標記裂解培養細胞實驗
基本方案 溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞）基本方案 溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞）SDS煮沸法裂解細胞實驗方法原理實驗材料待標記的培養細胞 試劑、試劑盒37℃標記培養液 &n......閱讀全文
紅細胞裂解的實驗方法步驟
IntroductionPrior to using lymphoid tissue cell suspensions for flow cytometric analysis and/or for?in vitro?functional assays, it is recommended to r
氨基酸代謝標記實驗_基本方案－對懸浮培養細胞
實驗方法原理在含有放射性標記氨基酸的培養基中，短期培養細胞（800 Ci／mmol)／[35S]標記蛋白質水解產物試劑、試劑盒PBS(冷凍)37℃ 脈沖標記培養基儀器、耗材配有液體同位素垃圾閥門的真空吸氣器實驗步驟1. 室溫融化 [35S] 標記甲硫氨酸，并用預熱的（37℃）脈沖標記培養基制備 0.
靶細胞殺傷實驗：AnnexiV標記法
正常細胞的磷酯酰絲氨（phosphatidylserine，PS）位于細胞膜內表面，細胞凋亡時翻轉露于膜外側，可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的釋放。將效應細胞與靶細胞充分共育后，用PE結合的效應細胞特異性單克隆抗體（如CD
單個神經細胞標記實驗
用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982)，在該文獻中也可找到更詳細的技術指導（也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦試劑、試劑盒利多卡因Karnovsky 型固定液甲酚紫儀器、耗材微
單個神經細胞標記實驗
實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982)，在該文獻中也可找到更詳細的技術指導（也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑
單個神經細胞標記實驗
用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982)，在該文獻中也可找到更詳細的
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
上皮細胞類培養實驗_肝細胞培養實驗
實驗方法原理肝實質由大量肝細胞和少量間質組成，人胎兒、成人和動物的肝臟皆可用于培養；肝臟具有取材方便和易于生長的優點，能獲得典型上皮細胞培養。肝細胞形態規整，有多種功能并具有代謝活化致癌物的能力，適用做多種研究；我國已建有多個人肝癌細胞系。實驗材料肝臟試劑、試劑盒BSS消化液胰蛋白酶膠原酶儀器、耗材
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每
細胞培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞試劑、試劑盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
DNA裂解分析實驗
瓊脂糖凝膠電泳 個體核的PI熒光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
DNA裂解分析實驗
實驗材料?細胞試劑、試劑盒?溶解緩沖液RNA 酶A T1 混合液蛋白酶 KDNA 加樣緩沖液儀器、耗材?Eppendorf 管移液管瓊脂糖凝膠實驗步驟 1. 將 5X105 細胞移入無菌的 1.5 ml Eppendorf 管中，4℃ 2000 r/min 離心 5 分鐘，棄上清。2. 加入 20
DNA裂解分析實驗
瓊脂糖凝膠電泳 個體核的PI熒光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
制備細胞裂解液
實驗流程：1. 收集胰蛋白酶消化的細胞并離心，用PBS清洗。2. 用100μl 裂解緩沖液冰浴溶解沉淀10min（每500000個細胞20μl裂解緩沖液）。3. 10000rpm，4°C離心10min，取上清轉移至新管。4. 用考馬斯亮藍法檢測蛋白質濃度。5. 用裂解緩沖液將溶液濃度調到5mg/ml
上皮細胞類培養實驗_內皮細胞培養實驗
實驗方法原理內皮細胞易于從血管分離進行培養成單層細胞，對研究內皮細胞再生生、腫瘤促血管生長因子（TAF）等有很大應用價值。人內皮細胞培養可應用人臍帶臍靜脈、動物大動脈等，用灌流消化法獲取細胞最為簡便。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液PBS儀器、耗材注射器離心管培養基實驗步驟1. ?取產后的新鮮臍
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
用[32P]磷酸標記細胞實驗
標記單層培養細胞標記懸浮培養的HeLa細胞實驗材料HeLa 細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒FCS ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
用[32P]磷酸標記細胞實驗
標記單層培養細胞 標記懸浮培養的HeLa細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 HeLa 細胞
用[32P]磷酸標記細胞實驗
實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 FCS磷酸鹽儀器、耗材 無磷酸培養基實驗步驟 1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基，加入新鮮的無磷酸培養基，培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基，并加 32P 磷酸
紅細胞裂解液法體外分離培養兔骨髓間充質干細胞
骨髓間充質干細胞是存在于骨髓腔內具有很強增殖 能力及多向分化潛能的一類成體干細胞，在一定條件下其不僅可以分化為同源于中胚層的間質細胞，還可以誘導分化為骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、上皮樣細胞、 心肌細胞、肝細胞等。近年來隨著組織工程技術的快速發展，骨髓間充質干細胞的體外分離、培養及其增殖特 性的相關研
結締組織類細胞培養實驗——巨噬細胞培養實驗
實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得，便于培養，并可進行純化。但屬不繁殖型細胞群，難以長期生存，好的條件下僅能生活2~3 周，因之多用作初代培養。巨噬細胞也能建成無限細胞系；大多來自小鼠，如P388D-1、J774A.1、RAW
上皮細胞類培養實驗_胃上皮細胞培養實驗
實驗方法原理胃癌為我國高發癌癥之一，培養正常人胃上皮細胞對研究胃癌癌變機理有很大應用價值。近年來培養人的腎臟上皮、氣管上皮、前列腺上皮等都有報道，但培養人胃上皮細胞少見成功。近年我研究室通過培養90例正常胃上皮細胞初代培養獲得成功，并建成轉化細胞系（Ges-1）。培養人正常胃上皮細胞獲得成功主要在于
特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上，初代培養細胞和有限細胞系（二倍體細胞）比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是，當體內任何細胞被置于體外培養后，對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用，即從培養液中攝取營養的同時，也向培養液排
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
氨基酸代謝標記實驗_備擇方案－3－長期細胞標記
實驗方法原理長期標記意味著對細胞進行 6～32 h 持續的代謝標記。該方法特別適用于研究合成速度相對較慢的蛋白質或研究成熟的標記蛋白而不是生物合成的前體。穩定狀態的標記是長期標記的一種形式，在此過程細胞和放射性標記的氨基酸一起孵育直至放射性標記蛋白的合成和降解速率相當。如果蛋白質復合體中的亞基的初級
培養細胞的染色實驗
Giemsa染色法 蘇木精伊紅染色法 Feulgen染色法 吖啶橙染色熒光觀察法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Giemsa 染色是最常用的方法
羊水細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞，可在體外培養用以檢驗胎兒核型。 試劑、試劑盒 碘酒 酒精 營養液
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成