消化法細胞傳代培養的操作步驟
我們實驗室是首先吸去舊培養基，加入約2ml胰蛋白酶洗一遍，吸去胰酶，再加入約1ml胰酶，消化2-3分鐘（37度），吸去胰酶加入新鮮培養基越4ml，對細胞進行吹打直至打散，此時可以吸去部分細胞懸液，再補充至4ml,就OK......閱讀全文
消化法細胞傳代培養的操作步驟
我們實驗室是首先吸去舊培養基，加入約2ml胰蛋白酶洗一遍，吸去胰酶，再加入約1ml胰酶，消化2-3分鐘（37度），吸去胰酶加入新鮮培養基越4ml，對細胞進行吹打直至打散，此時可以吸去部分細胞懸液，再補充至4ml,就OK
細胞傳代培養（消化法）
?細胞傳代培養（消化法）一. 傳代前準備： 預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。3.正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染。4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。5.準備
Hela細胞傳代培養操作步驟
1．觀察培養基是否正常，細胞狀態如何，細胞密度如何，決定是否傳代。觀察時擰緊蓋子。2．加熱PBS、versene、培養基，(提前做好) 瓶子不要倒著放，不要讓液體接觸到瓶塞。3．打開超凈臺（先開風機，后開照明），用75%乙醇清潔臺面，點燃酒精燈。不要把廢液缸拿出去倒，如果廢液太多，可以用其他容器先裝
細胞傳代培養試驗的操作步驟
1、將長滿細胞的培養瓶中原來的培養液棄去。 2、加入0.5—1ml 0.25%胰酶溶液，使瓶底細胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞，放在倒置鏡下觀察細胞。隨著時間的推移，原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時將胰酶棄去，加入10ml培養液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼，當見到瓶底發白并
細胞傳代培養原理、儀器試劑和操作步驟
一、原理細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。二、材料和試劑1、細胞：貼壁細胞株2、試劑
細胞的傳代培養原理、材料試劑和操作步驟
一、原理細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。二、材料和試劑1、細胞：貼壁細胞株2、試劑
傳代培養細胞染色體顯示法步驟
1.培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80%~90%匯合單層培養細胞。 2.加秋水仙素：使用最終濃度為0.02~0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6~10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6~12 小時后，再于37℃溫箱繼續培養6~10小時處理（加秋水仙素）。 3.
細胞傳代培養具體的操作步驟和注意事項
懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養基后直接吹打分散進行傳代，或用離心法后，加入新培養基后再吹打分散進行傳代貼壁細胞實驗需準備超凈臺噴灑酒精，紫外照射30min。準備好培養瓶/皿，離心管，10%DMEM，0.25%胰酶，D-hanks液等，帶上手套，口罩等，倒去舊培養基，用D-hanks液清洗一遍，去除沉
細胞傳代培養具體的操作步驟和注意事項
懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養基后直接吹打分散進行傳代，或用離心法后，加入新培養基后再吹打分散進行傳代貼壁細胞實驗需準備超凈臺噴灑酒精，紫外照射30min。準備好培養瓶/皿，離心管，10%DMEM，0.25%胰酶，D-hanks液等，帶上手套，口罩等，倒去舊培養基，用D-hanks液清洗一遍，去除沉
細胞傳代培養具體的操作步驟和注意事項
懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養基后直接吹打分散進行傳代，或用離心法后，加入新培養基后再吹打分散進行傳代貼壁細胞實驗需準備超凈臺噴灑酒精，紫外照射30min。準備好培養瓶/皿，離心管，10%DMEM，0.25%胰酶，D-hanks液等，帶上手套，口罩等，倒去舊培養基，用D-hanks液清洗一遍，去除沉
細胞傳代培養的步驟介紹
1、附著型胞(adherentcell) （1）吸掉舊培養液。（2）用D-PBS洗滌細胞一至二次。 （3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用數分鐘，于倒立顯微鏡下觀察，當細胞將要分離而呈現圓粒狀時，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移
細胞傳代培養的方法步驟介紹
1．入無菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒雙手。 2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。 3．超凈臺臺面應整潔，用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。 4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空
貼壁細胞的傳代培養步驟
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基
細胞培養傳代培養的培養步驟
1、附著型胞(adherentcell)（1）吸掉舊培養液。（2）用D-PBS洗滌細胞一至二次。（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用數分鐘，于倒立顯微鏡下觀察，當細胞將要分離而呈現圓粒狀時，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去tryps
細胞培養傳代培養的實驗步驟
實驗步驟1．入無菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒雙手。2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3．超凈臺臺面應整潔，用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空氣，除去
細胞凋亡檢測操作步驟之ELISA法
細胞凋亡發生時，內源性核酸內切酶將分解核小體區間的雙鏈DNA，但核小體本身由于由組蛋白緊密結合而免受切割，單克隆抗體可以與核小體形成夾心結構，可通過檢測核小體判斷細胞是否經歷凋亡事件。(一) 原理細胞凋亡的發生，是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp～200bp或其倍數的核小
傳代培養法/組織塊培養法/初代消化培養常規組織培養法
一、初代消化培養法 1、 準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。 3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污;如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的
細胞傳代實驗_消化法
實驗方法原理用胰蛋白酶消化細胞，用于貼壁細胞傳代培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶酒精PBS儀器、耗材超凈工作臺酒精燈酒精棉球培養箱顯微鏡吸管離心管離心機實驗步驟一、傳代前準備?1. ?預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。?2. ?用75%酒精
MTT法操作步驟
（1）單細胞懸液接種于96孔培養板；103-104細胞/孔，每孔培養基總量200微升（96孔培養板每孔容積370微升），37℃、5％CO2培養箱中培養一段時間（根據實驗目的決定培養時間）（2）加入2毫克／毫升的MTT液（50微升／孔）；繼續培養3小時。（3）吸出孔內培養液后，加入DMSO液（150微
數顯消化爐的消化步驟
樣品的消化步驟 稱取經粉碎通過40～60目/寸的試樣0.3～1g，無損地放入已洗凈烘干的消化管內，加水、催化劑和10mL硫酸。 1、將消化管分別放入各個消化架的各個孔內，然后置于消化器上，放上已裝好密封圈的排污管。 2、打開抽氣三通進水(自來水)，使抽氣三通處于吸氣狀態。 3、再接通電源
數顯消化爐的消化步驟
樣品的消化步驟 稱取經粉碎通過40～60目/寸的試樣0.3～1g，無損地放入已洗凈烘干的消化管內，加水、催化劑和10mL硫酸。 1、將消化管分別放入各個消化架的各個孔內，然后置于消化器上，放上已裝好密封圈的排污管。 2、打開抽氣三通進水(自來水)，使抽氣三通處于吸氣狀態。 3、再接通電源，
細胞周期檢測方法即PI法的操作步驟
1. 細胞培養：取對數生長期的細胞，按1×106cells/ mL以1mL接種24孔板或2mL接種于6孔板內，進行所需的處理（比如加入藥物），特定時間后終止培養，進行下一步的實驗。2. 細胞固定： 800rpm離心5min，收集細胞沉淀，棄上清，用預冷PBS洗滌兩次，加入預冷75%乙醇，于4℃固定4
切口平移法的操作步驟
1、用DNase I處理雙鏈DNA，使之隨機產生單鏈斷裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性從斷裂處5‘除去一個核苷酸，同時5‘-3'聚合酶活性將一個放射性核素標記的單核苷酸引入到斷裂的3'端。3、反應重復進行，結果標記的核苷酸代替了原來的核苷酸殘基，形成了放射性的DNA分子。
切口平移法的操作步驟
1、用DNase I處理雙鏈DNA，使之隨機產生單鏈斷裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性從斷裂處5‘除去一個核苷酸，同時5‘-3'聚合酶活性將一個放射性核素標記的單核苷酸引入到斷裂的3'端。3、反應重復進行，結果標記的核苷酸代替了原來的核苷酸殘基，形成了放射性的DNA分子。
傳代培養細胞染色體顯示法
1．培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。2．加秋水仙素：使用zui終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱繼續培養6～10小時處理（加秋水仙素）。3．采集分裂細
傳代培養細胞染色體顯示法
實驗概要? ? ? ? ?傳代培養細胞染色體顯示法實驗步驟1．培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。2．加秋水仙素：使用最終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱
細胞ELISA操作步驟
Cellular ELISA ProtocolFormalin Fixed Cell Plates1. Trypsinize confluent flasks2. Pool and count cells3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes4. Resus
細胞人工純化的酶消化法介紹
酶消化法是比較常用的純化方法，不僅對貼壁細胞可行，能利用上皮細胞和成纖維細胞對胰蛋白酶的耐受性不同，使兩者分開，達到純化的目的，對貼壁細胞與半貼壁及粘附細胞間的分離純化也是十分有效的。 (1)上皮細胞與成纖維細胞的分離純化 兩者在胰蛋白酶的作用下，由于成纖維細胞先脫壁，而上皮細胞要消化相當長
細胞純化酶消化法的方法介紹
酶消化法是比較常用的純化方法，不僅對貼壁細胞可行，能利用上皮細胞和成纖維細胞對胰蛋白酶的耐受性不同，使兩者分開，達到純化的目的，對貼壁細胞與半貼壁及粘附細胞間的分離純化也是十分有效的。
常規組織初代消化培養操作方法步驟
1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75% 酒精擦拭手至肘部。2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用 Hanks 液漂洗 2~3 次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的混合液中 30~60 分鐘。4、剪