流式細胞儀術檢測各類免疫細胞的數量
流式細胞術(FCM)是一種高速度、高靈敏度、高精度和高分辨率的自動分析細胞的高新技術。主要用于定量分析單細胞表面、細胞內抗原和對分子水平的核酸含量的測定。試劑及材料1. FITC(或PE)標記的抗CD的mAb及正常小鼠IgG2. 細胞洗液:含2%BSA、0.1%NaN3 的PBS。3. 固定液:25%戊二醛3.2ml,葡萄糖2g加無BSA的細胞洗液至100ml。4. 流式細胞儀操作方法1. 于各實驗管中分別加入106 PBMC,1500r/min離心3min,棄上清;2. 分別加入熒光素標記的抗CD的mAb 20ml,混勻;3. 4℃孵育60min, 加入細胞洗液 , 1500r/min離心3min,反復洗滌3次;4. 用細胞洗液恢復體積至0.5ml,加入固定液20ml,混勻;5. 上機檢測。注意事項由于FITC(或PE)標記的抗CD的mAb可以從試劑公司方便購得,且方法穩定可靠,故在此介紹的是直接免疫熒光法的操作步驟......閱讀全文
流式細胞儀術檢測各類免疫細胞的數量
流式細胞術(FCM)是一種高速度、高靈敏度、高精度和高分辨率的自動分析細胞的高新技術。主要用于定量分析單細胞表面、細胞內抗原和對分子水平的核酸含量的測定。試劑及材料1. FITC(或PE)標記的抗CD的mAb及正常小鼠IgG2. 細胞洗液:含2%BSA、0.1%NaN3 的PBS。3. 固定液:25
各類免疫細胞的作用
免疫細胞的作用在免疫學中是一個比較重要的知識點,在事業單位的考試中。各類免疫細胞也經常出現在考題當中。掌握好各類免疫細胞,能夠幫助我們快速準確地做題。針對這個問題,中公吉林衛生人才網為大家整理了相關資料! 首先我們一起看一道題目: 【單選題】與B細胞介導的免疫應答有關的是: A.發生ADC
如何用流式細胞儀檢測線粒體數量
可以參考Mattiasson, G. (2004). "Flow cytometric analysis of isolated liver mitochondria to detect changes relevant to cell death." Cytometry A 60(2): 145-
各類型液基細胞制片術的比較
液基薄層細胞制片能在載體上均勻地分布一層很薄的細胞,克服了傳統巴氏涂片技術存在的材料太厚、細胞重疊、背景模糊和染色不佳等問題,而液基細胞制片可對同一標本重復制片,更利于病理細胞準確的診斷和篩查,該技術有助于對異常細胞的篩查,提高宮頸病變篩查的敏感度和特異性;更容易使早期癌不斷地被發現、晚期癌的發生率
流式細胞術和流式細胞儀
1、流式細胞儀(Flow Cytometer):是集光電子物理,光電測量,計算機,細胞熒光化學,單抗技術為一體的高科技細胞分析儀。2、流式細胞術(Flow? Cytometry):利用流式細胞儀對處于快速流動的細胞或生物顆粒進行多參數、快速(每秒可達1000-10000個)的定量分析和分選(純度可達
關于免疫功能檢測法—數量的檢測介紹
免疫細胞數量變化的原因、表現部位及細胞的特性數量原因表現部位細胞特征增加對內外各種刺激的反應性增生主要表現在血液,其次是淋巴結或脾等周圍免疫器官主要是成熟的免疫細胞腫瘤性增生,如白血病、骨髓瘤、淋巴肉瘤主要表現在骨髓或淋巴結,其次在血液、脾及其他器官主要是未成熟細胞,部分為成熟細胞減少細胞丟失和
流式細胞儀檢測的免疫熒光樣品標記
用于流式細胞儀檢測的常用熒光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5,PE和PI,在以上各種熒光染料中,PE熒光最強,適用于弱表達抗原;FITC最便宜,適用于強表達抗原,適用范圍廣。??? 1.直接免疫熒光標記法 取一定量的細胞懸液(濃度約l×l06個/m1),直接加入熒光素標記抗體進行免疫反應(
圖像流式細胞儀——流式細胞術的突破
是一種臺式多譜段成像流式細胞儀(Multispectral Imaging Flow Cytometry),能夠同時采集6個檢測通道中的細胞圖像。它將流式細胞檢測與熒光顯微成像結合于一身,既能提供細胞群的統計數據,又可以獲得單個細胞的圖像,從而提供細胞形態學、細胞結構和亞細胞信號分布的信息。細胞分析
【技術指南】流式細胞儀和流式細胞術
Jay Haron Ph. D.? ?jay.haron@gmail.com? ?BD Biosciences, San Diego, United States 引用 實驗材料和方法? 從1968年最早的商品化 流式細胞術(FC) 和熒光激活細胞分類
圖像流式細胞儀——流式細胞術的最新突破
?ImageStream是一種臺式多譜段成像流式細胞儀(Multispectral Imaging Flow Cytometry),能夠同時采集6個檢測通道中的細胞圖像。它將流式細胞檢測與熒光顯微成像結合于一身,既能提供細胞群的統計數據,又可以獲得單個細胞的圖像,從而提供細胞形態學、細胞結構和亞細胞
流式細胞儀和流式細胞術指南篇2
核酸插入染料溴化乙錠(EtBr) 和碘化丙啶(PI)能夠結合到DNA雙螺旋的大溝。4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和Hoechst染料(有幾種常用的)則結合小溝。請注意, 一些染料 (例如碘化丙啶)也會結合到RNA發卡結構形成的溝中,因此如果要做DNA定量,需要用染料和RNA
流式細胞術的發展歷史及流式細胞儀的原理
相關專題實驗室的CT-流式細胞儀流式細胞分析(flow cytometry,FCM)即流式細胞術,是用流式細胞儀?(flow cytometer,FCM)測量液相中懸浮細胞或微粒的一種現代分析技術。它凝結眾多不同學術背景、不同科研領域科學家的心血。從流式細胞術的發明、發展直到今天在各個領域應用的拓展
細胞凋亡檢測:流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術?一、固定細胞的染色方法?1?)?PI?單染色法?方法一1.?收集細胞(?1?~?5?)×?106?個,?500?~?1000r/min?離心?5min?,棄去培養液。2.?3ml PBS?洗一次。3.?離心去?PBS?,加入冰預冷的?70?%的乙醇固定,?4?℃,?1h
細胞凋亡檢測流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法?1)PI單染色法?方法一?1.收集細胞(1~5)×106個,500~1000r/min離心5min,棄去培養液。?2.3ml PBS洗一次。?3.離心去PBS,加入冰預冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。?4.離心棄去固定液,3ml PBS重懸5min。?5.400目的篩網過濾
細胞凋亡檢測:流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術一、固定細胞的染色方法1)PI單染色法方法一1.收集細胞(1~5)×106個,500~1000r/min離心5min,棄去培養液。2.3ml PBS洗一次。3.離心去PBS,加入冰預冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。4.離心棄去固定液,3ml PBS重懸5min。5.40
細胞凋亡檢測流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法?1)PI單染色法?方法一?1.收集細胞(1~5)×106個,500~1000r/min離心5min,棄去培養液。?2.3ml PBS洗一次。?3.離心去PBS,加入冰預冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。?4.離心棄去固定液,3ml PBS重懸5min。?5.400目的篩網過濾
流式細胞儀細胞凋亡檢測
一 PI單染色法??基本原理? 其原理主要是根據細胞?凋亡時在細胞、亞細胞和分子?水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等,其中細胞核的改變最具特征性,主要包括以下幾個方面:1.?細胞核的改變:由于凋亡細胞核的改變,造成各種染色體熒光染料
流式細胞儀檢測細胞凋亡
細胞凋亡的檢測方法眾多,流式細胞儀檢測凋亡,是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此,具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。在凋亡誘導劑的作用下,首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體,線粒體的功能發生衰退;后是cas
流式細胞術檢測細胞的原理
流式細胞術檢測細胞的原理主要包括以下幾個方面:細胞懸液制備:將待檢測的細胞制成單細胞懸液。熒光標記:使用特異性的熒光染料或熒光標記的抗體與細胞內或細胞表面的特定成分結合。流體動力學聚焦:細胞懸液被壓力驅動進入流動室,在鞘液的包裹下,細胞逐一排列成單列,以極快的速度逐個通過檢測區。激光照射:當細胞通過
免疫組化專題:流式細胞儀檢測技術實驗(二)
⑤主機設定:一般是已設定好的適合測定淋巴細胞的條件,包括探測器的電壓。探測器的電壓是調空光電倍增管所能檢測熒光密度的范圍。⑥選擇檢測的波長和表達方式(plot):如果用一種熒光抗體,一般選直方圖(histogram);如果用兩種熒光抗體,常選點狀二維圖(dot plot)或輪廓線圖(contour
惡性腫瘤病人外周血免疫指標的流式細胞儀檢測
惡性腫瘤病人外周血免疫指標的流式細胞儀檢測及免疫治療前后免疫功能變化的研究惡性腫瘤的發生、發展與機體免疫系統密切相關。運用流式細胞術的方法,檢測T淋巴細胞表面抗原(CD3、CD4、CD8),B淋巴細胞表面抗原(CD19、CD20),NK細胞表面抗原(CD16+56)在惡性腫瘤病人外周血中的表達,并檢
免疫組化專題:流式細胞儀檢測技術實驗(一)
標簽: 流式 細胞儀流式細胞儀(flow cytometer)是一種能夠探測和計數以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置,由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質為熒光標記物,因此,用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀,是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應用工具。實驗方法
流式細胞儀檢測細胞凋亡的原理
一、原理在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V是一種分子量為35~36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結
流式細胞儀檢測細胞凋亡的原理
一、原理在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V是一種分子量為35~36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結
流式細胞儀檢測原理
流式細胞儀檢測原理如下:流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指
流式細胞儀檢測原理
流式細胞儀檢測原理如下:流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指
流式細胞儀檢測原理
流式細胞儀檢測原理如下:流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指
流式細胞儀檢測原理
流式細胞儀檢測原理如下:流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指
流式細胞儀檢測技術
實驗方法原理 流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。第一,是儀器前階段,包括試劑的準備,細胞制備、細胞的熒光染色;第二,是流式細胞儀階段,主要是儀器的操作;第三,是結果分析階段。實驗材料 淋巴細胞外周血的白細胞試劑、試劑盒 FACS緩沖液PBS疊氮鈉溶液儀器緩沖液FACS清潔液FACS洗凈液儀器、耗材
流式細胞術檢測細胞凋亡
實驗概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis.?實驗原理Apoptosis ?is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal ?part o