DEAESephadexA50提取法純化多克隆抗體
DEAE-Sephadex A-50(簡稱A-50)為弱堿性陰離子交換劑,經過NaOH處理將Cl-型轉為OH-型后,可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白屬中性蛋白,等電點為pH6.85~7.5,其余均屬酸性蛋白。在溶液為pH8.0時,酸性蛋白均被A-50 吸附。從而可分離純化IgG。 1. 批量吸附法 此法可在1天內完成提取過程,純化前后樣品體積變化不大,所得IgG無變性現象,抗體效價亦無明顯降低。制品可達PAGE及免疫電泳純。適用于提純人、羊、兔等血清中的IgG。 【材料和試劑】 (1)DEAE-Sephadex A-50。 (2)PB緩沖液:0.01mol/L,pH6.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液。 【操作步驟】 ......閱讀全文
troponin蛋白純化-Protein-purification:-troponins
Overview??TROPONINS?The calcium-dependent regulatory protein complex located on the thin actin filaments of muscle comprises of TnC (17.8 kDa), TnI (2
免疫球蛋白純化技術
鹽析法純化免疫球蛋白 DEAE-Sephadex A-50柱層析純化免疫球蛋白 Sepharose CL-4B親和柱層析純化IgG及IgG亞類 高效液相色譜純化小鼠腹水中單克隆抗體 單克隆抗體親和層析柱純化重組人α2a干擾素(rHuIFN-
高鎂鋰比鹽湖鹵水中溶劑萃取法提鋰技術穩健發展
解決溶劑萃取法提鋰的溶劑損失問題將大幅提高提鋰效率。 現代社會的所有電子設備幾乎都需要電池提供能源,而鋰電池是其中非常重要的一種。從手機電池、電腦電池到汽車電池,鋰電池幾乎可以說在我們的生活中無處不在。也許我們應該考慮一個問題,鋰電池中的鋰從哪里來? 鋰資源分布與獲取 在我國,鋰資源主要有
多克隆抗體提取實驗
實驗材料 血清試劑、試劑盒 DEAE纖維素磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 燒杯布氏濾斗濾紙實驗步驟 1. ?稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50 g,置于1 000 ml燒杯中,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒,再經酸堿處理后,用0.01~0.05 mol/L,pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡
多克隆抗體的制備
多克隆抗體的制備?1. 器材:?剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科手術剪(剪血管用)一把,手術刀架,手術刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑 18cm)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,手術縫合線,塑
多克隆抗體的定義
多個不同克隆B細胞針對多種抗原表位所產生的多種抗體的混合物稱為多克隆抗體。也稱第一代人工抗體,如免疫血清。
多克隆抗體制備
1. 免疫動物:兩只新西蘭兔?2. 佐劑:首先用完全弗氏佐劑(CFA),后用不完全弗氏佐劑(IFA)。?3. 免疫原:蛋白或KLH偶聯的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。?4. 免疫:用生理鹽水稀釋免疫原,然后與相應的佐劑進行1:1混合。抗原和佐劑完全混合形成穩定的乳劑,將該乳劑在兔子雙肩周圍
利用紫外引導的開放操作純化策略對天然產物提...(二)
為進一步精簡HPLC純化過程,僅使用開放操作系統的登錄頁面即可簡化方法的選擇,如圖2所示。勾選登錄按鈕后,用戶可通過手動進樣器簡單實現進樣。檢測運行完成后,結果可被打印出來或電郵發送給用戶。這些梯度旨在確保即使用戶選擇了一種欠佳的方法,所有潛在的目標化合物也能從柱上被洗脫下來并得到收集。關于這一點的
利用紫外引導的開放操作純化策略對天然產物提...(一)
利用紫外引導的開放操作純化策略對天然產物提取物進行制備應用效益本應用文獻介紹了通過開放操作型純化系統來幫助化學師簡化原料提取物純化方法選擇的技術。與一種用于各種提取物的通用方法相反,簡單的方法選擇標準(基于薄層色譜分析)使分離方法可根據具體的提取物量身打造。這使化學師可減少進行再分析和再純化步驟的次
動物血中超氧化物歧化酶(superoxide-dismutase,SOD)的提取
[原理]l969年,McCord和Fridovich第一次從牛血中提純到超氧化物岐化酶。 自然界中SOD分布極廣,其含量隨生物體的不同而不同,即使同一種生物的不同組織或同一組織的不同部位,其SOD的種類和含量也有很大差別。迄今為止人們已從細菌,真菌、原生動物。藻類、昆蟲、魚類、植物和動物等各種生
SPA-各種免疫檢測試劑制備實驗
實驗方法原理 SPA 純品系由含 A 蛋白的 Cowan I 株金黃色葡萄球菌中純化獲得。其制備過程除細菌培養外,主要有提取和純化這兩個工藝組成。提取方法多種,其中溶葡萄球菌素與親和色譜組合方法最有效。現介紹如下。實驗材料 菌苔試劑、試劑盒 Tris · HCl碳酸氫銨溶葡萄球菌素飽和硫酸銨儀器、耗
SPA-各種免疫檢測試劑制備實驗——SPA-純品
實驗方法原理SPA 純品系由含 A 蛋白的 Cowan I 株金黃色葡萄球菌中純化獲得。其制備過程除細菌培養外,主要有提取和純化這兩個工藝組成。提取方法多種,其中溶葡萄球菌素與親和色譜組合方法最有效。現介紹如下。實驗材料菌苔試劑、試劑盒Tris · HCl碳酸氫銨溶葡萄球菌素飽和硫酸銨儀器、耗材DE
萃取法
利用溶質在互不相溶的溶劑里溶解度的不同,用一種溶劑把溶質從另一溶劑所組成的溶液里提取出來的操作方法。例如,用四氯化碳從碘水中萃取碘,就是采用萃取的方法。萃取分離物質的操作步驟是:把用來萃取(提取)溶質的溶劑加入到盛有溶液的分液漏斗后,立即充分振蕩,使溶質充分轉溶到加入的溶劑中,然后靜置分液漏斗。待液
用酸性酚硫氰酸胍氯仿提取法純化組織和細胞中的-RNA
實驗方法原理 在提取過程的第一階段細胞的 RNA 酶應盡快滅活。一旦內源的 RNA 酶被破壞,RNA 受損的可能就大大降低,而純化的過程就可以按合適的速度進行。實驗材料 細胞和組織試劑、試劑盒 氯仿乙醇異丙醇液氮苯酚磷酸緩沖鹽溶液 PBS乙酸鈉溶液 D(變性液)儀器、耗材 比色杯組織勻漿器研棒和研缽
用酸性酚硫氰酸胍氯仿提取法純化組織和細胞中的-RNA
在提取過程的第一階段細胞的 RNA 酶應盡快滅活。一旦內源的 RNA 酶被破壞,RNA 受損的可能就大大降低,而純化的過程就可以按合適的速度進行。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理在提取過程的第一階段細胞的 RNA 酶應盡快滅活。一旦內源的 RNA 酶被破壞,RNA 受損的
用酸性酚硫氰酸胍氯仿提取法純化組織和細胞中的-RNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在提取過程的第一階段細胞的 RNA 酶應盡快滅活。一旦內源的 RNA 酶被破壞,RNA 受損的可能就大大降低,而純化的過程就可以按合適的速度進行。 實驗材料
多克隆抗體的組織結構
抗原上那部分可以引起機體產生抗體的分子結構,叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產生好幾種不同的抗體,最終產生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目
多克隆抗體的制備步驟
實驗試劑生理鹽水(或PBS)弗氏完全佐劑(Freund’s complete adjuvant,FCA)弗氏不完全佐劑(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)二甲苯,酒精棉,脫脂棉,2% NaN3實驗設備剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科
多克隆抗體的抗體分類
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(Monoclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決
多克隆抗體技術概述1
一、多克隆抗體的概念?抗原刺激機體,產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。?抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(M
關于多克隆抗體的簡介
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴
多克隆抗體的功能特點
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗
多克隆抗體的功能介紹
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細
多克隆抗體的制備方法
一、器材?剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科手術剪(剪血管用)一把,手術刀架,手術刀片,注射器(1ml、 10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑18cm)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,手術縫合線,塑料放血管,紗布等
多克隆抗體的制備步驟
實驗概要本實驗通過兔免疫制備了多克隆抗體。主要試劑生理鹽水(或PBS)弗氏完全佐劑(Freund’s complete adjuvant,FCA)弗氏不完全佐劑(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)二甲苯,酒精棉,脫脂棉,2% NaN3主要設備剪刀(剪兔毛用)一把、彎
多克隆抗體技術概述2
(3)脂質體:是人工制備的類脂質的小球體,由一個或多個酷似細胞膜的類脂雙分子層組成,這種結構使其能夠攜帶各種親水的、疏水的和兩性物質,他們被包裹在脂質體內部的水相中,或插入類脂雙分子層或吸附、聯接在脂質體的表面,起到明顯的免疫增強作用。?(4)油佐劑:采用植物油和礦物油均可,包括豆油、花生油、油菜油
多克隆抗體的制備步驟
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:1、制備抗原。2、選擇實驗動物。3、動物免疫。4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。6、純化出抗體。7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。具體操作與制備原理參見中國免疫學實驗網。(一)抗原制備Ig 是免疫球蛋白,對異種動
液相萃取法和氣相萃取法
相同:兼具分離和分析功能,均可以在線檢測主要差別:(1)操作條件差別(2)進樣方式差別(3)檢測器差別(4)流動相差別(5)分析對象差別詳細:(1)操作條件差別 GC:加溫操作 HPLC:通常室溫操作,高壓泵操作(2)進樣方式差別 GC:樣品需加熱氣化或裂解 HPLC:樣品制成溶液即可(3)檢測器差
鈣調蛋白的-DEAE-SEPHADEX-A50-陰離子交換
鈣調蛋白的 DEAE SEPHADEX A-50 陰離子交換層析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉
多克隆抗體的免疫電泳
【實驗原理】?免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術,這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的實驗方法。在這項實驗技術中,首先利用蛋白質的分子量和所帶電荷的比值運用水平瓊脂糖凝膠電泳技術將蛋白質進行分離,然后將特異性的抗體引入到與電泳方向平行的凹槽中,在抗