PCR產物的電泳檢測時間 一般為48h以內,有些最好于當日電泳檢測,大于48h后帶型不規則甚致消失。 假陰性,不出現擴增條帶 PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及, ④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。 模板:①模板中含有雜蛋白質,②模板中含有Taq酶抑制劑,③模板中蛋白質沒有消 化除凈,特別是染色體中的組蛋白,④在提取制備模板時丟失過多,或吸入酚。⑤模 板核酸變性不徹底。在酶和引物質量好時,不出現擴增帶,極有可能是標本的消化處 理,模板核酸提取過程出了毛病,因而要配制有效而穩定的消化處理液,其程序亦應 固定不宜隨意更改。 酶失活:需更換新酶,或新舊兩種酶同時使用,以分析是否因酶的活性喪失或不夠而 導致假陰性。需注意的是有時忘加Taq酶或溴乙錠。 引物:引物質量、引物的濃度、兩條引物的濃度是否對稱,是PCR失敗或擴增條帶不 理想、容易彌散的常見原因。有......閱讀全文
2013年6月6日,實驗室自動化與篩選協會2013亞洲會展在上海金茂君悅大酒店盛大開幕,國內外知名藥企、生物醫學研究專家、學者等應邀參會。“美國年會創新計劃獎項的候選者及獲得者”報告分論壇于6月7日下午舉行,由RainDance科技研發副總裁Darren R.Link博士、百時美施貴寶公司高級研
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
前言 一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain react
實驗方法:學做實驗兩者方法有所不同,大概分為兩種方法:向別人學習和自學。下面分別介紹一下吧基本操作和基礎知識在開始學做實驗的時候,有人指導。做實驗的內容,大概分為基本操作和具體實驗的操作。基本操作是具體實驗的基礎,例如:怎樣量取容積,怎樣測量和調節PH值,怎樣清洗實驗室器皿,無菌操作技術,怎樣使用p
學做實驗的方法初步入門-迷你離心機技術文章實驗方法:學做實驗兩者方法有所不同,大概分為兩種方法:向別人學習和自學。下面分別介紹一下吧基本操作和基礎知識在開始學做實驗的時候,最好有人指導。做實驗的內容,大概分為基本操作和具體實驗的操作。基本操作是具體實驗的基礎,例如:怎樣量取容積,怎樣測量和調節PH值
多少同學能將 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR區分開?有多少同學還在犯暈?今兒這貼,師兄就帶你區分區分,撥開那扇 PCR 迷霧。什么是 RT-PCR?RT-PCR就是逆轉錄 PCR(reverse transcription PCR)或者稱反轉錄PCR(reverse tr
(1) 定性PCR法定性PCR可直接檢測啟動子、終止子、標記基因片斷、目的基因片斷。為使目的基因很好的進行表達,在構建基因表達載體時常在目的基因的5’和3’端分別加上啟動子和終止子。當前大約75%的轉基因植物中使用Ca MV( Cauliflower mosaicvirus) 3 5 S啟動
2016年,國家食品藥品監督管理總局(以下簡稱食品藥品監管總局)貫徹落實《醫療器械監督管理條例》,按照《國務院關于改革藥品醫療器械審評審批制度的意見》(國發〔2015〕44號),持續深入推進醫療器械審評審批制度改革工作,進一步加強對全國醫療器械注冊工作監督和管理,加大現場核查和真實性抽查力度,不
人類基因組計劃的主要任務之一就是要從大片段基因組區域或整條染色體DNA 上鑒定出基因表達序列(gene expressed sequences)或轉錄單位(transcription units)。在人類基因組30億個堿基對中,發生轉錄的表達序列(即基因)僅占總序列的3~5%。基因組中絕大部
近些年來,一場癌癥治療的革命正在悄然發生,除了依賴于一種又一種的人工分子來診治癌癥,科學家們正在尋求通過病人自身免疫功能治療惡疾的方式。 現在,癌癥免疫療法主要面臨著三大任務:增強癌細胞免疫靶標性,提高特異免疫分子的癌細胞擊殺率以及提高免疫細胞的腫瘤靶向性。 自腫瘤免疫治療出現伊始,這一領域
自2019 年 12 月以來,湖北省武漢市陸續發現新型冠狀病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)感染患者,且呈快速上升之勢。自新型冠狀病毒疫情爆發以來,近期湖北、武漢疫情從過去的爆發式增長已經走向趨緩,武漢防控工作取得階段性成效。 而事實上,在2020年1月
摘要:如何確保食品安全業已成為人們關心的問題。隨著科學技術的進步,高效、快速的檢驗技術在實踐中不斷得到普及應用。食品檢驗技術是保證食品安全的基礎手段,談了檢測技術手段,并對現階段我國食品檢驗技術存在的主要問題進行了分析。 一、引言 食品質量安全問題不僅對人體健康的威脅,而且還從多方面的經濟發
【內容簡介】2019新型冠狀病毒,即“2019-nCoV”,因2019年武漢病毒性肺炎病例而被發現,2020年1月12日被世界衛生組織命名。冠狀病毒是一個大型病毒家族,已知可引起感冒以及中東呼吸綜合征(MERS)和嚴重急性呼吸綜合征(SARS)等較嚴重疾病。新型冠狀病毒是以前從未在人體中發現的冠狀病
(2015年7月18~22日) 中國醫學科學院基礎醫學研究所/北京協和醫學院基礎學院在醫學領域具有國內一流的影響力和知名度,以尖端的醫學研究及出色的理論和實驗教學成為著 名的醫學科學研究與教育基地。為了培養生物醫學領域創新人才,現首次推出以 尖端儀器和實戰訓練為特色的"大型儀器原理與
1.簡介寡聚核苷酸引物的選擇,通常是整個擴增反應成功的關鍵。所選的引物序列將決定PCR產物的大小、位置、以及擴增區域的Tm值這個和擴增物產量有關的重要物理參數。好的引物設計可以避免背景和非特異產物的產生,甚至在RNA-PCR中也能識別cDNA或基因組模板。引物設計也極大的影響擴增產量:若使用設計粗糙
引物設計簡介1.寡聚核苷酸引物的選擇,通常是整個擴增反應成功的關鍵。所選的引物序列將決定PCR產物的大小、位置、以及擴增區域的Tm值這個和擴增物產量有關的重要物理參數。好的引物設計可以避免背景和非特異產物的產生,甚至在RNA-PCR中也能識別cDNA或基因組模板。引物設計也極大的影響擴增產量:若使用
1.簡介 寡聚核苷酸引物的選擇,通常是整個擴增反應成功的關鍵。所選的引物序列將決定PCR產物的大小、位置、以及擴增區域的Tm值這個和擴增物產量有關的重要物理參數。好的引物設計可以避免背景和非特異產物的產生,甚至在RNA-PCR中也能識別cDNA或基因組模板。引物設
(5日大型儀器綜合培訓、2日細胞成像專題培訓、4日蛋白組學專題培訓) (第一輪通知) 中國醫學科學院基礎醫學研究所∕北京協和醫學院基礎學院在醫學領域具有國內
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答 PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀
全球大爆發的新型冠狀病毒肺炎或新型冠狀病毒感染疾病的診斷有多種方法,其中針對其病毒核酸的實時定量逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測是病原學診斷的金標準。PCR 方法是所有核酸(RNA、DNA)定量檢測的重要方法,對于新冠病毒等RNA核酸首先需要逆轉錄為cDNA,而后PCR方法則基本一致,下面
PCR (Polymerase Chain Reaction),中文翻譯為聚合酶鏈式反應,是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制。 由1983年美國Mullis首先提出設想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增法,意
PCR (Polymerase Chain Reaction),中文翻譯為聚合酶鏈式反應,是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制。 由1983年美國Mullis首先提出設想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增法,意味著PCR技術的真
PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內,有些最好于當日電泳檢測,大于48h后帶型不規則甚致消失。常見問題如下:一、假陰性,不出現擴增條帶PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及,④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。模板:①模板中含有雜蛋白質,②
2009年度國家質量監督檢驗檢疫總局“科技興檢獎”評審工作已經結束,共評審出擬獎項目218項,現予以公示。自公示之日起1個月內為公示期。任何單位和個人對本公告公示的項目有異議,均可在公示期內,以書面形式向國家質量監督檢驗檢疫總局科技司技術發展處提出。 聯系人:謝正文 聯系電話:822
實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定 DNA、RNA 分子混合物,以瓊脂凝膠作為支持物,利用 DNA 分子在電場中時的電荷效應和分子篩效應,達到分離混合物的目的。DNA 分子在高于其等電點的溶液中帶負電,在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下,忽略DNA分子攜帶的電荷,DNA