傳代培養法／組織塊培養法／初代消化培養常規組織培養法
一、初代消化培養法 1、 準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。 3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污;如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。 4、剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。 5、 消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。 6、 分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/m......閱讀全文
傳代培養法/組織塊培養法/初代消化培養常規組織培養法
一、初代消化培養法 1、 準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。 3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污;如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的
常規組織培養法:初代消化培養法、初代組織塊培養法與...
常規組織培養法:初代消化培養法、初代組織塊培養法與傳代培養法 1）初代消化培養法： 1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。 3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液
細胞傳代培養（消化法）
?細胞傳代培養（消化法）一. 傳代前準備： 預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。3.正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染。4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。5.準備
植物組織培養能傳代培養嗎
當然可以，注意調整生長素和細胞分裂素的比例就可以了。例如生產紫草素是就是將紫草細胞愈傷組織傳代培養獲得的。一般如果想獲得細胞產品，往往將愈傷組織進行傳代培養。
細胞原代培養實驗——組織塊直接培養法
實驗材料孕鼠新生小鼠試劑、試劑盒RPMI1640培養基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素鏈霉素儀器、耗材培養瓶青霉素瓶廢液缸血球計數板蠟盤手術器械大頭針離心管小玻璃漏斗三角燒瓶平皿吸管試管移液管無菌紗布無菌眼科剪實驗步驟?一、將孕鼠或新生小鼠拉頸椎致死，置75%酒精泡2-3秒鐘（時間不能過長、以免
初代細胞培養實驗——組織塊培養法
實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶NaHCO3儀器、耗材吸管培養瓶燒杯眼科剪眼科鑷實驗步驟1. ?剪切把組織小塊（1cm3）置入小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸凈Hanks液，用眼科剪反復剪切成1mm3塊為止；2. ?擺布用彎頭吸管吸取若干小塊，置入培養
關于組織塊培養法的概述
一、翻轉干涸 1、將組織剪成1mm3左右的組織塊 2、用PBS緩沖液清洗組織塊3次 3、將組織塊按照一定間距轉入培養瓶內 4、輕輕將培養瓶翻轉過來，將適量培養液加到非細胞生長面上，注意翻瓶時勿令組織小塊流動，塞好瓶塞置36.5℃溫箱培養2小時左右（勿超過4小時），使小塊微干涸 5、從微
消化法細胞傳代培養的操作步驟
我們實驗室是首先吸去舊培養基，加入約2ml胰蛋白酶洗一遍，吸去胰酶，再加入約1ml胰酶，消化2-3分鐘（37度），吸去胰酶加入新鮮培養基越4ml，對細胞進行吹打直至打散，此時可以吸去部分細胞懸液，再補充至4ml,就OK
腫瘤細胞原代培養實驗——組織塊法
腫瘤細胞原代培養可以：（1）研究癌變機理；（2）研究抗癌藥檢測；（3）研究癌分子生物學；（4）用于闡明和解決癌癥。實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血清濃度即可，在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）
細胞培養傳代培養的培養步驟
1、附著型胞(adherentcell)（1）吸掉舊培養液。（2）用D-PBS洗滌細胞一至二次。（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用數分鐘，于倒立顯微鏡下觀察，當細胞將要分離而呈現圓粒狀時，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去tryps
細胞傳代培養
實驗概要? ? 細胞生長至高密度時，即須分殖至新的培養瓶中，一般稀釋比例為1:3 至1:6，依細胞種類而異。實驗材料? ? 無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca /Mg free, D-PBS,GibcoBRL 21600-010)??
細胞傳代培養
一、原理細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。二、材料和試劑1、細胞：貼壁細胞株2、試劑
細胞培養傳代培養的方法
1．懸浮生長細胞傳代多采用離心法傳代。1000轉/分,20-30秒后去上清。沉淀細胞加新培養液后再混勻傳代。亦有直接傳代法，即懸浮細胞沉淀在瓶壁時，將上清培養液去除1/2-1/3，然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代.2．半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）此類細胞部分呈現貼壁生長現象，但貼壁不牢，可
傳代培養的培養實驗原理介紹
傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。
原代培養與傳代培養知識
原代培養:即第一次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義： ●培養物一經接種到培養器皿（瓶）中就不在分割，任其生長繁殖； ●原代培養中的“代”并非細胞的“代”數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞； ●原代培養過程
細胞培養傳代培養的定義
傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。傳代培養中的細胞傳代培養（subculture），當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速
原代細胞傳代培養
細胞培養過程中，傳代是非常重要的環節，若操作不當會給細胞帶來不可逆轉的傷害，原代細胞因其培養難度高且傳代次數有限，細胞消化的步驟需要格外細心與謹慎。美國ScienCell公司根據其豐富的原代細胞培養經驗，總結出一套細胞消化的方法，有效降低了消化步驟對細胞的操作。現分享給大家：1.?當細胞達到80-9
無血清傳代培養
黏附因子:如果除掉血清,就必須直接在培養基中加入25-50ug/ml的粘連蛋白或1-5ug/ml的層粘連蛋白用以處理塑料培養器皿的生長表面.用1mg/ml的多聚L-融賴氨酸預處理塑料培養器皿,可增強人類二倍體成纖維細胞的存活率。蛋白酶抑制劑:利用胰蛋白酶進行傳代培養后,加入血清可抑制剩余的蛋白水解酶
細胞傳代培養實驗
?體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續。二氧化碳培養箱是通過在培養箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環境，培養箱要求穩定的溫度（37°C）、穩定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）
細胞的傳代培養
一. 傳代前準備：1.預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。3.正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染。4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。5.準備好將要使用的消毒后的空
細胞傳代培養技巧
一、原理????細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。????傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。????二、材料和試劑??
什么是傳代培養？
傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。 傳代培養中的細胞傳代培養（subculture），當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制
細胞培養傳代培養所需材料
1、無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’sphosphate-bufferedsaline,Ca++/Mg++free,D-PBS, GibcoBRL21600-010)2、trypsin-EDTAsolution(0.05%trypsin-0.53mMEDTA-4Na,GibcoBRL25300
細胞培養傳代培養的實驗原理
傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。
細胞培養傳代培養的實驗步驟
實驗步驟1．入無菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒雙手。2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3．超凈臺臺面應整潔，用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空氣，除去
生化培養箱對雞胚背根神經節組織塊的培養
?主要用于神經生長因子(NGF)等神經營養因子的生物活性測定。在差倒置顯微鏡下觀察以神經突起的生長長度和密度為指標半定量評估NGF的活性。1、材料和方法(1)選正常受精的雞蛋，置于37℃生化培養箱內孵化，每日翻動雞蛋一次。(2)取孵化8-12 d 的雞蛋, 用70% 酒精消毒蛋殼，從氣室端敲開蛋殼，
常規細胞培養方法（原代培養和傳代培養）
原理將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。儀器、材料及試劑儀器：培養箱（調整至37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術器械、血
常規組織初代消化培養操作方法步驟
1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75% 酒精擦拭手至肘部。2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用 Hanks 液漂洗 2~3 次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的混合液中 30~60 分鐘。4、剪
巨噬細胞傳代培養應用什么培養基
傳代培養即一種細胞或組織或其他的培養方法。詳解：傳代培養中的細胞傳代培養（subculture），當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。此時就需要將培養物分割成小的
原代細胞培養和傳代培養的方法
原代培養 原理 將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用 EDTA 或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖這一過程稱原代培養。 儀器、材料及試劑 儀器：培養箱（調整至 37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸