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實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定 DNA、RNA 分子混合物，以瓊脂凝膠作為支持物，利用 DNA 分子在電場中時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA 分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下，忽略DNA分子攜帶的電荷，DNA 分子的遷移速度取決于分子篩效應，即分子本身的大小和構型是主要的影響因素。DNA 分子的遷移速度與相對分子量成反比。 不同構型的 DNA 分子的遷移速度不同。如環形 DNA 分子樣品，其中有三種構型的分子：超螺旋分子（cccDNA）、開環分子(ocDNA)、和線形 DNA 分子(IDNA)。這三種不同構型分子進行電泳時的遷移速度大小順序為:cccDNA＞IDNA＞ocDNA。 核酸電泳通常使用瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠兩種介質。瓊脂糖是一種聚合鏈線性分子；聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺（Acr）在 N,N,N′-四甲基乙二胺（......閱讀全文
【概述】帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動，稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。 1807年，由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯（Ferdinand Frederic Reuss）最早發現。
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術,并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題.【實驗原理】DNA 分子有線狀的,還有一些非線狀的,如復制叉和重組DNA 結構.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/
電泳技術原理（以瓊脂糖凝膠電泳為例） 1、首先介紹使用的載體--瓊脂糖。 瓊脂糖是線性的多聚物，基本結構是1,3連結的β-D-半乳呋喃糖和1,4連結的3,6-脫水α-L-半乳呋喃糖。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解，溫度下降到35-40℃時形
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，
本實驗采取堿裂解法的方法來提取質粒 ，之后經瓊脂糖凝膠電泳來檢測DNA。質粒DNA 的提取與鑒定(一)堿裂解法提取質粒[實驗原理]堿裂解法提取質粒是根據共價閉合環狀質粒DNA與線性染色體DNA在拓撲學上的差異來分離它們。在pH值介于12.0~12.5這個狹窄的范圍內,線性的DNA雙螺旋結構解開而被變
分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下，向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳（electrophoresis）。蛋白質為兩性電解質，在不同pH溶液中帶不同的電荷，從而在直流電場中能夠泳動，這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術，并成功地將血清
分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下，向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳（electrophoresis）。蛋白質為兩性電解質，在不同pH溶液中帶不同的電荷，從而在直流電場中能夠泳動，這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術，并成功地將血清蛋
實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測，對于不同的目的，應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性，所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大
摘 要：當今生物學領域的研究一個熱點之一是細胞凋亡。開展對細胞凋亡的研究，首先要解決是方法學問題。作者從凋亡細胞的特征性核DNA片段檢測著手，闡述了多種凋亡細胞核DNA片段檢測方法以及近年來的一些新進展。細胞凋亡（apoptosis）又稱細胞凋謝或稱程序性細胞死亡（Programmed
收集細胞，用 D-PBSA 洗滌，重新制成 5×107個/ml 的細胞懸液，制備細胞抽提物并置于 -70°C 保存。準備凝膠裝置，取 1~2 μl的細胞抽提物、標準品及對照點樣于瓊脂糖凝膠。槽內充滿液體，將瓊脂糖凝膠置于其中，電泳 25 min，加入酶反應試劑，孵育 5~20 min 后，沖洗凝膠，
蛋白純化經驗指南生物谷整理 http://www.bioon.com 原創：Chromatography weixingui@263.net， 推薦書籍：《蛋白純化與實驗鑒定指南》、《生物工程下游技術》、《酶工程》、《酶制劑工業》 1) 我現在手頭
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定 DNA、RNA 分子混合物，以瓊脂凝膠作為支持物，利用 DNA 分子在電場中時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA 分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下，忽略DNA分子攜帶的電荷，DNA 分
實驗方法原理收集細胞，用 D-PBSA 洗滌，重新制成 5×107個/ml 的細胞懸液，制備細胞抽提物并置于 -70°C 保存。準備凝膠裝置，取 1~2 μl的細胞抽提物、標準品及對照點樣于瓊脂糖凝膠。槽內充滿液體，將瓊脂糖凝膠置于其中，電泳 25 min，加入酶反應試劑，孵育 5~20 m
實驗方法原理 收集細胞，用 D-PBSA 洗滌，重新制成 5×107個/ml 的細胞懸液，制備細胞抽提物并置于 -70°C 保存。準備凝膠裝置，取 1~2 μl的細胞抽提物、標準
摘要 以有機玻璃板等材料，制作出成奉低廉的微型瓊脂糖凝膠電泳槽。經試用，具有操作簡便、使用安全、節省試劑等優點，能滿足教學與科研的需要。 瓊脂糖凝膠電泳是核酸研究工作中必不可少的工具，在生物化學和分子生物學教學和科研中具有重要作用。瓊脂糖凝膠電泳槽的制作原理雖簡單，但由于瓊脂糖凝
一. 實驗目的1. 掌握DNA指紋圖譜技術的概念、原理和基本操作過程2. 學習DNA的限制性酶切的基本技術3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術，學習利用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA片段的長度，并能對實驗結果進行分析。二. 實驗原理1984年英國萊斯特大學的遺傳學家Jefferys及其合作者首次將分離的
電泳技術是一門古老而又年輕的技術。早在1809年俄國物理學家Reuss就進行了世界上第一次電泳實驗，此后各種電泳技術及儀器相繼問世，廣泛應用于蛋白質、氨基酸、核酸、其他有機化合物甚至無機離子等領域的分離和／或鑒定。近年來，先進的電泳技術和各種自動電泳分析系統被越來越多的臨床實驗室所采用檢驗|地帶網搜
實驗方法原理 在 λ 噬菌體中構建基因組 DNA 文庫的步驟與在黏粒載體中的步驟基本一致。在這兩種系統中，真核 DNA 在體外與載體 DNA 連接，形成能包裝到 λ 噬菌體顆粒中
摘要以有機玻璃板等材料，制作出成奉低廉的微型瓊脂糖凝膠電泳槽。經試用，具有操作簡便、使用安全、節省試劑等優點，能滿足教學與科研的需要。 瓊脂糖凝膠電泳是核酸研究工作中必不可少的工具，在生物化學和分子生物學教學和科研中具有重要作用。瓊脂糖凝膠電泳槽的制作原理雖簡單，但由于瓊脂糖凝膠電泳槽梳子
實驗方法原理 收集細胞，用 D-PBSA 洗滌，重新制成 5×107個/ml 的細胞懸液，制備細胞抽提物并置于 -70°C 保存。準備凝膠裝置，取 1~2 μl的細胞抽提物、標準品及對照點樣于瓊脂糖凝膠。槽內充滿液體，將瓊脂糖凝膠置于其中，電泳 25 min，加入酶反應試劑，孵育 5~20
實驗方法原理 在 λ 噬菌體中構建基因組 DNA 文庫的步驟與在黏粒載體中的步驟基本一致。在這兩種系統中，真核 DNA 在體外與載體 DNA 連接，形成能包裝到 λ 噬菌體顆粒中的多聯體。構建在 λ 噬菌體中的文庫以具有感染性的重組噬菌體形式貯存和增殖。實驗材料 T4 噬菌體 DNA 連接酶牛小腸堿
來自賓夕法尼亞州費城杰佛遜醫學院(Jefferson Medical College）外科系，以及Kimmel腫瘤中心（Kimmel Cancer Center）的研究人員申請到了一項新專利，這項專利也許未來某天會成為DNA分析過程中的關鍵技術，而且這一發現也可以應用于多個領域，比如法醫鑒定，克隆或
電泳儀的這些常識你知道嗎？*節 電泳原理第二節 常用電泳方法第三節 常用電泳儀的基本結構及技術指標 第四節 常用電泳儀簡介第五節 毛細管電泳第六節 電泳儀的
分子雜交技術 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN
蛋白質純化過程中常遇見一些問題，這里整理了以下幾個蛋白質純化實驗中遇見的問題及其解決方案。1)我現在手頭有個融合蛋白，純化的時候用助溶劑溶解后做了GST親和層析，之后用蛋白酶切割后卻發現目的蛋白沒有活性。請問有哪些可能會出現這種原因?怎么解決?測過基因序列，沒有問題。細胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我
蛋白純化過程中常遇見一些問題，這里整理了以下幾個蛋白純化實驗中遇見的問題及其解決方案。1)我現在手頭有個融合蛋白，純化的時候用助溶劑溶解后做了GST親和層析，之后用蛋白酶切割后卻發現目的蛋白沒有活性。請問有哪些可能會出現這種原因?怎么解決?測過基因序列，沒有問題。細胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
蛋白純化過程中常遇見一些問題，這里整理了下幾個蛋白純化實驗中的遇見的問題及其解決方式。1)我現在手頭有個融合蛋白，純化的時候用助溶劑溶解后做了GST親和層析，之后用蛋白酶切割后卻發現目的蛋白沒有活性。請問有哪些可能會出現這種原因?怎么解決?測過基因序列，沒有問題。細胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
蛋白純化過程中常遇見一些問題，這里整理了下幾個蛋白純化實驗中的遇見的問題及其解決方式。1)我現在手頭有個融合蛋白，純化的時候用助溶劑溶解后做了GST親和層析，之后用蛋白酶切割后卻發現目的蛋白沒有活性。請問有哪些可能會出現這種原因?怎么解決?測過基因序列，沒有問題。細胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
在 λ 噬菌體中構建基因組 DNA 文庫的步驟與在黏粒載體中的步驟基本一致。在這兩種系統中，真核 DNA 在體外與載體 DNA 連接，形成能包裝到 λ 噬菌體顆粒中的多聯體。構建在 λ 噬菌體中的文庫以具有感染性的重組噬菌體形式貯存和增殖。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理
說到Western Blotting，估計所有技術員都會聯想到藍底上的黑色條帶，或者是儀器掃描的白底黑條圖片。經過了漫長的實驗流程，得到的會是清晰的、符合實驗理論的完美結果，或者更多的是其他讓自己略感失望的結局。比起其他分子生物學實驗，Western Blotting實驗似乎更加冗長、更加考驗技術，