多克隆抗體提取實驗
實驗材料 血清試劑、試劑盒 DEAE纖維素磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 燒杯布氏濾斗濾紙實驗步驟 1. 稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50 g，置于1 000 ml燒杯中，先以蒸餾水漂浮除去細顆粒，再經酸堿處理后，用0.01～0.05 mol/L，pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡。2. 將水分抽干，或用布氏濾斗(內放兩層濾紙)過濾，收集濕纖維素，以降低其離子強度。按1 ml血清加濕重5 g DEAE纖維素，經過充分攪拌，置4℃吸附1 h。上清液可再如此處理一次，即獲得較純的IgG。......閱讀全文
多克隆抗體提取實驗
實驗材料 血清試劑、試劑盒 DEAE纖維素磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 燒杯布氏濾斗濾紙實驗步驟 1. ?稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50 g，置于1 000 ml燒杯中，先以蒸餾水漂浮除去細顆粒，再經酸堿處理后，用0.01～0.05 mol/L，pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡
多克隆抗體提取實驗——批量提取法
由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。主要用于（1）批量提取多個抗體（2）為進一步驗證抗體的作用進行基礎操作。實驗方法原理由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內所產生的抗
多克隆抗體純化實驗_辛酸提取法
辛酸提取法可用于分離提取人、兔、小鼠血清中的Ig及雜交瘤誘生的腹水和培養上清液中McAb。實驗材料動物血清樣品試劑、試劑盒正辛酸醋酸緩沖液PBS儀器、耗材透析袋高速低溫離心機實驗步驟一、材料和試劑?1. ? 正辛酸?2. ?60 mmol/L，pH4.0醋酸緩沖液，PBS?3. ?透析袋?4. ?高
辛酸提取法純化多克隆抗體
該法可用于分離提取人、兔、小鼠血清中的Ig及雜交瘤誘生的腹水和培養上清液中McAb。 【材料和試劑】? （1）正辛酸。? （2）60mmol/L，pH4.0醋酸緩沖液，PBS。? （3）透析袋。? （4）高速低溫離心機。? 【操作步驟】 （1）將待提取樣品用60mmol/L，pH4.0
多克隆抗體提取實驗——TrisCl離子交換層析法
實驗材料免疫血清雜交瘤腹水飽和硫酸銨粗提品試劑、試劑盒DE32或DE52纖維素Tris-ClNaClNaOHHCl儀器、耗材層析柱透析袋紫外分光光度計實驗步驟一、材料和試劑?1. ?DE32或DE52纖維素。?2. ?HCl；NaOH；0.01～0.05 mol/L，pH8.0 PB；0.01 mo
多克隆抗體純化實驗
實驗材料 動物血清樣品試劑、試劑盒 正辛酸醋酸緩沖液PBS儀器、耗材 透析袋高速低溫離心機實驗步驟 一、材料和試劑?1. ? 正辛酸?2. ?60 mmol/L，pH4.0醋酸緩沖液，PBS?3. ?透析袋?4. ?高速低溫離心機?二、操作步驟?1. ?將待提取樣品用60 mmol/L，pH4.0醋
多克隆抗體提取實驗——TrisPO4－離子交換層析法
實驗材料免疫血清雜交瘤腹水飽和硫酸銨粗提品試劑、試劑盒DE32纖維素DE52纖維素梯度洗脫液Tris-PO4儀器、耗材層析柱透析袋紫外分光光度計實驗步驟一、材料和試劑?1. ?DE32或DE52纖維素。?2. 待純化標本：雜交瘤腹水或培養上清，免疫血清或飽和硫酸銨粗提品。?3. 1.5x50 cm
DEAE纖維素提取法純化多克隆抗體
該法提取IgG簡便，既可小量提取，也可大量制備。?1．批量提取法 稱取DEAE-纖維素（DE32或DE52）50g，置于1000ml燒杯中，先以蒸餾水漂浮除去細顆粒，再經酸堿處理后，用0.01～0.05mol/L，pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液（PB）平衡。將水分抽干，或用布氏濾斗（內放兩層
DEAESephadex－A50提取法純化多克隆抗體
DEAE-Sephadex A-50（簡稱A-50）為弱堿性陰離子交換劑，經過NaOH處理將Cl-型轉為OH-型后，可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白屬中性蛋白，等電點為pH6.85～7.5，其余均屬酸性蛋白。在溶液為pH8.0時，酸性蛋白均被A-50 吸附。從而可分離純化IgG。?? ? 1. 批
多克隆抗體的免疫電泳實驗
【實驗原理】 免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術，這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM'' IgG'' IgA含量水平的實驗方法。在這項實驗技術中，首先利用蛋白質的分子量和所帶電荷的比值運用水平瓊脂糖凝膠電泳技術將蛋白質進行分離，然后將特異性
多克隆抗體的免疫電泳實驗
【實驗原理】免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術，這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM'' IgG'' IgA含量水平的實驗方法。在這項實驗技術中，首先利用蛋白質的分子量和所帶電荷的比值運用水平瓊脂糖凝膠電泳技術將蛋白質進行分離，然后將特異性的抗體
多克隆抗體
Making Antibody·?????????Production of Polyclonal Antibody in Rabbit?(Walter Steffen)Provides detailed protocol for immunizatioin, bleeding procedure,
什么是多克隆抗體，多克隆抗體的優勢？
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位，以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆，產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體，因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是：作用全面，具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細
抗磷酸肽的多克隆抗體制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 用磷酸肽-BSA 交聯物免疫過的兔的粗制血清試劑、試劑盒 PBS／疊氮化物MgCl2儀器、耗材 分光光度計透析袋填裝有 BSA-瓊脂糖親和介質的柱子填裝有磷酸酪氨酸親和介質的柱子填裝有同種非磷酸肽親和介質的柱子填裝有同源的磷酸肽親和介質的柱子填裝有陽性-篩選的磷酸肽親和介質的
抗磷酸肽的多克隆抗體制備實驗
實驗材料用磷酸肽-BSA 交聯物免疫過的兔的粗制血清試劑、試劑盒PBS／疊氮化物MgCl2儀器、耗材分光光度計透析袋填裝有 BSA-瓊脂糖親和介質的柱子填裝有磷酸酪氨酸親和介質的柱子填裝有同種非磷酸肽親和介質的柱子填裝有同源的磷酸肽親和介質的柱子填裝有陽性-篩選的磷酸肽親和介質的柱子實驗步驟1. 將
多克隆抗體制備實驗_弗氏佐劑免疫法
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機體，由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體（Monclone antibody）。由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內所產生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定
多克隆抗體制備
1. 免疫動物：兩只新西蘭兔?2. 佐劑：首先用完全弗氏佐劑（CFA），后用不完全弗氏佐劑（IFA）。?3. 免疫原：蛋白或KLH偶聯的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。?4. 免疫：用生理鹽水稀釋免疫原，然后與相應的佐劑進行1:1混合。抗原和佐劑完全混合形成穩定的乳劑，將該乳劑在兔子雙肩周圍
多克隆抗體的制備
多克隆抗體的制備?1. 器材：?剪刀（剪兔毛用）一把、彎頭眼科手術鑷子（游離血管用）一把、直頭眼科手術剪（剪血管用）一把，手術刀架，手術刀片，注射器(1ml、10ml，25ml)附針頭，兔子固定架，滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿（直徑 18cm）、彎頭止血鉗四把，直頭止血鉗兩把，手術縫合線，塑
多克隆抗體的定義
多個不同克隆B細胞針對多種抗原表位所產生的多種抗體的混合物稱為多克隆抗體。也稱第一代人工抗體，如免疫血清。
動物RNA提取實驗——Trizol試劑提取法
實驗方法原理Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液，其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性，隨后加入氯仿，酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中，RNA則分布在上層的水相中，最后用異丙醇沉淀水相中的RNA，并用70
植物DNA提取實驗
機械法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這是一種快速簡便提取植物總DNA的方法。先將新鮮的葉片在液氮中研磨，以機械力破碎細胞壁，然后加入十六烷三甲基溴化銨分離緩沖液，使細胞膜破
植物DNA提取實驗
實驗方法原理?真核細胞基因組在提取過程中一般有以下幾步，首先是機械法破細胞抽提；然后去除蛋白質，糖類等細胞內雜質污染；最后純化出DNA。實驗材料?幼嫩的植物材料試劑、試劑盒?液氮CTAB抽提緩沖液NaACTris-HCl EDTA氯仿異戊醇TE buffer儀器、耗材?瓷研缽離心管離心機實驗步驟 一
病毒RNA提取實驗
病毒RNA提取可以：（1）用于RNA病毒復制機制研究；（2）用于反向遺傳學研究；（3）用于分子病毒學其他研究。實驗方法原理大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ，并且其極性與mRNA 極性相同，植物病毒RNA 提取較為簡單，一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。實驗材料TMV病毒液試劑、試劑盒TE-飽和酚:氯
病毒RNA提取實驗
TE-飽和酚/氯仿提取法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ，并且其極性與mRNA 極性相同，植物病毒RNA 提取較為簡單，一般使用酚氯仿即可獲
DNA的提取實驗
掌握核酸提取與純化的方法，離心技術的合理使用．酚為有效的蛋白質變性劑，并且飽和的酚與水相有效的分開．因此，在含核酸的樣品加入酚，可將樣品中的蛋白質變性后形成沉淀層，本實驗來源于牡丹江醫學院 本科 5 年制檢驗專業實驗指導實驗方法原理酚為有效的蛋白質變性劑，并且飽和的酚與水相有效的分開．因此，在含核酸
DNA的提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 酚為有效的蛋白質變性劑，并且飽和的酚與水相有效的分開．因此，在含核酸的樣品加入酚，可將樣品中的蛋白質變性后形成沉淀層，位于水相與有機相的界畫，從而達到純化核酸的目的．但酚不能完全抑制RNA酶的活性，而且酚層中含有10－15%的水
總RNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一些公司推出的總RNA 提取試劑盒，可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RNA 酶抑制劑，異硫氰酸弧(GTC)和β-巰基乙醇，加上整個操作都在冰浴下進行，這樣就能顯著降低RNA 的
質粒DNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性，再將pH值調至中性使其復性，復性的為質粒DNA，而染色體DNA不會復性，纏結成網狀物質，通過離心除去。
動物RNA提取實驗
實驗方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養細胞和白細胞中提取純化完整總RNA，方法簡單、快速。該系統以膜為基礎，根據組織類型的不同，每次最多可純化60 mg 組織。系統包含DNase 處理步驟，直接在小離
DNA的提取實驗
實驗方法原理 酚為有效的蛋白質變性劑，并且飽和的酚與水相有效的分開．因此，在含核酸的樣品加入酚，可將樣品中的蛋白質變性后形成沉淀層，位于水相與有機相的界畫，從而達到純化核酸的目的．但酚不能完全抑制RNA酶的活性，而且酚層中含有10－15%的水,從而溶解一部分poly－（A）RNA。將酚與氯仿聯合使用