何為熒光共振能量轉移技術
一、FRET技術基本原理熒光共振能量轉移是指兩個熒光發色基團在足夠靠近時,當供體分子吸收一定頻率的光子后被激發到更高的電子能態,在該電子回到基態前,通過偶極子相互作用,實現了能量向鄰近的受體分子轉移(即發生能量共振轉移)。FRET是一種非輻射能量躍遷,通過分子間的電偶極相互作用,將供體激發態能量轉移到受體激發態的過程,使供體熒光強度降低,而受體可以發射更強于本身的特征熒光(敏化熒光),也可以不發熒光(熒光猝滅),同時也伴隨著熒光壽命的相應縮短或延長。能量轉移的效率和供體的發射光譜與受體的吸收光譜的重疊程度、供體與受體的躍遷偶極的相對取向、供體與受體之間的距離等因素有關。作為共振能量轉移供、受體對,熒光物質必須滿足以下條件: 人們已經利用生物體自身的熒光或者將有機熒光染料標記到所研究的對象上,成功地應用于核酸檢測、蛋白質結構、功能分析、免疫分析及細胞器結構功能檢測等諸多方面。(傳統有機熒光染料吸收光譜窄,發射光譜常常伴有拖尾,這......閱讀全文
何為熒光共振能量轉移技術
一、FRET技術基本原理熒光共振能量轉移是指兩個熒光發色基團在足夠靠近時,當供體分子吸收一定頻率的光子后被激發到更高的電子能態,在該電子回到基態前,通過偶極子相互作用,實現了能量向鄰近的受體分子轉移(即發生能量共振轉移)。FRET是一種非輻射能量躍遷,通過分子間的電偶極相互作用,將供體激發態能量轉移
三色熒光級聯熒光共振能量轉移技術
熒光共振能量轉移(fluorescence resonance energytransfer,FRET),是指能量從一種受激發的熒光基團(fluorophore)以非輻射的方式轉移到另一種熒光基團的物理現象.FRET的能量轉移效率是兩個熒光基團間距離的函數,并對此距離十分敏感,它的有效響應距離一
熒光共振能量轉移(FRET)
一、活細胞研究遇到的問題:蛋白質或其他分子在活細胞內互相結合的時間和地點是了解它們功能的關鍵問題。要回答這一問題,需將蛋白質標上不同的熒光團。但是,光學顯微鏡的分辨率將蛋白質檢測精度限制在大約0.2μm左右。要研究蛋白質成分的相互物理作用,需要高的分辨率。二、什么是FRET?FRET就是采用非放射方
熒光共振能量轉移的特點
當一個熒光分子(又稱為供體分子)的熒光光譜與另一個熒光分子(又稱為受體分子) 的激發光譜相重疊時, 供體熒光分子的激發能誘發受體分子發出熒光, 同時供體熒光分子自身的熒光強度衰減。FRET 程度與供、受體分子的空間距離緊密相關, 一般為7~10 nm 時即可發生FRET; 隨著距離延長, FRET呈
熒光共振能量轉移的簡介
當一個熒光分子(又稱為供體分子)的熒光光譜與另一個熒光分子(又稱為受體分子) 的激發光譜相重疊時, 供體熒光分子的激發能誘發受體分子發出熒光, 同時供體熒光分子自身的熒光強度衰減。FRET 程度與供、受體分子的空間距離緊密相關, 一般為7~10 nm 時即可發生FRET; 隨著距離延長, FRE
熒光共振能量轉移發生條件
能量供給體-接受體(D–A)對之間發生有效能量轉移的條件是苛刻的,主要包括:(1)能量供體的發射光譜與能量受體的吸收光譜必須重疊;(2)能量供體與能量受體的熒光生色團必須以適當的方式排列;(3)能量供體、能量受體之間必須足夠接近,這樣發生能量轉移的幾率才會高。此外,對于合適的供體、受體分子在量子產率
熒光共振能量轉移發生原理
熒光共振能量轉移是指在兩個不同的熒光基團中,如果一個熒光基團(供體 Donor)的發射光譜與另一個基團(受體 Acceptor)的吸收光譜有一定的重疊,當這兩個熒光基團間的距離合適時(一般小于100?),就可觀察到熒光能量由供體向受體轉移的現象,即以前一種基團的激發波長激發時,可觀察到后一個基團發射
熒光共振能量轉移的發生原理
熒光共振能量轉移是指在兩個不同的熒光基團中,如果一個熒光基團(供體 Donor)的發射光譜與另一個基團(受體 Acceptor)的吸收光譜有一定的重疊,當這兩個熒光基團間的距離合適時(一般小于100?),就可觀察到熒光能量由供體向受體轉移的現象,即以前一種基團的激發波長激發時,可觀察到后一個基團
熒光共振能量轉移的發生條件介紹
能量供給體-接受體(D–A)對之間發生有效能量轉移的條件是苛刻的,主要包括:(1)能量供體的發射光譜與能量受體的吸收光譜必須重疊;(2)能量供體與能量受體的熒光生色團必須以適當的方式排列;(3)能量供體、能量受體之間必須足夠接近,這樣發生能量轉移的幾率才會高。此外,對于合適的供體、受體分子在量子
GFP-和熒光共振能量轉移技術測定蛋白質相互作用實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 進行轉染的細胞株 按第二階段所介紹的方法制備表達了蛋白質探針的細胞 試劑、試劑盒 N-二羥乙基甘氨酸
GFP-和熒光共振能量轉移技術測定蛋白質相互作用實驗
我們將方案分成三個階段: 第一階段介紹蛋白質的制備及蛋白質的熒光染料標記;第二階段,通過轉染或微注射將適當的探針成分導入細胞;第三階段,圖像的收集和分析過程。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料進行轉染的細胞株按第二階段所介紹的方法制備
GFP-和熒光共振能量轉移技術測定蛋白質相互作用實驗-1
實驗材料 進行轉染的細胞株按第二階段所介紹的方法制備表達了蛋白質探針的細胞試劑、試劑盒 N-二羥乙基甘氨酸消化緩沖液NN-二甲基甲酰胺磷酸鈉磷酸鹽緩沖溶液TE木瓜蛋白酶Cy3 和 Cy5 OSu 單功能硫代吲哚花菁琥珀酰亞胺酯抗體SDS-聚丙烯酰胺凝膠明膠溶液聚-L-賴氨酸質粒 DNAGFP 融合載
GFP-和熒光共振能量轉移技術測定蛋白質相互作用實驗-2
16. 標記反應以后,采用下述公式計算標記率:? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?Aλ X M / [ ( A280-? X Aλ ) X ελ ]式中 Aλ是染料在其最大吸收波長λ處的吸收度,A280 是蛋白質在 280nm 的吸收度,M 是以
測量生物發光共振能量轉移
fff簡介分子之間的能量轉移大多是由輻射導致的。然而當不同熒光物質非常靠近時(
測量生物發光共振能量轉移
fff簡介分子之間的能量轉移大多是由輻射導致的。然而當不同熒光物質非常靠近時(
熒光共振能量轉移FRET肽和寡核苷酸熒光標記的應用2
? ? ? ?FRET原理?? ? ? ?熒光共振能量轉移(FRET)是一種物理現象,在生物醫學研究和藥物發現中已經越來越流行。FRET是能量從供體分子(donor)到受體分子(acceptor)的無熱量傳輸。供體分子是最初吸收能量的熒光基團,而受體是隨后轉移能量的熒光基團,這種共振相互作用發生
熒光共振能量轉移FRET肽和寡核苷酸熒光標記的應用1
? ?? 熒光染料標記的肽和寡核苷酸是生化和細胞研究中的重要工具,目前熒光肽和寡核苷酸已廣泛用于所有主要類型的熒光成像中,包括熒光共振能量轉移(FRET),這些標記的生物分子被廣泛用于基于分子信標和其他技術的傳染病診斷。FRET肽和寡核苷酸也已通過熒光相關細胞分選(FACS)用于細胞分析,用于體內或
何為ATP熒光檢測儀
ATP熒光檢測儀可以表明樣品中微生物與其他生物殘余的多少,用于判斷衛生狀況。
何為ATP熒光檢測儀
YT-ATP生物熒光檢測儀基于螢火蟲發光原理,利用“熒光素酶—熒光素體系”快速檢測三磷酸腺苷(ATP)。由于所有生物活細胞中含有恒量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明樣品中微生物與其他生物殘余的多少,用于判斷衛生狀況。目前YT-ATP生物熒光檢測儀已經成為各級食品藥品監督管理等部門不可或缺的檢測
何為熱脫附技術
熱脫附技術是指在真空條件下或通入載氣時,通過直接或間接熱交換,將土壤中的有機污染物加熱到足夠的溫度,以使有機污染物從污染介質上得以揮發或分離,進入氣體處理系統的過程。熱脫附可通過調節加熱溫度和停留時間等方式有選擇地將污染物從一相轉化為另一相,在修復過程中并不出現對有機污染物的破壞作用。通過控制熱脫附
-過度醫療:何為因,何為果?
如今醫患關系勢同水火,病人對醫療的主要不滿之一是看病貴,而且普遍認為醫生過度檢查、過度治療是導致看病貴的原因。很多醫生,包括我自己也認為國內過度醫療很普遍。過度醫療在中國客觀存在,這已經成為共識,但是醫生檢查做得多,開的藥貴,做個手術幾千上萬,這是否就是過度醫療?對于什么是過度醫療,大部分人并不
什么是共振原子熒光
原子吸收輻射受激后再發射相同波長的輻射,產生共振原子熒光。若原子經熱激發處于亞穩態,再吸收輻射進一步激發,然后再發射相同波長的共振熒光,此種共振原子熒光稱為熱助共振原子熒光。如In451.13nm就是這類熒光的例子。只有當基態是單一態,不存在中間能級,沒有其它類型的熒光同時從同一激發態產生,才能產生
共振原子熒光的概念
原子吸收輻射受激后再發射相同波長的輻射,產生共振原子熒光。若原子經熱激發處于亞穩態,再吸收輻射進一步激發,然后再發射相同波長的共振熒光,此種共振原子熒光稱為熱助共振原子熒光。如In451.13nm就是這類熒光的例子。只有當基態是單一態,不存在中間能級,沒有其它類型的熒光同時從同一激發態產生,才能產生
中科院癌癥最新研究登Nature子刊
來自中科院化學研究所,解放軍總醫院附屬第一醫院的研究人員利用一種新型熒光共振能量轉移技術,分析了中國人群中結腸癌幾種相關基因的DNA甲基化水平,從中獲得了極高精確度和靈敏度的檢測結果,從而為結腸癌的診斷和治療提出了一種新思路。相關成果公布在Nature Communications雜志上。
何為模溫機
簡單的說法就是模具溫度控制器,它是配合射出成型機(亦稱注射機)在生產時所需要的設備范圍內的其中一種輔助性機械設備.
漫談熱脫附技術(一)——何為熱脫附技術
熱脫附技術是指在真空條件下或通入載氣時,通過直接或間接熱交換,將土壤中的有機污染物加熱到足夠的溫度,以使有機污染物從污染介質上得以揮發或分離,進入氣體處理系統的過程。熱脫附可通過調節加熱溫度和停留時間等方式有選擇地將污染物從一相轉化為另一相,在修復過程中并不出現對有機污染物的破壞作用。通過控制熱脫附
人工智能時代,教育何為大學何為?
自從ChatGPT出現以來,關于人工智能對教育影響的討論已持續了很長一段時間。對于每一位從事教育的人來說,除了關注如何用人工智能技術更好地去學習,還需要思考兩個問題:首先,我們是否知道未來社會到底需要什么樣的人,從而找到教育的應對方式。因為,我們都認為,人最有價值的特點就是思維能力,或者說我們不同于
生物大分子相互作用檢測技術新進展
熒光共振能量轉移 (fluorescence resonance energy transfer,FRET),是指能量從一種受激發的熒光基團 (fluorophore)以非輻射的方式轉移到另一種熒光基團的物理現象。FRET的能量轉移效率是兩個熒光基團間距離的函數,并對此距離十分敏感,它的有效
詳細解析實時熒光定量PCR探針法技術原理
目前主流的實時熒光定量PCR?(Quantitative Real-time PCR)方法分為染料法和探針法,染料法以SYBR Green法為代表,SYBR Green染料游離時熒光微弱,但但一旦與雙鏈DNA結合后,熒光大大增強,反應管中的熒光強度與反應管中雙鏈DNA的數量成正比例關系,因此熒光定量
生物學家轉移研究重點-開始關注基因調控
隨著人類和許多其他物種基因組測序工作的完成,生物學家開始將研究重點轉移到調控基因如何開啟和關閉功能基因的表達上,該類研究的進行需要依靠新技術和新工具的發明應用。近期在《自然—方法學》(Nature Methods)雜志上發表的相關文章表明,美國佛羅里達州立大學國家高磁實驗室研究人員與加拿大阿爾伯塔大