病毒透射電鏡病毒標本制備實驗3
免疫吸附法實驗方法原理有時由于病毒量少,用普通懸滴法在電鏡下難以發現稀少散在的病毒粒子,則可用免疫吸附電鏡法。主要是利用相應的病毒抗血清來吸附病毒,用本法檢測病毒,快速、靈敏、特異性強,是可靠的電鏡病毒診斷技術之一,也可用于病毒快速診斷。實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟將抗病毒血清分別稀釋為 1: 200~1: 6 400, 然后將不同稀釋度的抗病毒血清分別滴于蠟盤或蠟紙上,將有膜銅網覆蓋漂浮于液面上(室溫 18~20℃) 孵育 5 min, 然后再將銅網移至病毒懸液中漂浮室溫反應 15min, 取出銅網吸干,用蒸餾水漂洗 1-2次,再用 1%-2%磷鎢酸染 3-5 min, 用濾紙吸去負染液,干燥后電鏡檢查,其病毒的檢測率要比一般懸滴法為高。......閱讀全文
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗3
免疫吸附法實驗方法原理有時由于病毒量少,用普通懸滴法在電鏡下難以發現稀少散在的病毒粒子,則可用免疫吸附電鏡法。主要是利用相應的病毒抗血清來吸附病毒,用本法檢測病毒,快速、靈敏、特異性強,是可靠的電鏡病毒診斷技術之一,也可用于病毒快速診斷。實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟將抗病
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗4
直接取材鏡檢法實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟為了進行天花、水痘、皰疹等病毒的臨床快速診斷,可用毛細吸管直接刺入病人皮膚皰疹內吸取少量泡液,立即滴于有膜的銅網上,稍干后即用 1%-2% 的磷鎢酸溶液進行負染,待干后立即用電鏡觀察。于電鏡下常可于短時間內發現典型的病毒顆粒。注意
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗2
實驗方法原理病毒研究中用磷鎢酸染色后發現在黑色背景中病毒粒子如同一個亮晶晶的「空洞」。爾后用磷鎢酸對飛噬菌體染色也見到同樣的現象,即將這種現象稱為「負染色」。負染色是一種反襯染色,即高密度物質如重金屬磷鎢酸、醋酸鈾等在透射電鏡下形成黑色的背景反襯低密度的標本如病毒為白色透亮,從而清楚地顯示出被襯物的
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗1
懸滴標本法實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——懸滴標本法
實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱,只能觀察
病毒透射電鏡病毒標本制備
實驗方法原理 病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料 病毒試劑、試劑盒 稀釋液儀器、耗材 透射電鏡實驗步驟 懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——負染色技術
實驗方法原理病毒研究中用磷鎢酸染色后發現在黑色背景中病毒粒子如同一個亮晶晶的「空洞」。爾后用磷鎢酸對飛噬菌體染色也見到同樣的現象,即將這種現象稱為「負染色」。負染色是一種反襯染色,即高密度物質如重金屬磷鎢酸、醋酸鈾等在透射電鏡下形成黑色的背景反襯低密度的標本如病毒為白色透亮,從而清楚地顯示出被襯物的
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——免疫吸附法
實驗方法原理有時由于病毒量少,用普通懸滴法在電鏡下難以發現稀少散在的病毒粒子,則可用免疫吸附電鏡法。主要是利用相應的病毒抗血清來吸附病毒,用本法檢測病毒,快速、靈敏、特異性強,是可靠的電鏡病毒診斷技術之一,也可用于病毒快速診斷。實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟將抗病毒血清分別
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——直接取材鏡檢法
實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟為了進行天花、水痘、皰疹等病毒的臨床快速診斷,可用毛細吸管直接刺入病人皮膚皰疹內吸取少量泡液,立即滴于有膜的銅網上,稍干后即用 1%-2% 的磷鎢酸溶液進行負染,待干后立即用電鏡觀察。于電鏡下常可于短時間內發現典型的病毒顆粒。注意事項其他此方法
病毒免疫熒光實驗_病毒染色標本的制備
實驗材料待檢測病毒試劑、試劑盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材玻片實驗步驟1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類,選擇敏感細胞進行培養,如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞)培養,森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞)培養,登革熱病毒用白紋伊蚊
病毒的分離實驗_標本法
實驗步驟標本的采集:病毒分離常用的標本有血液,腦脊液,糞便,直腸拭子,咽喉含漱液,咽拭子,尸檢組織等。所取標本的種類視疾病性質而異。如呼吸道疾病常取咽喉洗液,咽拭子;消化道疾病取糞便,直腸拭子;神經系統疾病取腦脊液,糞便等。采取標本時應避免污染,有些標本如糞便,咽喉洗液,雖本身含有大量雜菌,但為保持
MVA-病毒儲液制備實驗
基本方案 免疫染色法滴度測定 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-
MVA-病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材 150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml
MVA-病毒儲液制備實驗
實驗材料成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的維持培養基消化 7 瓶
病毒-DNA-的提取實驗——拭子標本中病毒-DNA-的提取
實驗材料拭子標本試劑、試劑盒TE 緩沖液裂解液蛋白酶K儀器、耗材離心機棉簽實驗步驟預操作:將采有口腔、鼻腔或生殖道等處分泌物標本的棉簽置于 2 ml 生理鹽水中,洗下標本。若標本在 4 h 內處理,可置于室溫保存,否則需 4℃保存。1. 將生理鹽水中的標本以 2 000 r/min 離心 5 min
反轉錄病毒載體的制備實驗
實驗材料二個反轉錄病毒包裝細胞株反轉錄病毒載體包含選擇性標記試劑、試劑盒PBS細胞染色液組織培養皿儀器、耗材完全的 Dulbecco 改良 Eagle 培養基低蛋白質結合的纖維素乙酸鹽注射器式濾器克隆形成環實驗步驟展開
桿狀病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒 含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材 150 mm 培養瓶 27℃ 培養箱 倒置顯微鏡 帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機 帶螺口蓋的凍存管 液氮罐 500 ml 旋轉細
桿狀病毒儲液制備實驗
基本方案 從懸浮培養中制備 基本方案 從單層培養中制備 噬斑試驗測定滴度 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
諾瓦克病毒實驗室檢測的標本類型
⑴糞便 諾如病毒檢測首選糞便標本。每份標本5g或5ml以上,直接放置于清潔、無菌、干燥的密閉容器內。容器內不可加入任何保護劑、培養基、去污劑或金屬離子,不可稀釋。 ⑵肛拭子 肛拭子標本不能長期保存,且檢出率低于糞便標本。肛拭子含糞便量很低時,如檢測結果呈弱陽性,結果容易被誤判,導致假陰性。
病毒包裝技術——腺病毒載體的制備
1 菌液的準備1.1. 取含目的質粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上,37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落,挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液,則需取庫存質粒進行轉化,然后挑單克隆搖菌。1.2. 將單克隆接種于5ml氨芐
病毒免疫熒光實驗_熒光抗體的制備
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光色素的選擇 可以產生明亮熒光的染料物質,稱熒光色素 (fluorochrome) 。目前常用的熒光色素有以下幾種:(1) 異硫氰酸熒光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在堿性條件下, FITC 的異硫氰酸基在水溶液
實驗動物組織標本的制備實驗
實驗材料 家兔豚鼠白鼠試劑、試劑盒 營養液儀器、耗材 注射器線浴槽實驗步驟 通常選用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等動物,禁食24 小時。擊頭致昏,以避免麻醉或失血對胃腸道機能的影響。立即打開腹腔,取出所需的胃、腸、膽囊等。去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2
桿狀病毒儲液制備實驗——從單層培養中制備
實驗材料單層培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗——從懸浮培養中制備
實驗材料懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
痘苗病毒儲液制備
基本方案 噬斑分析測定滴度 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 HeLa S3
痘苗病毒儲液制備
實驗材料懸浮培養的 HeLa S3 細胞痘苗病毒試劑、試劑盒完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶儀器、耗材Sorvall H-6000A 轉子150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 用血細胞計數器對懸浮培養的 HeLa S3 細胞進行細胞計數。2. 將 5×
痘苗病毒儲液制備
實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 HeLa S3 細胞痘苗病毒試劑、試劑盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶儀器、耗材 Sorvall H-6000A 轉子150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 用血細胞計數器對懸浮培養的 HeLa S3 細胞進行細
病毒包裝技術5——腺病毒載體的制備介紹
1 菌液的準備 1.1. 取含目的質粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上,37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落,挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液,則需取庫存質粒進行轉化,然后挑單克隆搖菌。 1.2. 將單
桿狀病毒毒種貯液的制備實驗
桿狀病毒是一類具有囊膜包裹的雙鏈環狀DNA病毒,其基因組大小為80~180 kb,在自然界中以節肢動物作為專一性宿主進行感染和傳播。實驗材料桿狀病毒試劑、試劑盒胎牛血清重組病毒儀器、耗材培養箱培養瓶轉子實驗步驟從單層培養中制備:?1a. ?以毎瓶1.8×107?Sf9細胞的密度,將細胞接種于兩個15
假包膜型反轉錄病毒載體的制備實驗
實驗材料反轉錄病毒載體質粒試劑、試劑盒293GP 和 NIH3T3 細胞的培養物儀器、耗材超速離心機細胞培養皿聚丙烯管滅菌無熱原的注射器式濾器超干凈的離心管寬嘴離心瓶超速離心機G S A 轉子實驗步驟展開