴
皮膚鞏膜黃染的檢查
1、皮膚、鞏膜等組織的黃染,黃疸加深時,尿、痰、淚液及汗液也被黃染,唾液一般不變色。 2、尿和糞的色澤改變。 3、消化道癥狀,常有腹脹、腹痛、食欲不振、惡心、嘔吐、腹泄或便秘等癥狀。 4、膽鹽血癥的表現,主要癥狀有:皮膚瘙癢、心動過緩、腹脹、脂肪泄、夜盲癥、乏力、精神萎靡和頭痛等。
銀/氯化銀參比電極的組成成分
銀/氯化銀參比電極的組成成分 銀/氯化銀參比電極常用于海水和土壤環境中。結構和電極電位會隨著使用環境和CSE參比電極的電位的變化而變化。所含電解質可以是自然海水、飽和氯化鉀、飽和氯化鈉或質量百分數為3.5%的氯化鈉溶液(0.6mol/L)。使用者應注意制造商的建議書和所用銀/氯化銀電池類型的電
參比電極種類之銀|氯化銀電極
銀|氯化銀電極 由覆蓋著氯化銀層的金屬銀浸在氯化鉀或鹽酸溶液中組成。常用 Ag|AgCl|Cl-表示。一般采用銀絲或鍍銀鉑絲在鹽酸溶液中陽極氧化法制備。銀|氯化銀電極的電極電勢與溶液中Cl-濃度和所處溫度有關。
磺胺嘧啶銀
性狀本品為白色或類白色的結晶性粉末;遇光或遇熱易變質。本品在水、乙醇、三氯甲烷或乙醚中均不溶;在氨試液中溶解。鑒別(1)取本品約0.5g,加硝酸5m1使溶解,再加水與氯化鈉的飽和溶液各20ml,搖勻,濾過,濾液用10%氫氧化鈉溶液中和至對酚酞指示液顯淺紅色,加稀醋酸2ml,即析出白色沉淀;濾過,沉淀